Caffeine increases Nr1i3 expression and potentiates the effects of its ligand, TCPOBOP, in mice liver

;Caffeine is one of the world's most consumed substances. It is present in coffee, green tea and guarana, among others. The xenobiotic-sensing nuclear receptor subfamily 1, group I, member 3 (Nr1i3), also known as the Constitutive Androstane Receptor (Car) is a key regulator of drug metabolism and excretion. No consistent description of caffeine effects on this receptor has been described. Thus, to unravel the effects of caffeine on this receptor, we performed experiments in mice. First, C57Bl/6 mice that were treated daily with caffeine (50 mg/kg) for 15 days presented a slight but significant increase in Nr1i3 and Cyp2b10 gene expression. A second experiment was then performed to verify the effects of caffeine on TCPOBOP (1,4-;bis;-[2-(3,5-dichloropyridyloxy)]benzene, 3,3′,5,5′-tetrachloro-1,4-;bis;(pyridyloxy)benzene), the most potent agonist known for mice Nr1i3. Interestingly, caffeine potentiated TCPOBOP pleiotropic effects in mice liver, such as hepatomegaly, hepatotoxicity, hepatocyte proliferation and loss of cell-to-cell communication through gap junctions. In addition, caffeine plus TCPOBOP treatment increased liver gene expression of Nr1i3 and Cyp2b10 comparing with only caffeine or TCPOBOP treatments. Together, these results indicate that caffeine increases the expression of Nr1i3 in mice liver, although at this point it is not possible to determine if Nr1i3 directly or indirectly mediates this effect.;;A cafeína é uma das substâncias mais consumidas mundialmente, estando presente no café, chá-verde e guaraná, entre outros. O receptor sensor de xenobióticos Receptor Nuclear subfamília 1, grupo I, membro 3 (Nr1i3, mais conhecido como Androstano Consititutivo - Car) é um regulador chave da biotransformação e excreção de substâncias e nenhuma descrição consistente dos efeitos da cafeína sobre este receptor foi feita. Então, para avaliar os efeitos da cafeína sobre este receptor, realizamos experimentos em camundongos. Primeiramente, camundongos C57/Bl/6 foram tratados diariamente com cafeína (50 mg/kg) por 15 dias e apresentaram um leve, mas significativo, aumento na expressão do Car e do seu gene alvo Cyp2b10. Assim, um segundo experimento foi realizado para verificar os efeitos da cafeína sobre o TCPOBOP (1,4-;bis;-[2-(3,5-dicloropiridiloxi)]benzeno,3,3′,5,5′-tetracloro-1,4-;bis;(piridiloxi)benzeno), o mais potente agonista do Nr1i3 de camundongos conhecido. Interessantemente, a cafeína potencializou os efeitos pleiotrópicos do TCPOBOP no fígado dos camundongos, como hepatomegalia, hepatotoxicidade, proliferação celular e perda da comunicação intercelular por junções do tipo gap. Os camundongos tratados com cafeína e TCPOBOP apresentaram maior expressão gênica de Nr1i3 e Cyp2b10, quando comparados aos camundongos tratados apenas com cafeína ou TCPOBOP. Juntos, nossos resultados indicam que a cafeína aumenta a expressão do receptor CAR em fígados de camundongos C57/Bl/6, porém nesta etapa ainda não é possível afirmar se estes efeitos são direta ou indiretamente mediados pelo Nr1i3.

Carcinogenese quimica por DMBA (7,12-dimethylbenzanthracene) em camundongos femeas BALB/c: novos fatos

Polycyclic aromatic hydrocarbons are known carcinogens used in rodent experimental models. In this study, the carcinogen DMBA (7,12-dimethylbenzanthracene) was administered by gavage, diluted in corn oil, to female BALB / c mice at hebdomadary doses of 1 mg per animal for 1, 3, 6 or 9 weeks. Animals were weighed and monitored weekly until death. Remaining animals were euthanized at the age of 53 weeks. At necropsy, representative fragments of neoplasms were collected and routinely processed for histopathological analysis. Of all mice that received DMBA, 68.57% developed some type of tumor. Of the 70 mice treated with various doses of DMBA, 22 (31.43%) developed mammary tumors. The adenoacanthoma was the most commonly (18.75%) diagnosed histological type of breast cancer. Lung (15.71%), lymphoid tissue (11.43%), stomach (7.14%) and skin (2.86%) were also primary sites of tumor development. One third (33.33%) of the mice receiving 1 mg of DMBA developed lung cancer. Therefore, the administration of DMBA was shown to be an efficient model of carcinogenesis in mice, especially for the study of breast cancer, when using the highest dose, and lung, when using the lowest dose. Carcinogenesis models have been used for several purposes in cancer research. These results represent new facts for a classic carcinogenesis model.Hidrocarbonetos policíclicos e aromáticos são carcinógenos usados em modelos experimentais em roedores. Neste estudo, o carcinógeno DMBA (7,12-dimetilbenzantraceno) foi administrado por gavagem, diluído em óleo de milho, para camundongos BALB/c em doses hebdomadárias de 1 mg por animal por 1, 3, 6 ou 9 semanas. Os animais foram pesados e monitorados semanalmente até a morte. Os animais remanescentes foram eutanasiados com a idade de 53 semanas. Na necroscopia, fragmentos representativos das neoplasias foram colhidos e rotineiramente processados para exame histopatológico. De todos os animais que receberam DMBA, 68,57% desenvolveram algum tipo de tumor. Entre os 70 camundongos tratados com diferentes doses de DMBA, 22 (31,43%) desenvolveram neoplasias mamárias. O adenoacantoma foi o tumor mamário mais comumente diagnosticado (18,75%). Pulmões (15,71%), tecido linfoide (11,43%), estômago (7,14%) e pele (2,86%) foram também locais primários de desenvolvimento de neoplasias. Um terço (33,33%) dos camundongos que receberam 1 mg de DMBA desenvolveram neoplasias pulmonares. Portanto, a administração de DMBA foi considerada um modelo eficiente de carcinogênese em camundongos, especialmente para o estudo de neoplasias mamárias, quando a maior dose é utilizada, e de neoplasias pulmonares, quando utilizada a menor dose. Os modelos de carcinogênese química têm sido usados para diversos estudos na pesquisa em câncer, os resultados aqui apresentados mostram novos fatos para um modelo clássico de carcinogênese

Intercellular interactions between mast cells and stromal fibroblasts obtained from canine cutaneous mast cell tumours

Mast cell tumours (MCTs) are the most frequent malignant skin neoplasm in dogs. Due to the difficulty in purifying large numbers of canine neoplastic mast cells, relatively little is known about their properties. A reproducible in vitro model is needed to increase the understanding about the phenotype and functional properties of neoplastic mast cells. In the present study, we describe the establishment of primary cocultures of neoplastic mast cells from canine cutaneous MCTs and cancer-associated fibroblasts. We confirmed the inability of canine neoplastic mast cells to remain viable for long periods in vitro without the addition of growth factors or in vivo passages in mice. Using a transwell system, we observed that mast cell viability was significantly higher when there is cell-to-cell contact in comparison to non-physical contact conditions and that mast cell viability was significantly higher in high-grade than in low-grade derived primary cultures. Moreover, the use of conditioned medium from co-cultured cells led to a significantly higher tumoral mast cell viability when in monoculture. Signalling mechanisms involved in these interactions might be attractive therapeutic targets to block canine MCT progression and deserve more in-depth investigations

Concentração de proteínas de fase aguda e vitamina D em cães com linfoma multicêntrico

Objetivou-se caracterizar a concentração sérica da vitamina D e das PFAs (Proteínas de Fase Aguda) (alfa-1 glicoproteína ácida, haptoglobina, transferrina, ceruloplasmina, albumina, IgA, IgG e alfa-1 – antitripsina) em cães com linfoma multicêntrico, submetidos ao tratamento quimioterápico com protocolo CHOP (Ciclofosfamida, Doxorrubicina, Vincristina e Prednisona), determinando o valor prognóstico desses marcadores para a doença. Foram avaliadas as concentrações séricas das PFAs, através do método da eletroforese e as concentrações da vitamina D, através da quimioluminescência em dois grupos experimentais, um grupo de 13 cães com linfoma multicêntrico classificados como alto grau pela citologia (GL) durante as semanas T0, T5 e T10 do tratamento com protocolo quimioterápico antineoplásico e em um grupo de 10 animais saudáveis para compor o grupo controle (GC), em coleta única. Para isso, foi realizado o diagnóstico, estadiamento e avaliação de resposta terapêutica dos 13 pacientes com linfoma multicêntrico através de técnicas de citopatologia, histopatologia, imuno-histoquímica do linfonodo periférico acometido. Foi observado que 9 pacientes tiveram resposta completa e 4 pacientes tiveram resposta parcial ao tratamento. Os dados foram analisados através do software R. Os resultados indicam que as diferenças entre as variáveis IgA, haptoglobina e α1-glicoproteína ácida foram significativas entre os grupos, e entre os diferentes momentos da quimioterapia (p< 0,05), indicando que podem ser marcadores sensíveis ao linfoma em cães. A α1-glicoproteína ácida apresentou valor prognóstico para o linfoma, com 63% de especificidade. Porém a vitamina D não apresentou valor prognóstico para o linfoma multicêntrico em cães. Palavras-chave: linfossarcoma; prognóstico; reação de fase aguda; resposta terapêutica; neoplasia hematopoiética

Chemical carcinogenesis by 7,12-dimethylbenzanthracene in balb/c mice

FAPES