Tricomonosis bovina: caracterización de cepas prevalentes en la provincia de La Pampa e inmunoprofilaxis de la enfermedad mediante el empleo de vacunas experimentales en vaquillonas

La tricomonosis bovina es una enfermedad de transmisión sexual causada por el protozoo flagelado Tritrichomonas foetus. En la hembra, la enfermedad se manifiesta or ciclos estrales irregulares, pérdidas embrionarias y fetales tempranas y piómetras. En el macho, la infección es asintomática y no afecta la calidad seminal ni la libido. Este trabajo tuvo dos objetivos fundamentales. Primero, se evaluó el efecto protector de vacunas a base de célula entera de T. foetus en vaquillonas, para mejorar el conocimiento de la respuesta inmunitaria y favorecer el control de la enfermedad. Segundo, se caracterizaron las cepas de T. foetus obtenidas de casos naturales de infección en toros de la provincia de La Pampa, para ampliar el conocimiento sobre la especie y así poder formular vacunas con los antígenos adecuados. Para evaluar el efecto protector de vacunas se elaboró una vacuna experimental a célula entera de T. foetus utilizando diferentes adyuvantes en su formulación. Para ello se conformaron 7 grupos de vaquillonas según el adyuvante utilizado: grupo O (n=10) con adyuvante oleoso ISA 206, grupo Al (n=10) con hidróxido de aluminio, grupo S (n=11) con saponina Quil-A, grupo SAl (n=11) con la combinación de hidróxido de aluminio y Quil-A y grupo A (n=11) con arqueosomas. También se incluyeron en el estudio un grupo de vaquillonas Ci (n=11) sin inmunizar pero con desafío y un grupo CNI no inmunizado ni desafiado (n=11). Las vaquillonas fueron inmunizadas mediante la aplicación de dos dosis subcutáneas (SC) más una dosis intravaginal, aplicada en el lumen de la vagina. Posteriormente, estos animales fueron desafiados experimentalmente con un inóculo T. foetus. El análisis de los resultados de este ensayo determinó que la formulación de los dos adyuvantes combinados SAl (hidróxido de aluminio y Quil-A) tuvo el mejor desempeño para la liberación de la infección genital (promedio 37 días) con una adecuada respuesta inmunitaria a IgG. Esta combinación de adyuvantes fue más eficaz que las formulaciones con un sólo adyuvante para la liberación de la infección genital, a saber: Al (59,4 días), S (49,9 días), O (50,1 días) y A (85 días). En un segundo ensayo, se evaluó el efecto de la aplicación de una dosis intravaginal de vacuna experimental a T. foetus en la protección conferida a vaquillonas. Para ello, las vaquillonas inmunizadas recibieron la tercera dosis de vacuna de modo variable. Las vaquillonas se dividieron en los siguientes grupos: el grupo SC (n=12) recibió sólo las 2 dosis subcutáneas; el grupo IL (n=12) recibió 2 dosis subcutáneas y la tercera dosis de modo intravaginal aplicada en el lumen de la vagina. Por último, otro grupo, SM (n=12) recibió 2 dosis subcutáneas, mientras que la tercera dosis se aplicó en la submucosa de la vagina. Posteriormente, todas las vaquillonas fueron desafiadas artificialmente con un inóculo de T. foetus. También se incluyeron en el estudio un grupo de vaquillonas Ci (n=9) que no fueron inmunizadas pero si desafiadas y un grupo CNI (n=12), no inmunizado ni desafiado. Tanto los animales del grupo SC como los del grupo IL tuvieron similar promedio de días de infección (51 y 50 días respectivamente). El grupo SM, tuvo la mejor respuesta en la eliminación de la infección genital (45 días promedio). Aunque los animales de los 3 grupos presentaron diferencias significativas con respecto al grupo Control Infección, no tuvieron diferencias estadísticas entre sí en la liberación de la infección. Independientemente de la vía empleada para aplicar un refuerzo intravaginal, la respuesta local tras las inmunizaciones no se observó en los niveles de anticuerpos a IgA en ninguno de los casos. También se realizó un ensayo experimental para establecer si una vacuna elaborada con antígeno a célula entera de Tritrichomonas suis aplicada a vaquillonas lograba inducir una respuesta inmunitaria humoral y acortar el período de infección genital luego del desafío con T. foetus. Para ello se inmunizaron 10 vaquillonas con 2 dosis subcutáneas y una tercera dosis intraluminal, y posteriormente fueron desafiadas con T. foetus por vía vaginal. Los resultados demostraron que la utilización de esta vacuna acortó el periodo de infección a un promedio de 56 días en los animales inmunizados, y generó una respuesta inmunitaria humoral tras su aplicación. Las vaquillonas eliminaron la infección genital antes que las hembras del grupo Control Infección, en los que persistió la enfermedad hasta finalizar el ensayo a los 98 días posdesafío. Pese a dicha tendencia, al comparar los tiempos promedio de infección de ambos grupos, no se observaron diferencias significativas. La segunda etapa de esta Tesis se focalizó en caracterizar cepas de T. foetus aisladas de toros naturalmente infectados provenientes de la provincia de La Pampa. Para ello se analizaron un total de doce aislamientos de T. foetus procedentes de toros ubicados en diferentes departamentos de la provincia. El análisis antigénico realizado mediante la técnica de Western Blot demostró la existencia de patrones de bandas similares para todas las cepas en estudio, con mayor número de bandas de pesos moleculares elevados (entre los 100 y 250 kDa). Por el contrario, no se visualizaron bandas de bajo peso molecular al enfrentar las mencionadas cepas con los sueros hiperinmunitarios obtenidos de vaquillonas inmunizadas con T. foetus o T. suis respectivamente. Por último, la caracterización molecular de cepas de T. foetus se realizó mediante la utilización de los microsatélites MS5, MS10 y el gen gap2, que codifica para la enzima GADPH (GADPH2). Se determinó la presencia de 3 patrones genéticos bien diferenciados para los distintos aislamientos: el ATB en 10 de las cepas, el CCBL en 3 y el CCB en una de las cepas. Estos resultados evidenciaron la existencia de variabilidad genética entre cepas de T. foetus provenientes de aislamientos de toros naturalmente infectados de Argentina y representan el primer trabajo efectuado con dicha técnica en cepas de T. foetus provenientes de bovinos naturalmente infectados del país.Facultad de Ciencias Veterinaria

Infectious diseases and reproductive status in european hare (Lepus europaeus) in La Pampa province (Argentina)

El objetivo de este trabajo fue determinar la prevalencia a Neospora caninum (Nc) y Toxoplasma gondii (Tg) y conocer el periodo reproductivo de la liebre europea (Lepus europaeus) en la provincia de La Pampa (Argentina). Para ello se muestrearon 106 liebres procedentes de acopiadores de la provincia de La Pampa. Los sueros fueron analizados por un ensayo inmunoenzimático de competición para determinar anticuerpos a Nc y para Tg se realizó una prueba de hemaglutinación indirecta. Se encontraron 66 hembras, de las cuales 13 estaban preñadas, y 40 machos (p=0,01). Sobre un total de 44 sueros analizados para Nc, 5 (11,4%) dieron positivo. De los 106 sueros estudiados para Tg ninguno fue positivo.The objective of this study was to determine the prevalence of these diseases and to know the reproductive season of the European hare (Lepus europaeus) in the Province of La Pampa (Argentina). To that aim, 106 hares coming from different places from La Pampa province were sampled. Nc antibody diagnosis was performed by means of a competitive enzimoimmunoassay (ELISA-c), and an hemo-agglutination indirect assay (HAI) for Tg were carried out to know the disease status. From the total of hares sampled, 40 were male, 66 female (p=0.01) and 13 (19.7%) of them were detected as pregnant. Nc sero-prevalence was 11.4% over a total of 44. From 106 sera analyzed by HAI no one was positive for Tg.Facultad de Ciencias Veterinaria

Prevalencia y factores de riesgo asociados a las enfermedades de transmisión sexual en bovinos de la provincia de La Pampa, Argentina

La tricomonosis bovina (TB) y campylobacteriosis genital bovina (CGB) son enfermedades de transmisión sexual (ETS) que causan muerte embrionaria temprana, infertilidad transitoria y abortos, impactando en el rendimiento reproductivo de los rodeos. El objetivo del presente estudio fue estimar la prevalencia general y por zonas fitogeográficas (Z1: Este pampeana, Z2: Monte central Z3: Monte occidental), así como los factores de riesgo asociados a ambas enfermedades en la provincia de La Pampa, Argentina. Se realizó un estudio transversal entre enero y diciembre del 2006 que abarcó a 4018 propietarios de rodeos con un stock de 684116 vacas y 33969 toros (54% y 51,5% del stock provincial, respectivamente). Se detectaron 622 (15,5%) rodeos con al menos 1 toro positivo a TB y/o CGB. Las prevalencias halladas fueron de 2,15% (Z1:1,62%; Z2:1,90%; Z3:4,61%) y 2,36% (Z1:2,08%; Z2: 2,28%; Z3: 3,51%) para TB y CGB, respectivamente. Los factores de riesgo asociados a la presencia de ETS fueron: traspaso de animales vecinos al establecimiento (Odds Ratio – OR = 1,8; Intervalo de Confianza-IC: 1,5-2,2) realización de servicio continuo (OR=1,3; IC: 1,1-1,6), productores que no realizan el tacto rectal (OR=1,2; IC: 1,0-1,5) y alta relación vaca/toro (χ2 =35,1, p=<0,0001). Asimismo, las ETS se relacionaron con presencia de abortos (OR=1,3; IC: 1,0-1,7) y bajo porcentaje de preñez (OR=1,8; IC: 1,3-2,6). Este estudio provee información de interés para ser utilizada en los planes de control y erradicación en áreas en donde las ETS son de carácter endémico.Bovine Tricomonosis (BT) and Bovine Genital Campylobacteriosis (BGC) are sexual transmission diseases (STD) that produce early embryonic death, transitory infertility and abortion, impacting on livestock reproductive performance. The objective of the study was to estimate the global and specific prevalence by phytogeography area (Z1: East Pampeana, Z2: Central Forest, Z3. West Forest) as well as the risk factor associated to both diseases in La Pampa province, Argentina. A cross sectional study was carried out between January and December 2006 which included 4018 farmers having a stock of 684116 cows and 33969 bulls (54% and 51.5% of the provincial stock, respectively). Six hundred and twenty two (15.5%) cattle herds were detected with at least one bull positive for TB and / or CGB. Prevalence was 2.15% (Z1: 1.62%, Z2: 1.90%, Z3: 4.61%) and 2.36% (Z1: 2.08%; Z2: 2.28%; Z3: 3.51%) for BT and BGC, respectively. Risk factors associated with the presence of STD were: Passage of bulls from in-contact herds (Odds ratio OR=1,8; Confidence Intervals-IC: 1,5-2,2), no defined breeding season (OR=1,3; IC: 1,1-1,6), farmers who do not detect pregnancy by rectal examination (OR=1,2; IC: 1,0-1,5) and high cows/bulls ratio (χ2 =35,1, p=<0,0001). Moreover, STD were related to abortion (OR=1.3; IC: 1.0-1.7) and low pregnancy rate (OR=1.8; IC: 1.3-2.6). This study provided information to use by control programs and erradication in a region where these diseases are considered to be endemic.EEA AnguilFil: Miranda, Ariel Omar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Fort, Marcelo Cristian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Fuchs, Lumila Ivana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Baldone, Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Gimenez, Hugo Daniel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Carné, L. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria. Centro Regional La Pampa-San Luis; ArgentinaFil: Sago, Adrián Miguel. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria. Centro Regional La Pampa-San Luis; ArgentinaFil: Otermin, H. Colegio Veterinario de la provincia de La Pampa; ArgentinaFil: Dubié, D. Colegio Veterinario de la provincia de La Pampa; ArgentinaFil: Goyeneche, P. Provincia de La Pampa. Subsecretaría Agricultura; ArgentinaFil: Campero, Carlos Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina

Evaluation of Tritrichomonas foetus infection clearance in heifers immunized with a single intravaginal dose of formaldehyde fixed strain B1 cells

Vaccines against Tritrichomonas foetus have been shown to reduce the time of infection after natural or experimental exposure. The object of this study was to assess the protection against T. foetus infection conferred by a single vaginal instillation of formaldehyde fixed T. foetus cells. Aberdeen Angus virgin heifers were randomly allocated to 3 groups of 12 individuals to receive placebo or formaldehyde fixed T. foetus cells prepared following one of two procedures (formalin or freshly prepared solution) and six weeks later they were challenged with 106T. foetus trophozoites. The median time for clearance among control heifers was 93.75 days while in animals immunized with formaldehyde fixed T. foetus it was 45 days. A single vaginal dose of cells fixed with fresh formaldehyde solution gave a rate of decay of infection per unit of time of 2.54 (CI 95% = 1.07;6.01).EEA AnguilFil: Martinez, Florencia Gracia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa; ArgentinaFil: Fuchs, Lumila Ivana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Ramirez, Rosana. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Breccia, Javier Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa; ArgentinaFil: Oyhenart, Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa; Argentin

Experimental infection of rabbits (Oryctolagus cuniculus) with Brucella suis biovar 1 isolated from wild hares (Lepus europaeus)

Brucella suis biovar 1 is the causative agent of brucellosis in several domestic and wild animals and it is a common agent of human brucellosis. European hares (Lepus europaeus) have been shown to be infected by B. suis biovar 1 and the transmission to other animals has been suggested. In this work, experimental rabbits (Cuniculus orictolagus) were infected with B. suis biovar 1 isolated from wild hares. Infected rabbits showed high serological response in 2 weeks after discharge and typical granulomatous lesions (2. mm diameter) were found in liver, spleen and kidneys after 50 days. B. suis biovar 1 was cultured from the lesion of the organs mentioned above as well as from urine, placenta and fetuses. These data suggest that hares are a potential source for horizontal transmission of B. suis biovar 1 to other mammalians.Fil: Fort, Marcelo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional La Pampa-San Luis. Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Baldone, Valeria Natalia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional La Pampa-San Luis. Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Fuchs, Lumila Ivana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional La Pampa-San Luis. Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Giménez, Hugo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional La Pampa-San Luis. Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Rojas, María. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional La Pampa-San Luis. Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Breccia, Javier Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa; ArgentinaFil: Oyhenart, Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa; Argentin

Detección de ADN de Ureaplasma diversum en semen fresco de toros provenientes de cabañas y de rodeos generales

Argentina tiene registros de Ureaplasma diversum en bovinos sanos y con trastornos reproductivos, pero no existen datos hasta la fecha con respecto a la identificación en el semen. El objetivo del estudio fue evaluar la presencia de Ureaplasma diversum en muestras de semen fresco de toros provenientes de la región central de Argentina. Se utilizaron 110 muestras de semen de toros provenientes de cabañas y de rodeos generales. Las muestras fueron obtenidas en dos grupos de edades reproductivas (hasta 13 meses y más de 13 meses). Se detectó ADN de Ureaplasma diversum en el 28,2% de las muestras. Se encontraron diferencias significativas al comparar prevalencias entre las muestras provenientes de cabañas (34,5%) vs rodeos generales (7,7%) y entre las edades estudiadas. Este es el primer informe de presencia de ADN de Ureaplasma diversum en muestras de semen fresco de toros en Argentina. Es importante trabajar para mejorar el sistema de detección de microorganismos patógenos en los recursos genéticos nacionales.Argentina has records of Ureaplasma diversum in healthy cattle and those with reproductive disorders, but there is not information regarding semen up to date. The aim of the study was to evaluate the presence of Ureaplasma diversum in fresh semen samples obtained from bulls from central region of Argentina. A total of 110 semen samples from asymptomatic bulls of breed and natural service herds were collected. Samples were obtained from two groups of reproductive ages (up to 13 months and more than 13 months). Ureaplasma diversum DNA was detected in 28.2% of the samples. Significant differences were found when comparing prevalence between samples taken from breed vs natural service herds, and between the ages studied. This is the first report of presence of Ureaplasma diversum DNA in fresh semen of bulls in Argentina. It is important to improve the diagnosis system for detecting pathogenic microorganisms in national genetic resources.EEA AnguilFil: Rojas, Maria del Carmen. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Gonzalez, Ana Clara. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Agronomía; ArgentinaFil: de la Mata, Javier. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Agronomía; ArgentinaFil: de la Mata, Carlos Arturo. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Agronomía; ArgentinaFil: Vázquez, Pablo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Baldone, Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; ArgentinaFil: Fuchs, Lumila. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; Argentin

Clearance of Tritrichomonas foetus in experimentally infected heifers protected with vaccines based on killed-T. foetus with different adjuvants

Tritrichomonas foetus is a flagellated protozoan that causes a sexually transmitted disease in cattle. Trichomonosis is characterized by early abortions, subfertility and a significant decrease in productivity. Vaccine preparations containing whole T. foetus can reduce the time of residence of the pathogen in the host cervix after experimental infection. Here, T. foetus vaccines prepared with different adjuvants were tested, in parallel with a commercial vaccine, for their efficacy to clear the infection. The median time for clearance of infection was 69 days in non-immunized animals, 55 days in animals treated with aluminum hydroxide, 41 days with oil-in-water or saponin based vaccines or with a commercial vaccine and 27 days in animals treated with saponin plus aluminum hydroxide. A slight increase in the risk of T. foetus clearance from the genital tract was found with the saponin based vaccine (hazard ratio, 2.52; 95% confidence interval, 1.03–6.17) or the commercial vaccine (hazard ratio, 2.61; 95% confidence interval, 1.07–6.38). A significant increase in the risk of T. foetus clearance was found with the combination of saponin plus aluminum hydroxide based vaccine (hazard ratio, 5.12; 95% confidence interval, 2.04–12.83).Fil: Fuchs, Lumila Ivana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Fort, Marcelo C.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Cano, Dora. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Bonetti, Carina M.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Giménez, Hugo D.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Vázquez, Pablo M.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Bacigalupe, Diana. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Breccia, Javier Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa; ArgentinaFil: Campero, Carlos Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Oyhenart, Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambientales de La Pampa; Argentin