Colonización por Pneumocystis Jirovecii en embarazadas y su posible implicación en la prematuridad y el aborto espontáneo

Antecedentes: Pneumocystis jirovecii es un hongo atípico, ubicuo, con tropismo pulmonar y gran estenoxenismo cuya principal vía de transmisión es aérea. Se considera un patógeno oportunista que causa neumonía grave en pacientes inmunodeprimidos, habiendo sido ampliamente investigado en el contexto de la infección por VIH. La utilización de herramientas de diagnóstico molecular ha permitido demostrar la presencia de Pneumocystis en sujetos que no presentan manifestaciones clínicas ni radiológicas de neumonía, situación conocida como colonización. Un estudio previo ha puesto de manifiesto la presencia de este microorganismo en las mujeres embarazadas como un grupo susceptible a la colonización. Existen evidencias que llevan a pensar que la colonización por Pneumocystis podría jugar un papel importante en la fisiopatología de diversas enfermedades por su capacidad, demostrada en modelos animales, de inducir en fases muy tempranas de la infección activación de macrófagos alveolares con elevación de interleuquinas proinflamatorias. La demostración por parte de nuestro grupo en pacientes con EPOC colonizados de un aumento en la respuesta inflamatoria sistémica, junto con la reciente evidencia de la capacidad de transmitirse verticalmente y la elevada tasa de infección documentada en abortos espontáneos obligan a plantear el posible papel que P. jirovecii puede desempeñar a través de estos mecanismos en la alteración del desarrollo normal del embarazo. Población y métodos: Para abordar esta cuestión se ha desarrollado un estudio clínico observacional donde se han incluido 82 gestantes, con sus respectivos recién nacidos, de los que se obtuvieron datos clínicos y muestras biológicas respiratorias y sanguíneas después de obtener el correspondiente consentimiento informado. Como grupo control se incluyeron 36 mujeres en edad fértil no embarazadas. Además se incluyeron en el estudio 26 muestras de tejido placentario procedentes de partos a término y 20 muestras de placentas procedentes de abortos espontáneos con el correspondiente tejido fetal. La detección de la presencia de colonización por Pneumocystis se realizó utilizando técnicas moleculares específicas en los diferentes tipos de muestras. Se completó el estudio utilizando técnicas de metagenómica para identificar la micobiota presente en mayo el tejido placentario y se realizaron los correspondientes estudios histológicos utilizando técnicas de tinción convencionales. Resultados: Los datos obtenidos revelan una tasa de colonización significativamente mayor en mujeres embarazadas en el momento del parto de un 39% (46,9% en el caso de parto prematuro; 27,3% en parto a término) frente a un 13,9% en mujeres no gestantes en edad fértil. En los recién nacidos también encontramos tasas de colonización elevadas, del 33,3% en prematuros y del 23,1% en recién nacidos a término, observándose concordancia entre la presencia de colonización en la madres y sus recién nacidos. La tasa de colonización en los recién nacidos al aumentar las semanas de gestación sigue una distribución decreciente, similar a la de la madre. En este estudio también se identificó ADN de Pneumocystis en el 50% de las placentas a término, en el 55 % de las placentas procedentes de abortos y en un 70 % de fetos. La identificación de otras especies de hongos mediante técnicas de metagenómica pone de manifiesto la existencia de una microbiota fúngica en la placenta donde predomina P. jirovecci y pueden estar presentes otros hongos como Cladosporium spp. Conclusiones: Este estudio muestra una elevada tasa de colonización por Pneumocystis jirovecii en gestantes en el momento del parto identificando el embarazo como un factor de riesgo para la colonización. Se observa una elevada concordancia en la colonización por Pneumocystis entre las madres y sus recién nacidos, sugiriendo una transmisión vertical desde las gestantes a sus hijos. Además se demuestra una asociación significativa entre la presencia de colonización por Pneumocystis en las gestantes y una reducción en la duración del embarazo, asociación que se mantiene al evaluar en un análisis multivariante otras circunstancias como la edad de las madres o la presencia de diabetes o hipertensión, lo que sugiere que la colonización por Pneumocystis durante el embarazo podría representar un factor de riesgo de prematuridad, y probablemente de aborto, ignorado hasta ahora que abre una nueva línea de investigación que podría contribuir a mejorar la salud tanto de las gestantes como de sus recién nacidos

High prevalence of Pneumocystis jirovecii pneumonia among Mozambican children <5 years of age admitted to hospital with clinical severe pneumonia

We aimed to describe Pneumocystis jirovecii pneumonia (PCP) prevalence and features in children from sub-Saharan Africa and to investigate PCP-associated risk factors. During 2006–2007 we used molecular methods to test children younger than 5 years old admitted with severe pneumonia to a hospital in southern Mozambique for Pneumocystis infection. We recruited 834 children. PCP prevalence was 6.8% and HIV prevalence was 25.7%. The in-hospital and delayed mortality were significantly higher among children with PCP (20.8% vs. 10.2%, p 0.021, and 11.5% vs. 3.6%, p 0.044, respectively). Clinical features were mostly overlapping between the two groups. Independent risk factors for PCP were age less than a year (odds ratio (OR) 6.34, 95% confidence interval (CI) 1.86–21.65), HIV infection (OR 2.99, 95% CI 1.16–7.70), grunting (OR 2.64, 95% CI 1.04–6.73) and digital clubbing (OR 10.75, 95% CI 1.21–95.56). PCP is a common and life-threatening cause of severe pneumonia in Mozambican children. Mother-to-child HIV transmission prevention should be strengthened. Better diagnostic tools are needed.This work was supported by the World Health Organization (WHO-C6-181-489). QB has a fellowship from the program Miguel Servet of the ISCIII (Plan Nacional de I+D+I 2008–2011, grant CP11/00269). LM has a fellowship from the program Río Hortega of the ISCIII (CM13/00260).Peer reviewe

Fast and Accurate Pneumocystis Pneumonia Diagnosis in Human Samples Using a Label-Free Plasmonic Biosensor

© 2020 by the authors.Pneumocystis jirovecii is a fungus responsible for human Pneumocystis pneumonia, one of the most severe infections encountered in immunodepressed individuals. The diagnosis of Pneumocystis pneumonia continues to be challenging due to the absence of specific symptoms in infected patients. Moreover, the standard diagnostic method employed for its diagnosis involves mainly PCR-based techniques, which besides being highly specific and sensitive, require specialized personnel and equipment and are time-consuming. Our aim is to demonstrate an optical biosensor methodology based on surface plasmon resonance to perform such diagnostics in an efficient and decentralized scheme. The biosensor methodology employs poly-purine reverse-Hoogsteen hairpin probes for the detection of the mitochondrial large subunit ribosomal RNA (mtLSU rRNA) gene, related to P. jirovecii detection. The biosensor device performs a real-time and label-free identification of the mtLSU rRNA gene with excellent selectivity and reproducibility, achieving limits of detection of around 2.11 nM. A preliminary evaluation of clinical samples showed rapid, label-free and specific identification of P. jirovecii in human lung fluids such as bronchoalveolar lavages or nasopharyngeal aspirates. These results offer a door for the future deployment of a sensitive diagnostic tool for fast, direct and selective detection of Pneumocystis pneumonia disease.The ICN2 is funded by the CERCA program/Generalitat de Catalunya. The ICN2 was supported by the Severo Ochoa Centres of Excellence program funded by the Spanish Research Agency (AEI, grant no. SEV-2017-0706). The ICN2 and O.C.L. acknowledge the economic support of the Spanish MINECO, the Spanish Research Agency and the European Social Fund (ESF) for the grant for predoctoral contracts in the Subprograma Estatal de Formación del Programa Estatal de Promoción del Talento y su Empleabilidad (ref. BES-2017-080527) linked to the TEC 2016-78515-R project PREDICT. Dr C.S.H. is a recipient of an RMIT Vice Chancellor’s Postdoctoral Fellowship. This study was supported, in part, by the Red Iberoamericana sobre Pneumocystosis in the framework of The Ibero-American Programme for Science, Technology and Development (grant CYTED 212RT0450). Financial support was also provided by the Spanish Ministerio de Ciencia e Innovación (MICINN) (Projects CTQ2017-84415-R).Peer reviewe

Pneumocystis jiroveci Dihydropteroate Synthase Gene Mutations Among Colonized Individuals and Pneumocystis Pneumonia Patients From Spain

5 páginas, 2 tablas.Cotrimoxazole, an association of trimethoprim and sulfamethoxazole, and dapsone, are mainstays for the prophylaxis and treatment of Pneumocystis pneumonia (PcP). The inability to culture Pneumocystis prevents routine susceptibility testing and detection of drug resistance. Instead, molecular techniques have been used to detect Pneumocystis jiroveci dihydropteroate synthase (DHPS) mutations that cause sulfa resistance in other microorganisms. The most frequent DHPS mutations occur at nucleotide positions 165 and 171, which lead to an amino acid change at positions 55 and 57. Several studies suggest that these mutations are associated with the failure of chemoprophylaxis for PcP. The aim was to establish the frequency and characteristics of P jiroveci DHPS mutations among colonized individuals and PcP patients from Spain. A total of 50 colonized individuals and 25 PcP patients were studied. DHPS polymorphisms were identified by restriction fragment length polymorphism assay. The analysis provided a rate of 28% of DHPS gene mutations in our population, with the presence of all possible polymorphisms described. The presence of mutations was higher in PcP patients than in colonized subjects (40% vs 22%), probably because of the chemoprophylaxis used in PcP patients. The comparison between patients with and without DHPS mutations did not show statistical differences due to age, sex, steroid use, sulfa drug exposure, or smoking. A high rate of DHPS mutations in our area of Spain, not only confined to patients previously exposed to sulfa drugs, is shown in this study. As well as PcP patients, colonized individuals who harbor P jiroveci strains with DHPS mutations could play a major role in the transmission cycle of these mutations, representing a reservoir and source of infection for susceptible individuals. Further research is thus warranted to assess the true scope of the problem and to design rational preventive strategies.This research is part of the project “Pneumocystis Pathogenomics: Unravelling the Colonization-to-Disease Shift” Into a Coordination Action, supported by the European Commission (ERA-NET PathoGenoMics). This work was supported, in part, by research project PI-0391/07 (Consejería de Salud de la Junta de Andalucía)Peer reviewe

Pneumocystis jirovecii in Spanish Patients With Heart Failure

[Objective] Pneumocystis colonization is frequent in patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD) producing local and systemic inflammation. Heart failure is also a common comorbidity among patients with COPD. Heart failure is a chronic, frequent, and disabling condition with high morbidity and mortality, but with a modifiable course where endothelial dysfunction and pulmonary arterial hypertension have great importance. Animal models have shown that Pneumocystis infection can cause relevant functionally changes in vascular responses in the lung, promoting the development of pulmonary hypertension. Pneumocystis colonization could be a hidden cause of worsening heart failure through it capacity to induce inflammatory response with subsequent endothelial dysfunction and pulmonary hypertension. The aim of the present study was to investigate the prevalence of Pneumocystis jirovecii colonization in heart failure patients and its possible association with reduced or preserved ejection fraction.[Methods] A cross-sectional study was carried out including 36 heart failure patients and 36 control cases. Identification of P. jirovecii colonization was performed by means of molecular techniques in oropharyngeal washing.[Results] Pneumocystis-DNA was identified in oropharyngeal washing in 1 (2.7%) of 36 heart failure patients and in 3 (8.3%) of 36 controls.[Conclusions] Pneumocystis colonization does not seem to have a role in the pathophysiology of heart failure.This work was supported by the Red Iberoamericana sobre Pneumocystosis (212RT0450) in the framework of the Ibero-American Programme for Science, Technology and Development (CYTED).Peer reviewe

Pneumocystis jiroveci Dihydropteroate Synthase Gene Mutations Among Colonized Individuals and Pneumocystis Pneumonia Patients From Spain

5 páginas, 2 tablas.Cotrimoxazole, an association of trimethoprim and sulfamethoxazole, and dapsone, are mainstays for the prophylaxis and treatment of Pneumocystis pneumonia (PcP). The inability to culture Pneumocystis prevents routine susceptibility testing and detection of drug resistance. Instead, molecular techniques have been used to detect Pneumocystis jiroveci dihydropteroate synthase (DHPS) mutations that cause sulfa resistance in other microorganisms. The most frequent DHPS mutations occur at nucleotide positions 165 and 171, which lead to an amino acid change at positions 55 and 57. Several studies suggest that these mutations are associated with the failure of chemoprophylaxis for PcP. The aim was to establish the frequency and characteristics of P jiroveci DHPS mutations among colonized individuals and PcP patients from Spain. A total of 50 colonized individuals and 25 PcP patients were studied. DHPS polymorphisms were identified by restriction fragment length polymorphism assay. The analysis provided a rate of 28% of DHPS gene mutations in our population, with the presence of all possible polymorphisms described. The presence of mutations was higher in PcP patients than in colonized subjects (40% vs 22%), probably because of the chemoprophylaxis used in PcP patients. The comparison between patients with and without DHPS mutations did not show statistical differences due to age, sex, steroid use, sulfa drug exposure, or smoking. A high rate of DHPS mutations in our area of Spain, not only confined to patients previously exposed to sulfa drugs, is shown in this study. As well as PcP patients, colonized individuals who harbor P jiroveci strains with DHPS mutations could play a major role in the transmission cycle of these mutations, representing a reservoir and source of infection for susceptible individuals. Further research is thus warranted to assess the true scope of the problem and to design rational preventive strategies.This research is part of the project “Pneumocystis Pathogenomics: Unravelling the Colonization-to-Disease Shift” Into a Coordination Action, supported by the European Commission (ERA-NET PathoGenoMics). This work was supported, in part, by research project PI-0391/07 (Consejería de Salud de la Junta de Andalucía)Peer reviewe

Pneumocystis jirovecii infection in patients with acute interstitial pneumonia

[ES] Objetivo: La neumonía intersticial aguda (NIA) es una enfermedad grave de etiología desconocida. Pneumocystis jirovecii es un hongo oportunista atípico capaz de colonizar pacientes con enfermedad pulmonar crónica e inducir la activación de los macrófagos alveolares. El objetivo de este trabajo fue valorar la posible asociación entre Pneumocystis jirovecii y la NIA. Sujetos y métodos: Se estudió la presencia de P. jirovecii mediante un método de PCR anidada de 2 pasos, en líquido de lavado broncoalveolar obtenido de los 4 casos confirmados de NIA identificados en un hospital terciario durante un período de 9 años. Resultados: Se identificó P. jirovecii en los 4 casos. Ninguno de ellos estaba infectado por VIH. Se trató de forma empírica a 2 pacientes con trimetoprim-sulfametoxazol, siendo uno de ellos el único de los 4 casos que sobrevivió. Conclusiones: Nuestros datos sugieren que Pneumocystis podría desencadenar o favorecer el desarrollo de NIA. Es necesario realizar más estudios para evaluar el papel de este patógeno en la fisiopatología de dicha enfermedad.[EN] Objective: Acute interstitial pneumonia (AIP) is a severe disease of unknown etiology. Pneumocystis jirovecii is an atypical opportunistic fungus able to colonize patients with chronic pulmonary disease and inducing alveolar macrophage activation. The aim of this study was to evaluate the possible association between Pneumocystis jirovecii and AIP. Subjects and methods: The presence of P. jirovecii in bronchoalveolar lavage fluid in the four confirmed cases of AIP identified in a tertiary-care hospital over a period of nine years was studied using a 2-step nested-PCR protocol assay. Results: P. jirovecii was identified in the four cases. None of them had HIV infection. Two of the patients were treated empirically with trimethoprim-sulfamethoxazole, the only survivor was being one of them. Conclusions: Our data suggest that Pneumocystis could trigger or favor the development of AIP. Further studies are needed to evaluate the role of the pathogen in the physiopathology of this disease

Método in vitro para el diagnóstico de una infección por Pneumocystis jirovecii

Método in vitro para el diagnóstico de una infección por Pneumocystis jirovecii. La presente invención se refiere a métodos útiles para detectar Pneumocystis jirovecii en una muestra, para diagnosticar una infección por Pneumocystis jirovecii en un paciente, o para discriminar entre un estado de colonización por Pneumocystis jirovecii en un paciente y un estado de infección que se corresponde clínicamente con una neumonía causada por Pneumocystis (PCP), donde los métodos comprenden amplificar una muestra una región del gen Msg-A de usando un cebador directo para Msg-A de secuencia 5'-GAC RAC AGA CAC RTG GGT YAC-3' (SEQ ID NO: 1) y un cebador reverso para Msg-A de secuencia 5'-CAC TTC GTW GGY TTR CAC CGC C-3' (SEQ ID NO: 2) y otra región del gen mitocondrial mtLSUrRNA, usando el cebador directo Mls F 5'-AATCGGACTAGGATATAGCTGGTTT (SEQ ID NO: 15) y el cebador reverso Mls R 5'-CTCCCTCGAGATATTCAGTGCT (SEQ ID NO:16); y detectar el producto de amplificación. Además, la invención también se refiere a kits con dichos cebadores y a usos del kit, así como a los propios oligonucleótidos.Peer reviewedFundación para el Fomento de la Investigación Sanitaria y Biomédica de la Comunitat Valenciana (Fisabio), Servicio Andaluz de Salud, Universidad de Chile, Consejo Superior de Investigaciones CientíficasA1 Solicitud de patente con informe sobre el estado de la técnic

Pneumocystis jirovecii en recién nacidos pretérmino: prevalencia y posibles implicaciones clínicas

1 página. IX Jornadas de Salud Investiga. Cádiz 20-22 octubre, 2010.Pneumocystis jirovecii, conocido previa-mente como Pneumocystis carinii sp. f. hominis, es un hongo oportunista atípico, no cultivable, que infecta exclusivamente al ser humano y del que se desconocen aún muchos aspectos de su epidemiología y fisiopatología. La vía aérea se supone la forma de transmisión más importante en la especie humana, pero recientemente se ha podido comprobar su capacidad de transmisión transplacentaria. En modelos animales la infección por Pneumocystis produce disminución de las proteínas B y C del surfactante pulmonar, sustancia tensoactiva cuyo déficit constituye la base del síndrome de distrés respiratorio neonatal (SDRN). El objetivo de nuestro trabajo fue conocer la prevalencia de infección por P. jirovecii en neonatos prematuros y su posible relación con el SDRN.Peer reviewe