ACTIVITY OF HOST-DERIVED T CELLS WHICH DIFFERENTIATE IN NUDE MICE GRAFTED WITH CO-ISOGENIC OR ALLOGENEIC THYMUSES

If nude mice are grafted with a neonatal thymus, host type precursor cells develop within the graft thymus and after about 6 wk the T-cell population of the thymus, spleen, and lymph nodes is of host type. However, immunological responsiveness produced in nude mice in this manner is incomplete: (a) the ability to react to T-cell mitogens in vitro is greater than in untreated nudes but lower than in normal mice; (b) the response to T-cell dependent antigens is less than normal; and (c) the rejection of skin grafts is slower than in normal animals. Whether host precursor cells which differentiate in an allogeneic thymus are able to reject skin grafts from thymus donor strain appears to depend on the strain combination used

Restoration of Taxol Sensitivity of Multidrug-Resistant Cells by the Cyclosporine SDZ PSC 833 and the Cyclopeptolide SDZ 280-446

Background: Taxol, a promising agent for the treatment of cancer, has entered phase II clinical trials. Nevertheless, it belongs to the class of compounds that show impaired retention in multidrug-resistant cells expressing P-glycoprotein (Pgp), a drug efflux pump. Chemosensitizers like verapamil modulate multidrug resistance by interfering with the efflux action of Pgp and thus can decrease drug resistance or can restore drug sensitivity by restoring normal drug accumulation and distribution within the multidrug-resistant tumor cell. The two strongest, nearly equipotent chemosensitizers identified to date are the cyclosporine derivative SDZ PSC 833 and the semisynthetic cyclopeptolide SDZ 280-446. Purpose: This study was designed to investigate the capacities of verapamil, SDZ PSC 833, and SDZ 280-446 to decrease resistance of two multidrug-resistant cell lines to taxol. Methods: We studied in vitro the growth of two multidrug-resistant tumor cell lines displaying high resistance to taxol: multidrug-resistant Chinese hamster ovary cells and murine monocytic leukemia P388 cells. We determined the taxol concentration that produced 50% inhibition of cell growth (IC50) in the two multidrug-resistant cell lines and in the parent cell lines, in the presence of a range of chemosensitizer concentrations (0-30 μM). IC50 values were determined in the presence and in the absence of verapamil, SDZ PSC 833, or SDZ 280-446. Results: At nontoxic concentrations (0.3-1 μM), SDZ PSC 833 and SDZ 280-446 produced an almost complete reversal of the high taxol resistance of the multidrug-resistant tumor cells, whereas only partial restoration of sensitivity to taxol was achieved with verapamil. Conclusion: SDZ PSC 833 and SDZ 280-446 can restore the normal taxol sensitivity of highly resistant multidrug-resistant tumor cells. Implications: The combination of taxol with SDZ PSC 833 or SDZ 280-446 may be recommended for treatment of multidrug-resistant cancers. [J Natl Cancer Inst 85: 478-483, 1993

Role of SPI-1 Secreted Effectors in Acute Bovine Response to Salmonella enterica Serovar Typhimurium: A Systems Biology Analysis Approach

Salmonella enterica Serovar Typhimurium (S. Typhimurium) causes enterocolitis with diarrhea and polymorphonuclear cell (PMN) influx into the intestinal mucosa in humans and calves. The Salmonella Type III Secretion System (T3SS) encoded at Pathogenicity Island I translocates Salmonella effector proteins SipA, SopA, SopB, SopD, and SopE2 into epithelial cells and is required for induction of diarrhea. These effector proteins act together to induce intestinal fluid secretion and transcription of C-X-C chemokines, recruiting PMNs to the infection site. While individual molecular interactions of the effectors with cultured host cells have been characterized, their combined role in intestinal fluid secretion and inflammation is less understood. We hypothesized that comparison of the bovine intestinal mucosal response to wild type Salmonella and a SipA, SopABDE2 effector mutant relative to uninfected bovine ileum would reveal heretofore unidentified diarrhea-associated host cellular pathways. To determine the coordinated effects of these virulence factors, a bovine ligated ileal loop model was used to measure responses to wild type S. Typhimurium (WT) and a ΔsipA, sopABDE2 mutant (MUT) across 12 hours of infection using a bovine microarray. Data were analyzed using standard microarray analysis and a dynamic Bayesian network modeling approach (DBN). Both analytical methods confirmed increased expression of immune response genes to Salmonella infection and novel gene expression. Gene expression changes mapped to 219 molecular interaction pathways and 1620 gene ontology groups. Bayesian network modeling identified effects of infection on several interrelated signaling pathways including MAPK, Phosphatidylinositol, mTOR, Calcium, Toll-like Receptor, CCR3, Wnt, TGF-β, and Regulation of Actin Cytoskeleton and Apoptosis that were used to model of host-pathogen interactions. Comparison of WT and MUT demonstrated significantly different patterns of host response at early time points of infection (15 minutes, 30 minutes and one hour) within phosphatidylinositol, CCR3, Wnt, and TGF-β signaling pathways and the regulation of actin cytoskeleton pathway

Contribution à l'étude de l'immunogénicité du virus de la mosaique du tabac

Doctorat en Sciencesinfo:eu-repo/semantics/nonPublishe

Inhibition fonctionnelle des récepteurs à protéines G pour chimioattractants FPR et FPRL1 et de l'ABC-transporteur MDR1 par les Cyclosporines

Les Cyclosporines (Cs) représentent une classe de peptides cycliques neutres composés de 11 acides aminés aliphatiques, produits par différents champignons imparfaits et quelques Ascomycètes. Les activités biologiques des Cs sont nombreuses, bien que seule l'activité immunosuppressive soit généralement connue. En séquestrant dans le cytosol la calcineurine dans un complexe moléculaire avec la cyclophiline, certaines Cs exercent une puissante activité immunosuppressive en supprimant spécifiquement la transcription du gène de l'interleukine-2 (IL-2), cytokine d'activation et de croissance des lymphocytes T. Indépendamment de cette propriété mettant en jeu l'interaction cyclophiline-Cs, les Cs peuvent exercer une ou plusieurs activités biologiques résultant de leur interaction avec des glycoprotéines membranaires. Ainsi, plusieurs Cs sont connues pour leurs propriétés inhibitrices sur la P-glycoprotéine MDR1 humaine (Pgp), une flippase responsable de la résistance de nombreuses tumeurs à la chimiothérapie anticancéreuse, mais exprimée également par certaines cellules immunocompétentes, ainsi que par des cellules épithéliales normales intervenant dans la protection de l'organisme contre des produits toxiques endogènes et exogènes et donc aussi dans le contrôle de la biodisponibilité de médicaments in vivo. Quelques Cs peuvent également inhiber le récepteur humain pour peptides N-formylés d'origine bactérienne ou mitochondriale (FPR), un récepteur chimiotactique à 7 pièces transmembranaires couplé à une protéine G (7TM-GPCR), récepteur dont l'absence est connue pour affecter l'immunité anti-bactérienne, mais dont les rôles physiologiques, pas encore clairement élucidés, semblent être plus nombreux. En plus de ces activités biologiques, les Cs présentent l'avantage galénique, qu'après administration orale, leur dégradation dans le tractus gastro-intestinal est retardée, et qu'une fraction substantielle passe de manière non-transformée dans la circulation générale. En effet, différentes raisons pour cette 'résistance' à la dégradation existent : leur taille relativement importante (leur poids moléculaire (PM) est largement supérieur à 500) implique une élimination par voie biliaire plutôt que par voie rénale (qui concerne surtout les composés avec un PM<300). Si une structure cyclique présente déjà l'avantage sur une structure linéaire d'être moins susceptible aux enzymes de dégradation, la métabolisation d'un peptide cyclique N-méthylé semble se révéler particulièrement difficile (la plupart des Cs présentent 5 ou 6 acides aminés sur 11 N-méthylés). Ces molécules sont ainsi très lentement transformées en métabolites qui maintiennent une structure cyclique. Outre cette stabilité, c'est le caractère hydrophobe de ces molécules qui leur permet une interaction facile avec la membrane plasmique et/ou le passage vers le milieu cytoplasmique. Mes travaux de thèse consistaient en l'étude et la comparaison d'un nombre important de Cs naturelles, synthétiques et semi-synthétiques, ainsi que d'une famille de cyclopeptolides non-apparentés aux Cs, les Auréobasidines, pour leur capacité de moduler (voire inhiber) le fonctionnement de la Pgp pour restaurer ainsi la sensibilité de cellules tumorales résistantes à la chimiothérapie. En parallèle, nous avons étudié l'action de ces molécules sur le FPR. Nos résultats et sur l'inhibition de la Pgp et sur celle du FPR ont été intégrés ensuite sous forme de relations-structure activité, afin d'apporter des précisions sur les modifications chimiques et, par conséquent, sur les propriétés structurales requises pour une interférence optimale avec le fonctionnement de ces deux récepteurs appartenant à des superfamilles structuralement et fonctionnellement très différentes. Enfin, nous avons dans un cadre pharmacologique d'étude générale des processus inflammatoires mettant en jeu des interactions ligand-récepteur spécifiques, étendu nos recherches sur les 7TM-GPCRs à un récepteur homologue du FPR, le FPRL-1, pour lequel la lipoxine A4 et la sérum amyloïde A ont été décrites comme ligands physiologiques. Dans ce contexte, nous avons comparé un certain nombre d'agonistes présumés ou non de FPR et FPRL-1 et étudié l'inhibition par quelques Cs naturelles de ces deux récepteurs homologues en vue d'apporter des informations supplémentaires sur leur spécificité agoniste/antagoniste et sur leurs rôles physiologiques respectifs.STRASBOURG-Sc. et Techniques (674822102) / SudocSudocFranceF

Comparison of the n- and o-linked glycopeptides of lymph node cells from c57 bl/6 lpr/lpr and c57 bl/6 mice

We have tested the hypothesis that some phenotypic characteristics of the lymphocytes from mice with lymphoproliferative disease (Ipr) could be explained by abnormal glycosylation of membrane proteins. Lymph node cells from normal C57 BL/6 and from C57 BL/lpr mice were labelled with tritiated sugars. Membrane proteins were released with trypsin. then with pronase. After complete pronase digestion, glycopeptides were first separated on Bio Gel P-6 and then on Con A-Sepharose. Fractions not binding to Con A (Con A negative) were also separated on Lens culinaris agglutinin-Sepharose. Marked differences between normal and Ipr cells were noticed. First, there were more glucosamine-labelled peptides with very high molecular weight (eluting fast on Bio Gel P-6) on Ipr cells than on normal lymphocytes. Second, the proportion of mannose-labelled peptides binding to Con A was smaller in the Ipr cells. Third, among the Con A negative peptides. the proponion binding to Lens culinaris agglutinin was higher in Ipr cells. Thus, Ipr cells seem to carry more α1-6 fucosylated chains and larger size carbohydrates. These alterations were also confirmed by gel electrophoresis of lectin-selected iodinated cell surface antigens and seem to be restricted to a very limited number of peptides. Thus, there may be primary changes in glycosylation in Ipr cells. Alternatively, the glycosylation pattern of Ipr cells may be characteristic for a subpopulation of T-lymphocytes that is expanded in this disease, or for a certain stage of activation. A large proportion of Con A-negative, Lens culinaris-positive peptides is a rather unusual feature in murine cells and requires further investigation. © 1993 Informa UK Ltd All rights reserved: reproduction in whole or part not permitted.SCOPUS: ar.jinfo:eu-repo/semantics/publishe