Comparison of two methods to assess effects of insecticides on hypopharyngeal gland development of honey bee

contribution to session IV Test methodolog

The Minisatellite MSB1, in the Fungus Botrytis cinerea, Probably Mutates by Slippage

A minisatellite was identified in the intron of the ATP synthase of the filamentous fungus Botrytis cinerea, and it was named MSB1. This is the second fungal minisatellite described to date. Its 37-bp repeat unit is AT-rich, and it is found at only one locus in the genome. The introns of 47 isolates of Botrytis species were sequenced. The number of tandem repeats varied only from 5 to 11, but there were many repeat variants. The structure of MSB1 is peculiar: the variants are in the same physical order in all individuals, and this order follows the most parsimonious tree. These original characteristics, together with a total lack of recombination between alleles of the flanking regions, suggest that MSB1 probably mutates by slippage. MSB1 was found in the intron of the ATP synthase of all of the Botrytis species analyzed, but the repeat unit was not found in any other genus examined, including Sclerotinia, which is the genus closest to Botrytis

Honey bee brood ring-test: method for testing pesticide toxicity on honeybee brood in laboratory conditions

contribution to session IV Test methodology The Experimental unit of entomology (INRA, France) developed a new in vitro method to assess effects of pesticides on honey bee larvae. The method consists in rearing bee larvae in plastic cells. The larvae are fed with diet containing 50% of fresh royal jelly and 50% of an aqueous sugar and yeast extract solution, and reared in an incubator at 35 °C and 96% relative humidity. According to that method, 9 tests (7 in 2008 and 2 in 2005) were carried out in 7 laboratories and different countries. The objective of these trials was to assess the LD50 for dimethoate 48 hours after an acute exposure. The LD50 values ranged from 1.5 μg a.i./larva to 8.8 μg a.i./larva, with 2 tests with particularly high values (5.0 and 8.8 μg a.i./larva). In 7 tests, these values ranged from 1.5 μg a.i./larva to 3.1 μg a.i./larva. Such variability may be due to the colony origin, the season and larva heterogeneity at grafting. Solutions are proposed to improve the method through the continuation of the ring test. Keywords: Apis mellifera, brood, in vitro test, dimethoat

Cryoconservation des embryons et larves d'abeilles domestiques, Apis mellifera

Cryoconservation des embryons et larves d'abeilles domestiques, [i]Apis mellifera[/i]. 5. Journées de la Recherche Apicol

Une nouvelle méthode d'élevage in vitro de larves d'ouvrières d'abeille domestique : un outil pour l'évaluation des pesticides

Les insecticides sont utilisés pour lutter contre les insectes ravageurs des cultures. L’abeille domestique (Apis mellifera) fait partie des insectes intégrés dans le schéma d’évaluation des risques liés à l’utilisation des pesticides. Des tests sur adultes existent mais aucun ne permet de mesurer les effets directs de ces molécules sur le couvain (larves, nymphes). A l’Institut national de recherche agronomique (INRA), l’Unité expérimentale Entomologie située au Magneraud, Centre Poitou-Charentes, a donc mis au point une méthode d’élevage larvaire d’abeille domestique en conditions contrôlées au laboratoire. Cette méthode permet de suivre individuellement chaque abeille du premier stade larvaire jusqu’au stade adulte. Standardisée, reproductible, elle permet d’ajouter dans l’aliment larvaire des molécules à des doses connues et de mesurer leur effet sur larve, nymphe ou adulte. Cette méthode a fait l’objet de deux tests interlaboratoires en mode d’exposition aiguë et répétée et est désormais validée par l’OCDE (Organisation de coopération et de développement économiques) au niveau international

Impact des pesticides chez les larves d’abeilles domestique : développement d’une méthode innovante pour le renforcement réglementaire

L’homologation de nouvelles molécules à usage phytosanitaire impose qu’elles soient soumises à plusieurs tests, dont certains sont destinés à évaluer leur effet sur l’abeille domestique, afin de s’assurer que leur usage ne porte pas préjudice à cet insecte. Bien que le couvain puisse être exposé aux pesticides, il n’existait pas de méthode fiable pour évaluer leur effet à ce stade. C’est pour combler cette lacune que nous avons démarré en 2003 des travaux visant à proposer une méthode standard pour mieux évaluer les risques sur couvain, ce stade étant peu pris en compte dans la mesure où la seule méthode existante était à la fois difficile à mettre en oeuvre et peu précise. Grâce à un soutien financier FEAGA, nous avons pu développer une technique d’élevage larvaire in vitro en laboratoire qui permet un contrôle parfait de l’exposition des larves au produit à tester. Après son adoption par la Commission des essais biologiques en France en 2007, cette méthode a fait l’objet d’une ligne directrice OCDE en 2013 dans sa version « exposition aigue » et d’un document guide OCDE en 2016 dans sa version « exposition répétée ».The ratification of new molecules with phytosanitary use imposes that they are submitted to several tests, among which some are intended to estimate their effect on honney bee, to make sure that their use does not harm this insect. Although brood can be exposed to pesticides, there was no reliable method to estimate their effect at this stage. It is to fill this gap that we started in 2003 the works to propose a standard method to estimate better the risks on brood, this stage being little taken into account as far as the only existing method was at the same time difficult to implement and little acute. Thanks to a financial support FEAGA, we were able to develop an in vitro technique of larval breeding in laboratory which allows a perfect control of exposure of larvae to the tested product. After its adoption by the Commission of the biological essays in France in 2007, this method was the object of a OECD guideline in 2013 in its acute exposure modality and of OECD guidance in 2016 in its repeated exposure modality

RFLP markers show genetic recombination in Botryotinia fuckeliana (Botrytis cinerea) and transposable elements reveal two sympatric species

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Plusieurs espèces cachées sous le nom de Botrytis cinerea ! Etude de populations de B.cinerea sur vignes champenoises

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