Ultrastructural differences between Leydig cells of horses: asses and hinnies

The ultrastructure of Leydig cells of horses, asses and hinnies was compared to show the morphological differences among them. These cells have a well developed smooth endoplasmic reticulum, indicating a normal steroidogenic activity, but in the horse, this organelle seems to be a litle more abundant. The mitochondria was round, small and numerous. In asses and hinnies a great amount of microfilaments appear mainly near the nucclei. The function of these filaments is unknown, because there is no aparent reason for these cells to have a well developed cytoskeletal since they are imobile and don't have a supporting function, except, by, the steroids precursors and intracellular organelles transport.A ultra-estrutura das células de Leydig de cavalos, jumentos e burros foi comparada com o intuito de se estudar as diferenças morfológicas existentes. Todas as células estudadas apresentam um retículo endoplasmático liso bem desenvolvido, característico das células produtoras de hormônios esteróides. No cavalo, no entanto, esta organela aparentemente se apresenta mais abundante. As mitocondrias encontradas são pequenas, redondas e numerosas. Nos jumentos e burros uma grande quantidade de microfilamentos aparece próximo ao núcleo. A função destes filamentos é ainda desconhecida pois parece não existir razão para a presença de um citoesqueleto tão desenvolvido em células intersticiais, imóveis e sem função de sustentação, exceto, talvez, a relação com o transporte de substâncias precursoras de esteróides e/ou organelas intracelulares

Competência oocitária: importância e fatores determinantes in vivo e in vitro

As biotécnicas reprodutivas impulsionaram a pecuária no cenário do agronegócio mundial em virtude da redução do intervalo entre gerações, acelerado ganho genético e intensificação da produtividade. Nesse âmbito, existem, no entanto, desafios biológicos e fisiológicos que, apesar do avanço científico e biotecnológico, ainda não foram solucionados. A superovulação associada à aspiração folicular e a produção in vitro de embriões a partir de complexos cumulus-oócitos (COCs) que, outrora, entrariam em atresia, tem sua eficiência limitada, basicamente, pela qualidade oocitária, a qual está diretamente relacionada à competência do oócito em completar sua capacitação, representada pela maturação nuclear e citoplasmática, além de suportar a fertilização e embriogênese inicial. Esse processo de capacitação oocitária, tanto in vivo quanto in vitro, determina, portanto, o potencial de desenvolvimento embrionário e envolve uma complexa interação de moléculas regulatórias além de alterações moleculares e estruturais, os quais estão, ainda, sob a influência de fatores intra e extra-ovarianos. Sendo assim, dada a importância do oócito para fertilidade da fêmea, a presente revisão tem como intuito discutir os principais aspectos implicados no contexto da capacitação oocitária e seus fatores interferentes assim como apresentar possíveis métodos de seleção de COCs competentes

Principais genes implicados na aquisição de competência oocitária

Apesar do bloqueio meiótico no estádio diplóteno da prófase I, os oócitos da maioria dos mamíferos domésticos mantêm a capacidade de transcrição gênica devido ao fato da cromatina apresentar áreas de descondensação. Com a retomada da meiose sob estímulo do hormônio luteinizante, no entanto, esta atividade transcricional é interrompida, sendo restabelecida somente com a ativação do genoma embrionário. Deste modo, todo o processo de maturação oocitária, fertilização e embriogênese inicial assim como a expansão das células do cumulus dependem da adequada transcrição e estoque de RNAs mensageiros ainda durante o bloqueio meiótico que, em momentos oportunos e sob sinais específicos, serão recrutados para tradução e síntese proteica. Neste contexto de controle gênico, alguns transcritos se destacam por sua importância nos eventos que regem a aquisição de competência oocitária e o embriogênese inicial como o MATER, ZAR1, GDF9, BMP15, BAX e BCL2, expressos nos oócitos, além do PTGS2, PTX3, HSA2, TNFAIP6 e GREMLIN, expressos nas células do cumulus. Sendo assim, dada a relevância do tema, esta revisão tem como intuito explorar a interação oócito-cumulus e compilar o conhecimento referente à função e perfil de expressão dos principais transcritos maternos considerados imprescindíveis para o adequado desenvolvimento oocitário e embrionário

Use of Bayesian Inference to Correlate In Vitro Embryo Production and In Vivo Fertility in Zebu Bulls

The objective of this experiment was to test in vitro embryo production (IVP) as a tool to estimate fertility performance in zebu bulls using Bayesian inference statistics. Oocytes were matured and fertilized in vitro using sperm cells from three different Zebu bulls (V, T, and G). The three bulls presented similar results with regard to pronuclear formation and blastocyst formation rates. However, the cleavage rates were different between bulls. The estimated conception rates based on combined data of cleavage and blastocyst formation were very similar to the true conception rates observed for the same bulls after a fixed-time artificial insemination program. Moreover, even when we used cleavage rate data only or blastocyst formation data only, the estimated conception rates were still close to the true conception rates. We conclude that Bayesian inference is an effective statistical procedure to estimate in vivo bull fertility using data from IVP

Ultrastructure of Sheep Primordial Follicles Cultured in the Presence of Indol Acetic Acid, EGF, and FSH

The aim of this study was to investigate the ultrastructural characteristics of primordial follicles after culturing of sheep ovarian cortical slices in the presence of indol acetic acid (IAA), Epidermal Growth Factor (EGF), and FSH. To evaluate ultrastructure of primordial follicles cultured in MEM (control) or in MEM containing IAA, EGF, and FSH, fragments of cultured tissue were processes for transmission electron microscopy. Except in the control, primordial follicles cultured in supplemented media for 6 d were ultrastructurally normal. They had oocyte with intact nucleus and the cytoplasm contained heterogeneous-sized lipid droplets and numerous round or elongated mitochondria with intact parallel cristae were observed. Rough endoplasmic reticulum (RER) was rarely found. The granulosa cells cytoplasm contained a great number of mitochondria and abundant RER. In conclusion, the presence of IAA, EGF, and FSH helped to maintain ultrastructural integrity of sheep primordial follicles cultured in vitro

In vivo and in vitro evaluation of an Acetobacter xylinum synthesized microbial cellulose membrane intended for guided tissue repair

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Barrier materials as cellulose membranes are used for guided tissue repair. However, it is essential that the surrounding tissues accept the device. The present study histologically evaluated tissue reaction to a microbial cellulose membrane after subcutaneous implantation in mice. Furthermore, the interaction between mesenchymal stem cells and the biomaterial was studied <it>in vitro </it>to evaluate its ability to act as cellular scaffold for tissue engineering.</p> <p>Methods</p> <p>Twenty-five Swiss Albino mice were used. A 10 × 10 mm cellulose membrane obtained through biosynthesis using <it>Acetobacter xylinum </it>bacteria was implanted into the lumbar subcutaneous tissue of each mouse. The mice were euthanatized at seven, 15, 30, 60, and 90 days, and the membrane and surrounding tissues were collected and examined by histology.</p> <p>Results</p> <p>A mild inflammatory response without foreign body reaction was observed until 30 days post-surgery around the implanted membrane. Polarized microscopy revealed that the membrane remained intact at all evaluation points. Scanning electron microscopy of the cellulose membrane surface showed absence of pores. The <it>in vitro </it>evaluation of the interaction between cells and biomaterial was performed through viability staining analysis of the cells over the biomaterial, which showed that 95% of the mesenchymal stem cells aggregating to the cellulose membrane were alive and that 5% were necrotic. Scanning electron microscopy showed mesenchymal stem cells with normal morphology and attached to the cellulose membrane surface.</p> <p>Conclusion</p> <p>The microbial cellulose membrane evaluated was found to be nonresorbable, induced a mild inflammatory response and may prove useful as a scaffold for mesenchymal stem cells.</p

ALTERAÇÕES NA MORFOLOGIA ESPERMÁTICA EM TOUROS DE CORTE COM E SEM SUPLEMENTAÇÃO DE ZINCO NA MISTURA MINERAL

rebanho sem Zn na suplementação mineral (ZN-0, n=4, 0mg/Zn/kg/dia) foram comparadas com as de touros contemporâneos criados com suplementação adequada (ZN-60FI, n=4, 60mg/Zn/kg/dia). O sêmen foi colhido quinzenalmente, entre 17 e 29 meses de idade. Incluíram-se no exame a análise da cromatina espermática e o perfil morfométrico da cabeça espermática, com base no comprimento, largura superior e inferior (µm) e área (µm2). Os touros do ZN-0 apresentaram redução de espermatozoides normais em relação ao ZN-60FI (62,4 ±2,88% x 74,5 ±2,83), sendo que a prevalência de anormalidades de cromatina (16,7 ±2,05%) e de defeitos de peça intermediária (9,3 ±0,81%) foi superior aos do ZN-60FI (9,5 ±2,03 e 3,2 ±0,80, respectivamente). A microscopia eletrônica de transmissão mostrou irregularidades mitocondriais e ruptura dos feixes de fibras densas externas.  Nos touros do ZN-60FI, a área da cabeça espermática foi proporcionalmente inferior a do ZN-0. Conclui-se que touros criados e mantidos a campo, provenientes de rebanhos com deficiência na suplementação de Zn, estão sujeitos à redução da qualidade seminal, por apresentarem maior frequência de anormalidades morfológicas, na cromatina, e nos padrões morfométricos da cabeça espermática com predomínio de lesões na estrutura mitocondrial e nos feixes de fibras densas na peça intermediária. PALAVRAS-CHAVES: Bovino, cromatina, morfometria espermática, nutrição, qualidade seminal, zinco

ULTRASTRUCTURE OF THE GERMINATIVE EPITHELIUM IN A GOAT WITH A 5/15-ROBERTSONIAN TRANSLOCATION

The spermatogenesis of two goats bearing a 5/15 Robertsonian translocation was investigated by electron microscopy. There was no dramatic change in the morphology of the cells of the spermatic line. All cells of the seminiferous epithelium seemed quite normal at the ultrastructural level. However a certain disturbance in the cell localization and some morphological abnormalities involving nuclear structure were seen. Spermatocytes and spermatids normal in appearance were observed, but a great number of cells presented two or more nuclei. These cells were frequently seen to become degenerated during spermatogenesis. We believe that unbalanced spermatocytes degenerate during the process and only some spermatocytes succeed in fertilizing gametes