Anti-CD25 Treatment Depletes Treg Cells and Decreases Disease Severity in Susceptible and Resistant Mice Infected with Paracoccidioides brasiliensis

Regulatory T (Treg) cells are fundamental in the control of immunity and excessive tissue pathology. In paracoccidioidomycosis, an endemic mycosis of Latin America, the immunoregulatory mechanisms that control the progressive and regressive forms of this infection are poorly known. Due to its modulatory activity on Treg cells, we investigated the effects of anti-CD25 treatment over the course of pulmonary infection in resistant (A/J) and susceptible (B10.A) mice infected with Paracoccidioides brasiliensis. We verified that the resistant A/J mice developed higher numbers and more potent Treg cells than susceptible B10.A mice. Compared to B10.A cells, the CD4(+)CD25(+)Foxp3(+) Treg cells of A/J mice expressed higher levels of CD25, CTLA4, GITR, Foxp3, LAP and intracellular IL-10 and TGF-beta. In both resistant and susceptible mice, anti-CD25 treatment decreased the CD4(+)CD25(+)Foxp3(+) Treg cell number, impaired indoleamine 2,3-dioxygenase expression and resulted in decreased fungal loads in the lungs, liver and spleen. In A/J mice, anti-CD25 treatment led to an early increase in T cell immunity, demonstrated by the augmented influx of activated CD4(+) and CD8(+) T cells, macrophages and dendritic cells to the lungs. At a later phase, the mild infection was associated with decreased inflammatory reactions and increased Th1/Th2/Th17 cytokine production. In B10.A mice, anti-CD25 treatment did not alter the inflammatory reactions but increased the fungicidal mechanisms and late secretion of Th1/Th2/Th17 cytokines. Importantly, in both mouse strains, the early depletion of CD25(+) cells resulted in less severe tissue pathology and abolished the enhanced mortality observed in susceptible mice. In conclusion, this study is the first to demonstrate that anti-CD25 treatment is beneficial to the progressive and regressive forms of paracoccidioidomycosis, potentially due to the anti-CD25-mediated reduction of Treg cells, as these cells have suppressive effects on the early T cell response in resistant mice and the clearance mechanisms of fungal cells in susceptible mice.Fundacao de Amparo a Pesquisa do Estado de Sao Paulo (FAPESP)Fundacao de Amparo a Pesquisa do Estado de Sao Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Pesquisas (CNPq)Conselho Nacional de Pesquisas (CNPq

In pulmonary paracoccidioidomycosis IL-10 deficiency leads to increased immunity and regressive infection without enhancing tissue pathology

BACKGROUND: \ud Cellular immunity is the main defense mechanism in paracoccidioidomycosis (PCM), the most important systemic mycosis in Latin America. Th1 immunity and IFN-γ activated macrophages are fundamental to immunoprotection that is antagonized by IL-10, an anti-inflammatory cytokine. Both in human and experimental PCM, several evidences indicate that the suppressive effect of IL-10 causes detrimental effects to infected hosts. Because direct studies have not been performed, this study was aimed to characterize the function of IL-10 in pulmonary PCM.\ud METHODOLOGY/PRINCIPAL FINDINGS: \ud Wild type (WT) and IL-10(-/-) C57BL/6 mice were used to characterize the role of IL-10 in the innate and adaptive immunity against Paracoccidioides brasiliensis (Pb) infection. We verified that Pb-infected peritoneal macrophages from IL-10(-/-) mice presented higher phagocytic and fungicidal activities than WT macrophages, and these activities were associated with elevated production of IFN-γ, TNF-α, nitric oxide (NO) and MCP-1. For in vivo studies, IL-10(-/-) and WT mice were i.t. infected with 1×10(6) Pb yeasts and studied at several post-infection periods. Compared to WT mice, IL-10(-/-) mice showed increased resistance to P. brasiliensis infection as determined by the progressive control of pulmonary fungal loads and total clearance of fungal cells from dissemination organs. This behavior was accompanied by enhanced delayed-type hypersensitivity reactions, precocious humoral immunity and controlled tissue pathology resulting in increased survival times. In addition, IL-10(-/-) mice developed precocious T cell immunity mediated by increased numbers of lung infiltrating effector/memory CD4(+) and CD8(+) T cells. The inflammatory reactions and the production of Th1/Th2/Th17 cytokines were reduced at late phases of infection, paralleling the regressive infection of IL-10(-/-) mice.\ud CONCLUSIONS/SIGNIFICANCE: \ud Our work demonstrates for the first time that IL-10 plays a detrimental effect to pulmonary PCM due to its suppressive effect on the innate and adaptive immunity resulting in progressive infection and precocious mortality of infected hosts.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP, 04/14518-2)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP, 2011/51258-2)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP, 2010/52275-5)CAPE

Characterization of pathogen receptors involved in the interaction between Paracoccidioides brasiliensis and macrophages from resistant and susceptible mice.

A paracoccidioidomicose é uma micose sistêmica da América Latina causada pelo fungo dimórfico Paraccoccidioides brasiliensis. Os TLRs, e os CLRs são \"Receptores de Reconhecimento Padrão\" (PRRs) que reconhecem os \"Padrões Moleculares Associados aos Patógenos\" (PAMPs). O objetivo deste trabalho foi caracterizar os receptores de macrófagos de camundongos resistentes (A/J) e susceptíveis (B10.A) ao P. brasiliensis envolvidos na interação com o fungo, através do estudo do efeito do tratamento dos macrófagos com agonistas ou antagonistas dos receptores de manose (MR), receptores do tipo Toll 4 (TLR4), receptores de beta-glucanas (dectina-1) e receptores de complemento CR3 (CD11b/CD18), na interação fungo-macrófago. O tratamento dos macrófagos com o agonista de MR (manana), ativou ambos os macrófagos A/J e B10.A. O bloqueio dos receptores MR, TLR4 e CR3 com anticorpos monoclonais específicos, induziu inibição dos macrófagos, mostrando a importância destes receptores no reconhecimento dos carboidratos presentes na parede do fungo. O tratamento com os agonistas de dectina-1 (laminarina e curdlan) induziram ativação dos macrófagos, porém de maneira distinta entre as linhagens. A laminarina pareceu ativar macrófagos B10.A e inibir A/J; curdlan por sua vez, pareceu ativar macrófagos A/J e inibir B10.A.Estes dados sugerem que diferentes perfis de ativação dos macrófagos atuem no reconhecimento do fungo.Paracoccidioidomycosis is a systemic mycosis of Latin America caused by Paraccoccidioides brasiliensis, a dimorphic fungus. The TLRs and CLRs are \"Pattern Recognition Receptors\" (PRRs) which recognize \"Pathogen Associated Molecular Patterns\" (PAMPs). The aim of our work was to characterize the macrophages receptors from resistant (A/J) and susceptible (B10.A) mice to P. brasiliensis involved in the interaction with the fungus. We studied the effect of macrophages treatment with agonists or antagonists of mannose receptors (MR), Toll like receptors 4 (TLR4), b-glucans receptors (dectin-1) and complement receptors CR3 (CD11b/CD18), in the interaction fungus-macrophages. The macrophages treatment with mannan agonist of MR activated both A/J and B10.A macrophages. The blockade of MR, TLR4 and CR3 receptors with specific monoclonal antibodies, induced macrophages inhibition, showing the importance of these receptors in the recognition of common carbohydrates presents on the cell wall of the fungus. The macrophages treatment with laminarin and curdlan agonists of dectin-1, induced macrophages activation, however in the distinct manner between both macrophages lineages. Laminarin appeared to activate B10.A macrophages and inhibit A/J; whereas curdlan appeared to activate A/J macrophages and inhibit B10.A. These data suggest that a different profile of macrophages activation plays in the fungus recognition

Nasal Immunization in rabbits with Neisseria lactamica: importance of cross-reactive antigens

Neisseria lactamica, uma bactéria comensal não patogênica, predominantemente humana e usualmente encontrada no trato respiratório superior de crianças, está intimamente relacionada a Neisseria meningitidis patogênica. A colonização com N. lactamica pode ser responsável pelo envolvimento da imunidade natural contra a infecção pelos meningococos em crianças pequenas, quando as taxas de portadores de meningococos são baixas. Estas características levam a sugerir que os componentes de N. lactamica possam ser um elemento-chave para a produção de uma nova vacina para N. meningitidis. Devido ao pouco conhecimento sobre a dinâmica dos portadores e sobre a diversidade da população de N. lactamica em crianças, tem sido difícil escolher um isolado representativo para preparar um adequado produto imunogênico. Em nosso estudo, foi proposto um protocolo para estudar a imunogenicidade de whole cells de N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca ou N. meningitidis c (isoladas de portadores), através da imunização intranasal em coelhos, considerando a via de entrada natural do patógeno. Isolados da orofaringe de N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca ou N. meningitidis c, foram inoculados em coelhos adultos pela via intranasal, numa concentração de densidade ótica 1.0 a 650nm, num volume de 1000 ?L. Os coelhos foram imunizados por quatro vezes em intervalos de sete dias. Também foram usadas cepas como N. subflava, N. elongata, N. sicca, N. perflava, N. mucosa isoladas do líquido cérebro-espinhal ou sangue de pacientes. Os coelhos desenvolveram níveis de anticorpos IgG específicos no soro, como foi determinado por ELISA usando whole cells de cepas homólogas e heterólogas. O soro dos coelhos imunizados com N. lactamica, N. meningitidis, N.sicca ou N. meningitidis c, apresentaram anticorpos IgG que reagiram com antígenos numa faixa de 5 a 130 kDa por meio de immunoblot. Os anticorpos presentes nos soros dos coelhos imunizados com N. lactamica não induziram altos títulos de anticorpos com atividade bactericida contra as cepas de N. meningitidis, no entanto, esta atividade pode ser observada com anticorpos produzidos pelos coelhos imunizados intranasalmente com N. meningitidis. Anticorpos IgG de alta avidez foram produzidos, embora não tenha sido determinada uma significativa correlação entre atividade bactericida e a indução de anticorpos IgG de alta avidez, principalmente nos coelhos imunizados com N. lactamica. A imunização RESUMO intranasal usando whole cells de N. lactamica foi adequada para sensibilizar eficientemente o sistema imune de mucosa no modelo coelho.Neisseria lactamica, a commensal bacterium non-pathogenic to human beings and usually found in the upper respiratory tract of children, is closely related to pathogenic Neisseria meningitides. Colonization with N. lactamica can be responsible for evolving natural immunity to meningococcal infection in childhood, when rates of meningococcus carriers are low. These features lead to suggest that N. lactamica components can be key-elements in the production of a new vaccine for N. meningitides. As little is known about dynamic carriers and N. lactamica population diversity in children, it has been difficult choosing a representative for preparing an adequate immunogenic product. A protocol was proposed to study immunogenicity of whole cells of N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca or N. meningitides c (carrier-isolated) by i.n. immunization in rabbits considering the natural pathogen entry route. Oropharinx-isolated N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca, or N. meningitides c were i.n. inoculated into adult rabbits, in a concentration of optical density 1.0 at 650nm in a volume of 1000 ?L. The rabbits were immunized four times at seven-day intervals. N. subflava, N. elongata, N. sicca, N. perflava, N. mucosa strains isolated from CSF and blood from patients were also used. The rabbits developed levels of specific lgG antibodies in serum, as determined by ELISA using whole cells of homologous and heterologous strains. Serum from rabbits immunized with N. lactamica, N. meningitidis, and N. sicca or N. meningitides c, presented lgG antibodies reactive to 5 to 130 kDa antigens on immunoblot. Antibodies in serum from rabbits immunized with N. lactamica failed to induce high concentration of antibodies with bactericidal activity against N. meningitidis; however, this activity could be observed with antibodies produced by rabbits i.n. immunized with N. meningitidis. High avidity lgG antibodies were produced, although a significant correlation between bactericidal activity and induction of lgG antibodies of high avidity could not be determined, mainly in rabbits immunized with N. lactamica. Intranasal immunization of N.lactamica whole cells was suitable to efficiently sensitize mucosal immune system in rabbit model

Nasal Immunization in rabbits with Neisseria lactamica: importance of cross-reactive antigens

Neisseria lactamica, uma bactéria comensal não patogênica, predominantemente humana e usualmente encontrada no trato respiratório superior de crianças, está intimamente relacionada a Neisseria meningitidis patogênica. A colonização com N. lactamica pode ser responsável pelo envolvimento da imunidade natural contra a infecção pelos meningococos em crianças pequenas, quando as taxas de portadores de meningococos são baixas. Estas características levam a sugerir que os componentes de N. lactamica possam ser um elemento-chave para a produção de uma nova vacina para N. meningitidis. Devido ao pouco conhecimento sobre a dinâmica dos portadores e sobre a diversidade da população de N. lactamica em crianças, tem sido difícil escolher um isolado representativo para preparar um adequado produto imunogênico. Em nosso estudo, foi proposto um protocolo para estudar a imunogenicidade de whole cells de N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca ou N. meningitidis c (isoladas de portadores), através da imunização intranasal em coelhos, considerando a via de entrada natural do patógeno. Isolados da orofaringe de N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca ou N. meningitidis c, foram inoculados em coelhos adultos pela via intranasal, numa concentração de densidade ótica 1.0 a 650nm, num volume de 1000 ?L. Os coelhos foram imunizados por quatro vezes em intervalos de sete dias. Também foram usadas cepas como N. subflava, N. elongata, N. sicca, N. perflava, N. mucosa isoladas do líquido cérebro-espinhal ou sangue de pacientes. Os coelhos desenvolveram níveis de anticorpos IgG específicos no soro, como foi determinado por ELISA usando whole cells de cepas homólogas e heterólogas. O soro dos coelhos imunizados com N. lactamica, N. meningitidis, N.sicca ou N. meningitidis c, apresentaram anticorpos IgG que reagiram com antígenos numa faixa de 5 a 130 kDa por meio de immunoblot. Os anticorpos presentes nos soros dos coelhos imunizados com N. lactamica não induziram altos títulos de anticorpos com atividade bactericida contra as cepas de N. meningitidis, no entanto, esta atividade pode ser observada com anticorpos produzidos pelos coelhos imunizados intranasalmente com N. meningitidis. Anticorpos IgG de alta avidez foram produzidos, embora não tenha sido determinada uma significativa correlação entre atividade bactericida e a indução de anticorpos IgG de alta avidez, principalmente nos coelhos imunizados com N. lactamica. A imunização RESUMO intranasal usando whole cells de N. lactamica foi adequada para sensibilizar eficientemente o sistema imune de mucosa no modelo coelho.Neisseria lactamica, a commensal bacterium non-pathogenic to human beings and usually found in the upper respiratory tract of children, is closely related to pathogenic Neisseria meningitides. Colonization with N. lactamica can be responsible for evolving natural immunity to meningococcal infection in childhood, when rates of meningococcus carriers are low. These features lead to suggest that N. lactamica components can be key-elements in the production of a new vaccine for N. meningitides. As little is known about dynamic carriers and N. lactamica population diversity in children, it has been difficult choosing a representative for preparing an adequate immunogenic product. A protocol was proposed to study immunogenicity of whole cells of N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca or N. meningitides c (carrier-isolated) by i.n. immunization in rabbits considering the natural pathogen entry route. Oropharinx-isolated N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca, or N. meningitides c were i.n. inoculated into adult rabbits, in a concentration of optical density 1.0 at 650nm in a volume of 1000 ?L. The rabbits were immunized four times at seven-day intervals. N. subflava, N. elongata, N. sicca, N. perflava, N. mucosa strains isolated from CSF and blood from patients were also used. The rabbits developed levels of specific lgG antibodies in serum, as determined by ELISA using whole cells of homologous and heterologous strains. Serum from rabbits immunized with N. lactamica, N. meningitidis, and N. sicca or N. meningitides c, presented lgG antibodies reactive to 5 to 130 kDa antigens on immunoblot. Antibodies in serum from rabbits immunized with N. lactamica failed to induce high concentration of antibodies with bactericidal activity against N. meningitidis; however, this activity could be observed with antibodies produced by rabbits i.n. immunized with N. meningitidis. High avidity lgG antibodies were produced, although a significant correlation between bactericidal activity and induction of lgG antibodies of high avidity could not be determined, mainly in rabbits immunized with N. lactamica. Intranasal immunization of N.lactamica whole cells was suitable to efficiently sensitize mucosal immune system in rabbit model

Construcción de la identidad profesional del terapeuta ocupacional en el marco epistemológico actual: Una mirada particular desde Brasil

Questions regarding the identity and specificity of Occupational Therapy have marked the history of the profession process in Brazil and the world, with a diversity of approaches in different countries. Having in mind a historical and contextual analysis and interaction between local and global aspects, we do not want just register a local historic process, but also contribute to reflections on identity construction processes in different contexts. Through literature review, we seek to identify the main worldviews that influenced the construction of professional identity, highlighting the moment of paradigm transition from the modern science to the contemporary, particularly in the fields of Science, Health and Occupational Therapy. Relying on the open identity concept and the principles of Complexity and Transdisciplinarity, and considering the Human Activity and the Occupation as a nuclear object of Occupational Therapy, we question the claim to a homogeneous universal identity and develop the idea of identity construction that includes at the same time, the unit and the diversity, moving between global and local cultures.Questões relativas à identidade e especificidade da Terapia Ocupacional têm marcado o processo histórico da profissão no Brasil e no mundo, com diversidade de abordagens em diferentes países. Tendo em vista uma análise histórico-contextual e a interação entre aspectos locais e globais, pretendemos não apenas registrar um processo histórico local, mas também contribuir para reflexões sobre processos de construção da identidade em diferentes contextos. Através de análise bibliográfica, buscamos identificar as principais visões de mundo que influenciaram a construção da identidade profissional, destacando o momento de transição paradigmática da ciência moderna para a contemporaneidade, particularmente nos campos da Ciência, da Saúde e da Terapia Ocupacional. Apoiando-se no conceito de identidade aberta e nos princípios da Complexidade e da Transdisciplinaridade, e considerando a Atividade Humana ou a Ocupação como objeto nuclear da Terapia Ocupacional, questionamos a pretensão de uma identidade universal homogênea e desenvolvemos a ideia de construção de identidade que contemple, ao mesmo tempo, a unidade e a diversidade, transitando entre as culturas global e locais.Cuestiones relativas a la identidad y especificidad de la Terapia Ocupacional, han marcado el proceso histórico de la profesión en Brasil y en el mundo, con una diversidad de abordajes en los diferentes países. Teniendo como objetivo un análisis histórico-contextual y la interacción entre aspectos locales y globales pretendemos, no sólo, registrar un proceso histórico local, sino también contribuir para efectuar reflexiones sobre procesos de construcción de identidad en diferentes contextos. A través de un análisis bibliográfico, buscamos identificar las principales referencias que influyeron en la construcción de la identidad profesional, destacando el momento de transición paradigmática de la ciencia moderna a la contemporánea, particularmente en los campos de la Ciencia, Salud y Terapia Ocupacional. Apoyándose en el concepto de identidad abierta y en los principios de la Complejidad y de la Transdisciplinaridad y considerando la Actividad Humana o la Ocupación como objeto nuclear de la Terapia Ocupacional, cuestionamos la pretensión de una identidad universal homogénea y desarrollamos la idea de construcción de identidad que contempla al mismo tiempo la unidad y la diversidad, en diálogo con las culturas global y locales

Intencionalidade, método e aventura: uma trajetória a caminho da complexidade e transdisciplinaridade na terapia ocupaciona/Intentionality, method and adventure: a path to wards complexity and transdisciplinary in occupational therapy

Este artigo apresenta aspectos da trajetória profissional da terapeuta ocupacional Maria de Lourdes Feriotti, que teceu articulação entre o setor público e privado, a docência e a clínica em terapia ocupacional, “ser trabalhadora” e “ser educadora/cuidadora de trabalhadores”, a partir de escolhas tecidas por necessidades, possibilidades e limites determinados por seu contexto pessoal e histórico-social. Neste caminho, houve o encontro promissor com o referencial da Complexidade que se revelou inovador e fecundo para análise e compreensão de necessidades históricas da Terapia Ocupacional, sobretudo, nas discussões sobre identidade e especificidade da profissão. No encontro das autoras, proporcionado por uma pesquisa de mestrado, apresentou-se um diálogo intergeracional sobre tal trajetória e tendências reflexivas atuais para o contexto da Terapia Ocupacional no Brasil. Apresenta-se a narrativa de uma trajetória profissional de modo a valorizar a interseção entre subjetividade e objetividade, história pessoal e história coletiva, e as múltiplas significações das atividades, escolhas e produções descritas. Aponta-se temas relativos à complexidade, transdisciplinaridade, participação política, satisfação profissional e resistência à disjunção entre vida afetiva, prática profissional e produção científica. Destaca-se nessa trajetória a coerência alcançada entre a produção teórico-prática e sua perspectiva de vida, sustentada pelo encontro com a Complexidade. AbstractThis article presents aspects of the occupational therapist's professional trajectory Maria de Lourdes Feriotti, which articulated between the public and private sector, the teaching and occupational therapy clinic, “being a worker” and “be educator / caregiver of workers”, based on choices made by needs, possibilities and limits determined by their personal and historical-social context. In this way, there was a promising meeting with the reference of Complexity that proved innovative and fruitful for analysis and understanding of historical needs of Occupational Therapy, especially in discussions about identity and specificity of the profession. At the authors' meeting, provided by a master's research, an intergenerational dialogue was presented on such trajectory and current reflexive trends for the context of Occupational Therapy in Brazil. The narrative of a professional trajectory is presented in order to value the intersection between subjectivity and objectivity, personal history and collective history, and the multiple meanings of the activities, choices and productions described. Themes related to complexity, transdisciplinarity, political participation, professional satisfaction and resistance to the disjunction between affective life, professional practice and scientific production are pointed out. In this trajectory, we highlight the coherence reached between theoretical and practical production and its life perspective, supported by the encounter with Complexity.Key words: occupational therapy; professional trajectory; complexity; transdisciplinarity. ResumenEste artículo presenta aspectos de la trayectoria profesional de la terapeuta ocupacional Maria de Lourdes Feriotti, que articulaba entre el sector público y privado, la clínica de enseñanza y terapia ocupacional, “ser una trabajadora” y “ser una educadora / cuidadora de trabajadores”, basado en elecciones hechas por necesidades, posibilidades y límites determinados por su contexto personal y histórico-social. En ese camino, hubo un encuentro prometedora con el marco de la Complejidad que resultó ser innovadora y fructífera para el análisis y la comprensión de las necesidades históricas de la Terapia Ocupacional, especialmente en las discusiones sobre la identidad y la especificidad de la profesión. La reunión de las autoras, proporcionada por una investigación de maestría, se presentó un diálogo intergeneracional sobre dicha trayectoria y tendencias reflexivas actuales para el contexto de la Terapia Ocupacional en Brasil. La narrativa de una carrera profesional se presenta para valorar la intersección entre subjetividad y objetividad, historia personal e historia colectiva, y los múltiples significados de las actividades, elecciones y producciones descritas. Se señalan temas relacionados con la complejidad, la transdisciplinariedad, la participación política, la satisfacción profesional y la resistencia a la disyunción entre la vida afectiva, la práctica profesional y la producción científica. En esta trayectoria, se destaca la coherencia entre la producción teórica y práctica y su perspectiva de la vida, sostenida por el encuentro con la Complejidad.Palabras clave: terapia ocupacional; trayectoria profesional; complejidad; transdisciplinariedad.