Control of Insulin Release by Transient Receptor Potential Melastatin 3 (TRPM3) Ion Channels

Background/Aims: The release of insulin in response to increased levels of glucose in the blood strongly depends on Ca2+ influx into pancreatic beta cells by the opening of voltage-gated Ca2+ channels. Transient Receptor Potential Melastatin 3 proteins build Ca2+ permeable, non-selective cation channels serving as pain sensors of noxious heat in the peripheral nervous system. TRPM3 channels are also strongly expressed in pancreatic beta cells that respond to the TRPM3 agonist pregnenolone sulfate with Ca2+ influx and increased insulin release. Therefore, we hypothesized that in beta cells TRPM3 channels may contribute to pregnenolone sulfate- as well as to glucose-induced insulin release. Methods: We used INS-1 cells as a beta cell model in which we analysed the occurrence of TRPM3 isoformes by immunoprecipitation and western blotting and by cloning of RT-PCR amplified cDNA fragments. We applied pharmacological as well as CRISPR/Cas9-based strategies to analyse the interplay of TRPM3 and voltage-gated Ca2+ channels in imaging experiments (FMP, Fura-2) and electrophysiological recordings. In immunoassays, we examined the contribution of TRPM3 channels to pregnenolone sulfate- and glucose-induced insulin release. To confirm our findings, we generated beta cell-specific Trpm3-deficient mice and compared their glucose clearance with the wild type in glucose tolerance tests. Results: TRPM3 channels triggered the activity of voltage-gated Ca2+ channels and both channels together contributed to insulin release after TRPM3 activation. Trpm3-deficient INS-1 cells lacked pregnenolone sulfate-induced Ca2+ signals just like the pregnenolone sulfate-induced insulin release. Both, glucose-induced Ca2+ signals and the glucose-induced insulin release were strongly reduced. Accordingly, Trpm3-deficient mice displayed an impaired decrease of the blood sugar concentration after intraperitoneal or oral administration of glucose. Conclusion: The present study suggests an important role for TRPM3 channels in the control of glucose-dependent insulin release

Peopling the past: creating a site biography in the Hungarian Neolithic

First paragraph: For most regions and for most sequences around the world, prehistorians until now have only been able to assign the past people whom they study to rather imprecise times. Such imperfect chronology is the result of our reliance on radiocarbon dating and a conventional approach to the interpretation of radiocarbon results which relies, basically, on the visual inspection of calibrated dates. Thus, typically, a radiocarbon sample from a few thousand years ago will calibrate to a date spanning 100–200 years (at 2σ). A group of such samples will not produce identical calibrated dates, even when they derive from the same event, and archaeologists visually inspecting a graph of such dates tend to include the extremes of the timespan indicated, and thus considerably exaggerate the duration of a given phenomenon as well as accepting the relative imprecision of its dating (BAYLISS ET AL. 2007).In the European Neolithic there has been a longstanding tradition of inferring chronology by summing, first uncalibrated (OTTAWAY 1973; GEYH / MARET 1982; BREUNIG 1987), and then calibrated (AITCHISON ET AL. 1991) radiocarbon dates. This method similarly tends to produce inaccurate chronologies of exaggerated duration (BAYLISS ET AL. 2007, 9–11). For the fortunate few, in regions with favourable conditions in which timbers are preserved, dendrochronology can provide dates precise to a calendar year and even to a season within a given year, for example among the Pueblo settlements of the American Southwest or the Neolithic and Bronze Age settlements on the fringes of the Alps in west and central Europe (e.g. HERR 2001; MENOTTI 2004). In most regions, however, such preservation and such chronologies are exceptional

Les mutuelles de santé subventionnées comme instruments de la Couverture Maladie Universelle au Sénégal

Les premières mutuelles de santé à base communautaire ont été créées à la fin des années 1980 au Sénégal, et se sont multipliées dans le courant des années 1990. Leur développement a cependant été freiné par la faible capacité contributive des ménages ainsi que la faible attractivité du paquet de soins proposé. L’Etat s’est progressivement engagé dans le soutien aux mutuelles de santé, mettant en place un cadre juridique et des structures d’appui à la promotion et au développement de ces organisations communautaires. Un tournant décisif a eu lieu en 2013, avec la mise en œuvre de la politique de Couverture Maladie Universelle (CMU), qui a abouti à la création d’une mutuelle de santé dans chaque commune du pays et vise, à travers ces organisations communautaires, à couvrir contre le risque maladie l’ensemble de la population des secteurs rural et informel. Pour encourager l’adhésion de la population, le paquet de soins couvert par les mutuelles de santé a été considérablement élargi et harmonisé à l’échelle du pays et une politique de subvention étatique de la cotisation est mise en œuvre. Notre recherche vise à étudier le processus d’élaboration de cette politique de CMU, ainsi qu’à analyser les conséquences de sa mise en œuvre sur le fonctionnement des mutuelles de santé dans le département de Kaolack. Basée sur une approche de terrain de type socio-anthropologique, notre analyse repose sur des matériaux qualitatifs issus d’entretiens semi-directifs avec différentes parties prenantes ainsi que d’observations non-participantes. Les données quantitatives disponibles ont également été collectées et analysées. La stratégie de « Décentralisation de l’Assurance Maladie (DECAM) » à travers les mutuelles de santé à base communautaire trouve son origine dans un projet pilote élaboré et mis en œuvre par Abt-Associates. Elle s’est progressivement imposée face à d’autres projets de développement de l’assurance maladie pour les secteurs rural et informel. Des moyens techniques et financiers considérables ont été mis en œuvre par l’Etat et ses partenaires pour soutenir le développement et la professionnalisation des mutuelles de santé à base communautaire depuis 2013. Bien que les responsables mutualistes perçoivent ces nouvelles modalités de collaboration comme une opportunité unique de développement du système, ce partenariat n’est pas exempt de tensions. Les principes à la base de ces organisations communautaires et leurs logiques de fonctionnement peuvent entrer en contradiction avec celles de l’Etat. Largement tributaires des financements étatiques, qui subsidient entièrement la cotisation d’une majorité de leurs membres et rémunèrent leurs gérants, les mutuelles de santé doivent trouver un équilibre entre autonomie, représentation communautaire et prestation de service public. Face aux retards de paiement de l’Etat, elles doivent également mettre en place de nouvelles stratégies pour garder leur crédibilité face aux prestataires de soins et éviter la cessation de paiement. Enfin, l’augmentation du taux de pénétration et le recouvrement des cotisations constituent encore aujourd’hui des défis majeurs, face à une population qui reste perplexe et ce, malgré les campagnes de promotion et de sensibilisation déployées depuis de nombreuses années.ARC Effi-Sant