Membrane cholesterol modulates LOX-1 shedding in endothelial cells

The lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1 (LOX-1) is a scavenger receptor responsible for ox-LDL recognition, binding and internalization, which is up-regulated during atherogenesis. Its activation triggers endothelium dysfunction and induces inflammation. A soluble form of LOX-1 has been identified in the human blood and its presence considered a biomarker of cardiovascular diseases. We recently showed that cholesterol-lowering drugs inhibit ox-LDL binding and internalization, rescuing the ox-LDL induced apoptotic phenotype in primary endothelial cells. Here we have investigated the molecular bases of human LOX-1 shedding by metalloproteinases and the role of cell membrane cholesterol on the regulation of this event by modulating its level with MβCD and statins. We report that membrane cholesterol affects the release of different forms of LOX-1 in cells transiently and stably expressing human LOX-1 and in a human endothelial cell line (EA.hy926). In particular, our data show that i) cholesterol depletion triggers the release of LOX-1 in exosomes as a full-length transmembrane isoform and as a truncated ectodomain soluble fragment (sLOX-1); ii) endothelial cells secrete a soluble metalloproteinase which induces LOX-1 ectodomain shedding and iii) long term statins treatment enhances sLOX-1 proteolytic shedding

pH-dependent redox and CO binding properties of chelated protoheme-L-histidine and protoheme-glycyl-L-histidine complexes

The pH dependence of redox properties, spectroscopic features and CO binding kinetics for the chelated protohemin-6(7)-L-histidine methyl ester (heme-H) and the chelated protohemin-6(7)-glycyl-L-histidine methyl ester (heme-GH) systems has been investigated between pH 2.0 and 12.0. The two heme systems appear to be modulated by four protonating groups, tentatively identified as coordinated H2O, one of heme's propionates, N epsilon of the coordinating imidazole, and the carboxylate of the histidine residue upon hydrolysis of the methyl ester group (in acid medium). The pK(a) values are different for the two hemes, thus reflecting structural differences. In particular, the different strain at the Fe-N-epsilon bond, related to the different length of the coordinating arm, results in a dramatic alteration of the bond strength, which is much smaller in heme-H than in heme-GH. It leads to a variation in the variation of the pKa for the protonation of the N-epsilon of the axial imidazole as well as in the proton-linked behavior of the other protonating groups, envisaging a cross-talk communication mechanism among different groups of the heme, which can be operative and relevant also in the presence of the protein matrix

Modulation of the proteolytic activity of matrix metalloproteinase-2 (gelatinase A) on fibrinogen

The proteolytic processing of bovine fibrinogen by MMP-2 (gelatinase A), which brings about the formation of a product unable to form fibrin clots, has been studied at 37 degrees C. Catalytic parameters, although showing a somewhat lower catalytic efficiency with respect to thrombin and plasmin, indeed display values indicating a pathophysiological significance of this process. A parallel molecular modelling study predicts preferential binding of MMP-2 to the beta-chain of fibrinogen through its haemopexin-like domain, which has been directly demonstrated by the inhibitory effect in the presence of the exogenous haemopexin-like domain. However, the removal of this domain does not impair the interaction between MMP-2 and fibrinogen, but it dramatically alters the proteolytic mechanism, producing different fragmentation inter-mediates. The investigation at various pH values between 6.0 and 9.3 indicates a proton-linked behaviour, which is relevant for interpreting the influence on the process by environmental conditions occurring at the site of an injury. Furthermore, the action of MMP-2 on peroxynitrite-treated fibrinogen has been investigated, a situation possibly occurring under oxidative stress. The chemical alteration of fibrinogen, which has been shown to abolish its clotting activity, brings about only limited modifications of the catalytic parameters without altering the main enzymatic mechanism

Increased release and activity of matrix metalloproteinase-9 in patients with mandibuloacral dysplasia type A, a rare premature ageing syndrome

Mandibuloacral dysplasia type A (MADA; OMIM 248370), a rare disorder caused by mutation in the LMNA gene, is characterized by post-natal growth retardation, craniofacial and skeletal anomalies (mandibular and clavicular hypoplasia, acroosteolysis, delayed closure of cranial sutures, low bone mass and joint contractures), cutaneous changes and partial lipodystrophy. Little is known about the molecular mechanisms by which LMNA mutations produce bone alterations. An altered bone extracellular matrix (ECM) remodelling could play a pivotal role in this disorder and influence part of the typical bone phenotype observed in patients. Therefore, we have focused our investigation on matrix metalloproteinases (MMPs), which are degradative enzymes involved in ECM degradation and ECM remodelling, thus likely contributing to the altered bone mineral density and bone metabolism values seen in five MADA patients. We evaluated the serum levels of several MMPs involved in bone development, remodelling and homeostasis, such as MMP-9, -2, -3, -8 and -13, and found that only the 82 kDa active enzyme forms of MMP-9 are significantly higher in MADA sera compared with healthy controls (n = 16). The serum level of MMP-3 was instead lower in all patients. No significant differences were observed between controls and MADA patients for the serum levels of MMP-2, -8 and -13 and of tissue inhibitor of metalloproteinase 2, a natural inhibitor of MMP-9. Similarly, normal serum levels of tumour necrosis factor alpha (TNF-alpha), interleukin (IL)-6 and IL-1beta were detected. These data suggest a possible involvement of MMP-9 in MADA disease, underlying the potential use in diagnosis and therapy

Effect of axial coordination on the kinetics of assembly and folding of the two halves of horse heart cytochrome c

The kinetics of the assembly of two complementary fragments of oxidized horse heart cytochrome c (cyt c), namely the heme-containing fragment-(1-56) and the fragment-(57-104), have been characterized at different pH values. At neutral pH the fragment-(1-56) is hexacoordinated and has two histidines axially ligated to the heme-Fe(III) (Santucci, R., Fiorucci, L., Sinibaldi, F., Polizio, F., Desideri, A., and Ascoli, F. (2000) Arch. Biochem. Biophys. 379, 331-336), thus mimicking what occurs in the folding intermediate of cyt c. The kinetics of the formation of the complex between the two fragments are characterized at pH 7.0 by a slow rate constant that is independent of the concentration of the reactants; conversely, at a low pH the kinetics are much faster and depend on the concentration of the fragments. This behavior suggests that the rate-limiting step observed in the recombination process of the fragments at neutral pH (that leads to the final coordination of Met-80) has to be ascribed to the detachment of the "misligated" histidine. Thus, the faster recombination rate at a low pH can be related to the fact that histidine is protonated and not able to coordinate to the metal. Furthermore, the independence of the rate constant on the concentration of the reactants observed at pH 7.0 can be accounted for by the occurrence of a conformational transition, which takes place immediately after the two fragments collapse together, likely simulating what induces the detachment of the misligated histidine during cytochrome folding

Efecto de tratamientos UV-C en la preservación de bebidas derivadas de matrices frutihortícolas

En la actualidad ha incrementado el número de consumidores que optan por bebidas naturales elaboradas a partir de frutas y hortalizas frescas, debido a los beneficios que aportan en términos de salud y nutrición. Sin embargo, resulta necesaria la aplicación de nuevas tecnologías que se ajusten a los requerimientos de los consumidores y que, a su vez, garanticen la inocuidad de estos productos sin alterar su calidad sensorial. En la actualidad se está prestando especial atención a las tecnologías no térmicas tales como la radiación ultravioleta de onda corta (UV-C) debido su efecto germicida vinculado a la reducción o eliminación de microorganismos mediante un daño irreversible a nivel celular. Este trabajo tuvo por objetivo estudiar el efecto de tratamientos individuales de UV-C sobre la calidad microbiológica de aguas saborizadas naturales. Para ello se seleccionó una formulación de agua saborizada de manzana y limón (35%v/v), a partir de la cual se tomaron de 15 ml los cuales se colocaron en placas estériles de 15 cm de diámetro. Cada una de las muestras se sometió a tratamientos individuales de UV-C en las cinco dosis de exposición anteriormente mencionadas: pulsos breves (855μJ/cm2, 1710μJ/cm2 y 2565μJ/cm2) y pulsos prolongados (3420 μJ/cm2 y 4275μJ/cm2), y una muestra control sin tratar, bajo condiciones de agitación constante (80rpm). Los ensayos de cuantificación y diferenciación de microorganismos, se realizaron por duplicado (para cada muestra) con diluciones seriadas al décimo en agua peptonada al 0,1%. La siembra de bacterias mesófilas aerobias totales (BAM) se realizó por el método de placa vertida en agar nutritivo (AN), en tanto para hongos y levaduras, así como para coliformes totales, mediante siembra en superficie en agar papa glucosado (APG). En los resultados obtenidos se pudo evidenciar que el tratamiento con UV-C fue efectivo tanto para los tratamientos breves (855μJ/cm2, 1710μJ/cm2 y 2565μJ/cm2) como para los prolongados (3420μJ/cm2 y 4275μJ/cm2), evidenciándose para los tratamientos prolongados una reducción de 2 órdenes para BAM y coliformes, y 3 órdenes para hongos y levaduras, cuya carga microbiológica inicial fue de 2090 UFC/ml y 3360 UFC/ml, respectivamente. De esta manera podemos decir que la radiación UV-C se presenta como una alternativa tecnológica muy prometedora para reducir la carga microbiana inicial a niveles seguros

La tutela dei diritti umani in Europa tra sovranit\ue0 statale e ordinamenti sovranazionali

Il Volume si propone di offrire una visione dei sistemi di tutela dei diritti umani esistenti a livello europeo, pur nella consapevolezza che gli argomenti trattati non permettono di delineare un quadro esaustivo delle diverse problematiche. Nella scelta degli argomenti si \ue8 comunque tenuto conto di alcune delle principali questioni che animano l\u2019attuale dibattito scientifico. Nella redazione dell\u2019opera, a cui hanno partecipato diversi studiosi italiani e stranieri, si \ue8 perseguito l\u2019intento di coniugare il rigore dell\u2019indagine critica ad un\u2019attenzione particolare per le esigenze della didattica, al fine di offrire uno strumento rivolto non solo agli operatori giuridici, ma anche agli studenti universitari. In particolare, allo scopo di agevolare l\u2019uso didattico del Volume, si \ue8 ritenuto opportuno articolare l\u2019opera in cinque parti distinte, impiegabili indipendentemente l\u2019una dall\u2019altra ovvero secondo differenti combinazioni

Panorama del consumo de las producciones vegetales intensivas de alimentos saludables, "Proalim Km 0", en tiempos de pandemia por Covid-19

El consumo de frutas y hortalizas (FyH) resulta imprescindible para una alimentación sana y equilibrada, y fortalecer el sistema inmunológico, frente al SARS-CoV-2. Con el objetivo de brindar un panorama sobre los cambios producidos en los hábitos de consumo de las producciones vegetales intensivas de alimentos saludables, en la población de la Provincia de Buenos Aires (PBA), ante el contexto de pandemia, se efectuaron dos encuestas, respecto de su producción, agroindustria, comercialización y consumo. Las mismas se realizaron en el marco del proyecto CIAC-940186 (INTA?AUDEAS?CONADEV) utilizando la plataforma Google-form (en el período 9-12/2020),(n:449), correspondiendo 91% a PBA, (área-CeRBAS: 80% y CRBAN: 11%). Los resultados indican predisposición a: la huerta familiar (80%), producción de frutales(64%); elaboración de conservas (70%) y preferencia por los productos de estación(93,5%). Al 93% le parece importante conocer el origen de los productos consumidos y72% compraría productos agroecológicos. El 47% cambió su percepción sobre la procedencia de FyH consumidas. Si bien compran en verdulerías, 1/3 destacó preferirlas de quintas locales. Respecto de nuevos canales, 7% compra mediante redes sociales y/o páginas web. En harinas de hortalizas (categoría que el 40%desconocía), se destacaron: garbanzo (49%), lenteja (28%) y arveja (20%). En porciones de FyHp/día: 10% consume cinco porciones/día, mientras 88,4% lo percibe como adecuado. Dicha disociación y el desconocimiento de recomendaciones oficiales detectado, en contraste con otros resultados de las encuestas, indican el enorme desafío de concientización, por parte de las instituciones, sobre cuál debe ser el consumo adecuado y sus múltiples beneficios.Fil: Bellaccomo, C.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur.; ArgentinaFil: Berriolo, M. J.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur.; ArgentinaFil: Caracotche, M. V.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur.; ArgentinaFil: Castagnino, Ana Maria. Crescaa, Facultad de Agronomía, Azul, Uncpba, Argentina; ArgentinaFil: Cendón, M. L.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur.; ArgentinaFil: Diaz, Karina Elizabeth. Crescaa, Facultad de Agronomía, Azul, Uncpba, Argentina; ArgentinaFil: Fasciglione. G.. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: González Ferrín, M. S.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur.; ArgentinaFil: Mairosser, A.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur.; ArgentinaFil: Martinoia, G. I.. Crescaa, Facultad de Agronomía, Azul, Uncpba, Argentina; ArgentinaFil: Rogers, William John. Crescaa, Facultad de Agronomía, Azul, Uncpba, Argentina; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Cientifico Tecnolológico Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología. Laboratorio de Biología Funcional y Biotecnología; ArgentinaFil: Rosini, M.B.. Crescaa, Facultad de Agronomía, Azul, Uncpba, Argentina; ArgentinaFil: Villagra C.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur.; ArgentinaFil: Yommi, A.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur.; ArgentinaFil: Zazzetta, M. L.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur.; Argentina41º Congreso Argentino de HorticulturaLa PLataArgentinaASAH

Estudio del consumo latinoamericano de frutas y hortalizas locales "Km 0"

La Horticultura, con sus diferentes disciplinas (Horticultura/Olericultura, Fruticultura, Aromáticas-Medicinales y Floricultura), ha cobrado mayor relevancia, a partir de la pandemia por Covid-19, con una mayor valoración de los productos provenientes de cadenas cortas. El objetivo fue evaluar el grado de conocimiento, comportamiento y preferencias de los consumidores latinoamericanos, respecto de la inocuidad, calidad y origen de las frutas y hortalizas (FyH) de cercanía producidas y consumidas en un radio no mayor a 100 Km, diferenciadas con el logo “Km 0”. Se generó una encuesta on line (GoogleForms): Estudio sobre la producción y el consumo latinoamericano de frutas y hortalizas "Km 0",en el marco de vínculos interinstitucionales (UNCPBA, UNMDP, UNSL, UCA e INTA Área CERBAS, de Argentina; UdelaR, Uruguay; UNAL y UniSalle, Colombia; BUAP, México; UFRRJ, Brasil), del 09/03/2022 al 12/07/2022. Los principales temas fueron: Grado de conocimiento de la categoría FyH “Km 0”; Ventajas percibidas; Predisposición a consumirlas y a adquirirlas; Grado de valoración del etiquetado “Km 0”; y de Campañas de difusión; Lugares de compra y cambios desde la pandemia; Valoración de disponer de listados de productores locales de FyH “Km 0”; Conocimiento del lugar de producción, de las FyH y valoración del impulso a las producciones locales; Conocimiento de las BPA; Alimentos adquiridos y Valoración del origen de las FyH consumidas. Las encuestas respondidas fueron 1127. Se detectó desconocimiento de la categoría “Km 0” (60%), bajo consumo de FyH (17% consume 5 ≥ porciones/día) aunque una elevada valoración de FyH en la dieta (80%). Se evidenció la necesidad de capacitaciones y difusión permanente, de la producción y consumo de FyH inocuas y de calidad, en cantidad y diversidad. La pandemia resultó un punto de inflexión a partir del cual los consumidores tomaron conciencia de la importancia del origen de los productos consumidos, prefiriendo FyH locales.Fil: Castagnino, Ana Maria. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentina. Universidad Católica Argentina; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Cientifico Tecnolológico Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología. Laboratorio de Biología Funcional y Biotecnología; ArgentinaFil: Díaz, K. E.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Marina, Javier Alejandro. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Fernándes, C.. Universidade Federal Rural Do Rio de Janeiro (ufrrj);Fil: Díaz, H. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Bazán, P.. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Ingeniería y Ciencias Agropecuarias; ArgentinaFil: Rogers, William John. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Cientifico Tecnolológico Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología. Laboratorio de Biología Funcional y Biotecnología; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Rubel, Irene Albertina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Otaño, Ana Clara. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Fasciglione, Gabriela. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Marín Castro, M. A.. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla; MéxicoFil: Reina, R.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Galizio, R.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Cendón, M. L.. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Zanelli, G.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Miranda Lasprilla, D.. Universidad Nacional de Colombia. Sede Bogotá; ColombiaFil: Chaparro, G. M. P.. Universidad de la Salle;Fil: Pérez, E. R.. Universidad Católica Argentina; ArgentinaFil: Yommi, A.. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Bastien, E.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentin

Estudio del consumo latinoamericano de frutas y hortalizas locales "Km 0"

La Horticultura, con sus diferentes disciplinas (Horticultura/Olericultura, Fruticultura, Aromáticas-Medicinales y Floricultura), ha cobrado mayor relevancia, a partir de la pandemia por Covid-19, con una mayor valoración de los productos provenientes de cadenas cortas. El objetivo fue evaluar el grado de conocimiento, comportamiento y preferencias de los consumidores latinoamericanos, respecto de la inocuidad, calidad y origen de las frutas y hortalizas (FyH) de cercanía producidas y consumidas en un radio no mayor a 100 Km, diferenciadas con el logo “Km 0”. Se generó una encuesta on line (GoogleForms): Estudio sobre la producción y el consumo latinoamericano de frutas y hortalizas "Km 0",en el marco de vínculos interinstitucionales (UNCPBA, UNMDP, UNSL, UCA e INTA Área CERBAS, de Argentina; UdelaR, Uruguay; UNAL y UniSalle, Colombia; BUAP, México; UFRRJ, Brasil), del 09/03/2022 al 12/07/2022. Los principales temas fueron: Grado de conocimiento de la categoría FyH “Km 0”; Ventajas percibidas; Predisposición a consumirlas y a adquirirlas; Grado de valoración del etiquetado “Km 0”; y de Campañas de difusión; Lugares de compra y cambios desde la pandemia; Valoración de disponer de listados de productores locales de FyH “Km 0”; Conocimiento del lugar de producción, de las FyH y valoración del impulso a las producciones locales; Conocimiento de las BPA; Alimentos adquiridos y Valoración del origen de las FyH consumidas. Las encuestas respondidas fueron 1127. Se detectó desconocimiento de la categoría “Km 0” (60%), bajo consumo de FyH (17% consume 5 ≥ porciones/día) aunque una elevada valoración de FyH en la dieta (80%). Se evidenció la necesidad de capacitaciones y difusión permanente, de la producción y consumo de FyH inocuas y de calidad, en cantidad y diversidad. La pandemia resultó un punto de inflexión a partir del cual los consumidores tomaron conciencia de la importancia del origen de los productos consumidos, prefiriendo FyH locales.Fil: Castagnino, Ana Maria. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentina. Universidad Católica Argentina; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Cientifico Tecnolológico Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología. Laboratorio de Biología Funcional y Biotecnología; ArgentinaFil: Díaz, K. E.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Marina, Javier Alejandro. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Fernándes, C.. Universidade Federal Rural Do Rio de Janeiro (ufrrj);Fil: Díaz, H. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Bazán, P.. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Ingeniería y Ciencias Agropecuarias; ArgentinaFil: Rogers, William John. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Cientifico Tecnolológico Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología. Laboratorio de Biología Funcional y Biotecnología; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Rubel, Irene Albertina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Otaño, Ana Clara. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Fasciglione, Gabriela. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Marín Castro, M. A.. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla; MéxicoFil: Reina, R.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Galizio, R.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Cendón, M. L.. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Zanelli, G.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Miranda Lasprilla, D.. Universidad Nacional de Colombia. Sede Bogotá; ColombiaFil: Chaparro, G. M. P.. Universidad de la Salle;Fil: Pérez, E. R.. Universidad Católica Argentina; ArgentinaFil: Yommi, A.. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Bastien, E.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentin