Signature transcriptomale des kératinocytes humains dans un modèle de réépithélisation (validation fonctionnelle des molécules impliquées)

Le travail qui fait l objet de cette thèse contribue à une meilleure compréhension des événements moléculaires qui régissent la cicatrisation cutanée. En étudiant la réponse biologique spécifique des kératinocytes, nous avons utilisé la technologie des puces à ADN et un système original de blessure développé dans notre laboratoire 1) pour identifier les gènes qui sont induits ou réprimés dans les kératinocytes humains en culture en réponse à une blessure mécanique 2) pour caractériser les voies de signalisation qui contrôlent l expression de ces gènes. Nous avons montré que la blessure d un tapis de kératinocytes provoque la stimulation et l inhibition de l expression de 161 nouveaux marqueurs de la réparation épidermique. Une analyse pharmacologique réalisée en présence des inhibiteurs spécifiques de voies de signalisation ERK1/2,p38[MAPK] et PI3K, montre que ces voies exercent une contrôle sélectif sur le processus de réparation en contrôlant l expression des gènes spécifiques. Une étude fonctionnelle réalisée à la suite de notre analyse transcriptomale nous a permis de montrer que la stimulation d HB-EGF, d ETS1 et de NDRG1 est une condition sine qua non pour la migration et la prolifération des kératinocytes en réponse à une blessure, la surexpression ou l inhibition de l expression de chacun d eux entraînant des altérations cinétiques du processus de fermeture de blessure. Par ailleurs, nous démontrons pour la première fois que HIF1a joue un rôle fondamental dans la migration cellulaire en contrôlant le niveau d expression de la sous-unité ax3 de la laminine 5, une protéine qui joue un rôle essentiel dans la migration, la prolifération, et l adhésion des kératinocytes.NICE-BU Sciences (060882101) / SudocSudocFranceF