Serological crossreactivity in the diagnosis of bovine brucellosis in the mouse model

The National Programme of Control and Eradication of Bovine Brucellosis in Argentina involves the vaccination of female calves between 3 and 8 months of age with B. abortus S19, and elimination of seropositives reactors. Commonly used serological tests are BPA (Buffered Plate Antigen) and FPA (Fluorescence Polarization Assay) as screening and confirmatory tests, respectively. Both detect antibodies to the O-chain (OPS) induced by vaccination or by field strains. Occasionally, false positive reactions were found in healthy adult bovine induced by cross reaction antibodies stimulated by the administration of vaccines composed of Gram negative bacteria. The aims of this work were to study in the mouse model: a) the crossreactivity in diagnosis of bovine brucellosis induced by administration of commercial vaccines that contain Gram negative bacterins and b) the identification of vaccinal strains that induced crossreactivity. In the Experiment I, female Balb/c mice were vaccinated with 9 bovine commercial vaccines. In the second experiment, groups of mice were immunized with Gram negative bacterias (bacterins) contained in vaccines used in this study. As positive control groups, mice vaccinated with 19 strain and other inoculated with B. abortus 544 were included. Periodic bleedings were performed and sera were analized in modified BPA and FPA tests. The results showed that 6/9 vaccines induced a short-term serological response detected only by BPA in a variable percentage of animals per group. On the other hand, the bacteria that induced most persistent serology in both tests were Pasteurella multocida y Mannheimia haemolytica. According to our results, the antibodies induced by vaccines used in this work would not have a significant impact on the diagnosis of bovine brucellosis in the murine model.Fil: Díaz, A.G. CONICET. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil (CIVETAN). Tandil, ArgentinaFil: Díaz, A.G. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva (SAMP). Laboratorio de Inmunología. Tandil, ArgentinaFil: Soto, P. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva (SAMP). Laboratorio de Microbiología Clínica y Experimental. Tandil, ArgentinaFil: Estein, S.M. CONICET. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil (CIVETAN). Tandil, ArgentinaFil: Estein, S.M. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva (SAMP). Laboratorio de Inmunología. Tandil, ArgentinaEn Argentina, el control de la brucelosis bovina se apoya en la vacunación obligatoria de las terneras con la cepa 19 de Brucella abortus y en la eliminación de los animales seropositivos con destino a faena. Las pruebas serológicas que se emplean más frecuentemente son el BPA (Buffered Plate Antigen) (prueba tamiz) y el FPA (Fluorescence Polarization Assay) (prueba confirmatoria). Ambas detectan anticuerpos anti-cadena O del polisacárido inducidos por la vacunación o por la infección con brucelas de campo. En ocasiones se han encontrado, en un contexto de ausencia de enfermedad clínica, reacciones serológicas atípicas en bovinos adultos. Las mismas han sido atribuidas a la presencia de anticuerpos de reacción cruzada inducidos por vacunas que contienen bacterias Gram negativas. Los objetivos del presente trabajo desarrollado en el modelo murino fueron: estudiar la interferencia en el diagnóstico de la brucelosis bovina generada por la administración de vacunas comerciales que contienen bacterias Gram negativas e identificar las cepas vacunales responsables de la reacción cruzada. En un primer ensayo se vacunaron ratones BALB/c hembras con 9 biológicos de aplicación en bovinos. En un segundo ensayo se inmunizaron ratones con las bacterias Gram negativas (bacterinas) contenidas en las vacunas. Se incluyeron como grupos control, animales vacunados con la cepa 19 de B. abortus y animales inoculados con B. abortus 544. Se realizaron sangrías periódicas y los sueros fueron analizados en las pruebas de BPA modificada y FPA. Los resultados obtenidos indican que 6/9 vacunas empleadas indujeron una respuesta serológica de corta duración que sólo fue detectada por la prueba de BPA en un porcentaje variable de animales por grupo. Por otro lado, las bacterinas que indujeron la serología más persistente en ambas pruebas fueron: Pasteurella multocida y Mannheimia haemolytica. Por lo anteriormente expuesto, los anticuerpos generados por las vacunas empleadas en este trabajo no tendrían un impacto significativo en el diagnóstico de la\nbrucelosis bovina en el modelo murino

Vaccines for the prevention of fasciolasis in ruminants a challenge yet unresolved

The use of an effective vaccine against fasciolosis is currently and due to advances in the field, an achievable goal. This article is a review of recent data and the main results about the search for vaccine candidates against fasciolosis. In the present work it presents the search done and results from the use of attenuated vaccines irradiated to new strategies that involve the development of recombinant vaccines and DNA.Fil: Fernández, V. CONICET. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones Veterinarias de Tandil (CIVETAN). Tandil, ArgentinaFil: Fernández, V. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Biológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular. Tandil, ArgentinaFil: Fernández, V. Comisión de Investigaciones Científicas de la Provincia de Buenos Aires (CICPBA). Buenos Aires, ArgentinaFil: Solana, M.V. CONICET. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones Veterinarias de Tandil (CIVETAN). Tandil, ArgentinaFil: Solana, M.V. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Biológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular. Tandil, ArgentinaFil: Estein, S.M. CONICET. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones Veterinarias de Tandil (CIVETAN). Tandil, ArgentinaFil: Estein, S.M. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva (SAMP). Laboratorio de Inmunología. Tandil, ArgentinaFil: Solana, H. CONICET. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones Veterinarias de Tandil (CIVETAN). Tandil, ArgentinaFil: Solana, H. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Biológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular. Tandil, ArgentinaFil: Solana, H. Comisión de Investigaciones Científicas de la Provincia de Buenos Aires (CICPBA). Buenos Aires, ArgentinaLa fasciolosis producida por el trematodo Fasciola hepatica es una enfermedad que provoca importantes pérdidas económicas en la producción ganadera siendo además una preocupante enfermedad zoonótica. Actualmente, la única herramienta disponible para el control de dicha enfermedad es la utilización de fármacos antiparasitarios. Hoy, la aparición de fenómenos de resistencia antiparasitaria llevan a la búsqueda de nuevas opciones terapéuticas. La búsqueda de antígenos vacunales para el desarrollo de una vacuna eficaz es una de las herramientas más investigadas. En el presente artículo se expone una revisión de los principales resultados obtenidos hasta el momento en la búsqueda de diversos candidatos vacunales. Se comparan diferentes intentos de vacunas experimentales: desde vacunas irradiadas atenuadas, hasta las nuevas estrategias que involucran el desarrollo de vacunas recombinantes y de ADN en el modelo ratón y en el huésped susceptible

Diferentes estrategias para el diagnóstico de la brucelosis ovina por brucella ovis en una majada endémica de argentina

Brucella ovis is the etiological agent of contagious epididymitis in rams. Prevalence increases when biannual control was not performed in B. ovis endemic flocks. Diagnosis is based on clinical examination, serological tests and bacteriological isolation of B. ovis from semen. Semen analysis by PCR technique complements the direct diagnosis for the detection of B. ovis or other reproductive pathogens in sheep. In this work, different strategies for the diagnosis of contagious epididymitis in a flock, which this disease has been apparently controlled, were compared. Twenty-two rams were clinically examined and serum samples were analyzed by different serological tests. Semen samples were cultured in bacteriological media and were evaluated by multiplex PCR. Rams with a positive culture were necropsied and testes, epididymis, vesicular glands and ampullae were taken and studied by histopathology. B. ovis shedding in semen was significantly associated with the seropositivity and genital tract histopathological lesions. Multiplex PCR showed a similar sensitivity to semen culture and could be used as a complementary test for the direct diagnosis of B. ovis. Although this study involved a low number of animals, it provides useful information for the diagnosis of ovine brucellosis in an endemic flock and reinforces the need for biannual control.Fil: Fiorentino, M.A. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria (EEA) Balcarce. Departamento de Producción Animal. Laboratorio de Bacteriología. Buenos Aires, ArgentinaFil: Velilla, A. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria (EEA) Balcarce. Departamento de Producción Animal. Laboratorio de Bacteriología. Buenos Aires, ArgentinaFil: Manes, J. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria (EEA) Balcarce. Departamento de Producción Animal. Biotecnología de la Reproducción. Buenos Aires, ArgentinaFil: Díaz, A.G. CONICET-CIC. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil (CIVETAN). Departamento SAMP. Laboratorio de Inmunología. Buenos Aires, ArgentinaFil: Díaz, A.G. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Buenos Aires, ArgentinaFil: Clausse, M. CONICET-CIC. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil (CIVETAN). Departamento SAMP. Laboratorio de Inmunología. Buenos Aires, ArgentinaFil: Clausse, M. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Buenos Aires, ArgentinaFil: Paolicchi, F.A. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria (EEA) Balcarce. Departamento de Producción Animal. Laboratorio de Bacteriología. Buenos Aires, ArgentinaFil: Estein, S.M. CONICET-CIC. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil (CIVETAN). Departamento SAMP. Laboratorio de Inmunología. Buenos Aires, ArgentinaFil: Estein, S.M. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Buenos Aires, ArgentinaBrucella ovis es el agente etiológico de la epididimitis contagiosa del carnero. El diagnóstico se basa en el examen clínico, la serología y en el aislamiento de B. ovis a partir de semen. El análisis del semen mediante PCR complementa el diagnóstico directo para la detección de B. ovis y de otros patógenos reproductivos de los ovinos. En este trabajo se comparan diferentes estrategias para el diagnóstico de la epididimitis contagiosa del carnero. Veintidós carneros fueron examinados clínicamente. Las muestras de suero fueron analizadas con diferentes pruebas serológicas. Las muestras de semen se cultivaron y evaluaron mediante PCR multiplex. Los carneros con cultivo positivo fueron sacrificados y se tomaron muestras de testículos, epididídimos, vesículas seminales y ampollas del conducto deferente para el estudio histopatológico. La presencia de B. ovis en semen se asoció significativamente con la seropositividad y con lesiones histopatológicas en los órganos estudiados. La multiplex PCR mostró una sensibilidad similar al cultivo de semen por lo cual podría ser usada para el diagnóstico directo de B. ovis. Aunque este estudio fue realizado en pocos animales, este provee información útil para el diagnóstico de la brucelosis ovina en una majada endémica y refuerza la necesidad de dos controles por año

Pesquisa de anticorpos anti-Brucella abortus e anti-Brucella ovis em ovinos no município de Uberlândia, MG

The first epidemiologic inquiry to Brucella abortus (B. abortus) and Brucella ovis (B. ovis) was carried out in sheep from Uberlândia county, MG. A total of 334 blood serum samples of sheep from both sexes and different ages and breeds were collected in 12 farms. An epidemiologic questionnaire was applied for each farm. Tests for B. abortus and B. ovis antibodies were Buffered Acidified Antigen and Complement Fixation, respectively. None of the sheep was reactive to B. abortus and B. ovis; however, the adoption of sanitary measures is important to avoid the introduction of infections caused by these bacteria

Rapid serum agglutination and agar gel immunodiffusion tests associated to clinical signs in rams experimentally infected with Brucella ovis Teste de soro aglutinação rápida e do teste de imunodifusão em gel de ágar associados aos sinais clínicos em carneiros infectados experimentalmente com Brucella ovis

The purpose of this study was to evaluate the agar gel immunodiffusion and the rapid serum agglutination tests associated to clinical signs in rams experimentally infected with Brucella ovis. The serological profile during the 12 months of infection showed a large fluctuation of antibodies that favors the failure in the diagnostic. The evaluation of tests after the experimental infection allowed to suggest that none of the tests were able to detect the infection throughout the period of study. The study reinforces the importance of considering the clinical signs to support the diagnosis of Brucella ovis infection in rams.<br>O objetivo deste estudo foi avaliar o uso do teste de imunodifusão em gel de ágar e o teste sorológico de aglutinação rápida comparados aos sinais clínicos em carneiros infectados experimentalmente com Brucella ovis para o diagnóstico confirmatório da brucelose ovina. O perfil sorológico durante os 12 meses pós-infecção mostrou flutuação da resposta por anticorpos, que favorece a falha no diagnóstico. A avaliação dos testes indicou que nenhum dos testes foi capaz de detectar a infecção durante todo o período de estudo. O estudo ressalta a importância de considerar os sinais clínicos para apoiar o diagnóstico confirmatório da infecção por Brucella ovis em carneiros