Solid-phase extraction of nitro-PAH from aquatic samples and its separation by reverse-phase capillary liquid chromatography

In this work, an analytical methodology to extract 1-nitronaphthalene, 2-nitrofluorene, 9-nitroanthracene, 3-nitrofluoranthene, and 1-nitropyrene aquatic samples is proposed. Capillary liquid chromatography with on-column UV detection (µLC-UV) was employed to separate and quantitate all five nitrated polycyclic aromatic hydrocarbons (nitro-PAH) extracted from water samples. Two different extraction techniques were tested and compared: liquid-liquid extraction (LLE) and solid phase extraction (SPE) with two different sorbents, octadecylsilica (C18) and styrene divinylbenzene (XAD-2) particles. The elution of analytes was tested with both acetonitrile and methylene chloride. The best recovery results were obtained for SPE-C18 extraction with the methylene chloride with values ranging from 76 to 97% with RSD values smaller than 4%. The chromatographic conditions for analysis was carried out using a 250 × 0.3 mm i.d. packed capillary column with 5 µm C18 particles. The elution was isocratic with 65% acetonitrile in water (v/v) as mobile phase with a flow rate of 7 µL min-1. The detection limits due to on-column UV detection (ranging ~3-30 mmol L-1) are limiting for environmental applications, however, they are suited for toxicological studies

Homemade Capillary Electrophoresis Coupled to a Mass Spectrometer

A system was developed in our laboratory to couple capillary electrophoresis with mass spectrometry. the capillary electrophoresis system was equipped with a high voltage supply, and a microcontroller with assembly language programming was developed for the computational control of the system. the MS system was a commercial Thermo Finningan LCQ ion trap mass spectrometer. the robustness of the coupled system was evaluated using standard protein samples (lysozyme, aprotinin, and bovine albumin) and tryptic digests of lysozyme. the system showed positive results in terms of robustness, allowing for the separation of digested proteins and the identification of 33% of the total amino acids in a protein (6 of the 18 expected peptides). the limit of detection was in the order of 1 picomole (signal-to-noise ratio), which was considered satisfactory for this system. the system shows high versatility in tandem coupling and combinations with other analytical procedures.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Universidade Federal de São Paulo, Inst Ciencias Ambientais Quim & Farmaceut, Dept Ciencias Exatas & Terra Diadema, São Paulo, BrazilUniv São Paulo, Inst Quim Sao Carlos, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Inst Ciencias Ambientais Quim & Farmaceut, Dept Ciencias Exatas & Terra Diadema, São Paulo, BrazilWeb of Scienc

Development of nanoinjector devices for electrospray ionization - tandem mass spectrometry (ESI-MSn)

In mass spectrometric (MS) systems with electrospray ionization (ESI), the sample can be analyzed coupled to separation systems (such as liquid chromatography or capillary electrophoresis) or simply by direct infusion. The greatest benefit of the type of injection is the possibility of continuous use of small amounts of samples over a long period of time. This extended analysis time allows a complete study of fragmentation by mass spectrometry, which is critical for structure elucidation of new compounds, or when using an ion trap mass analyzer. The injector filled with the sample is placed at the ESI source inlet creating an electric field suitable for the continuous formation of a spray (solvent and sample) and consequently, the gradual and even release of the sample. For the formation of the spray, is necessary that the injector end is metalized. The formation of a bilayer of titanium and gold provided an excellent attachment of the film, resulting in a nanoinjector for ionization/spray formation in the system for MS. The nanoinjectors showed high repeatability and stability over 100 min by continuous sampling with 10 µL of sample.Em espectrometria de massas (MS) no modo de ionização eletrospray (ESI), as amostras podem ser analisadas com um método prévio de separação (cromatografia líquida ou eletroforese capilar) ou por infusão direta da amostra. A injeção direta apresenta um grande benefício que é a redução do volume de amostra consumido e a possibilidade de amostragem contínua por um período estendido. Este maior tempo de amostragem possibilita a análise completa através de fragmentações sucessivas por espectrometria de massas, crítico quando se busca elucidação estrutural de novos compostos, ou quando se dispõe de um analisador de massas do tipo captura de íons. Neste trabalho, descrevemos uma metodologia de deposição de filme estável na extremidade cônica dos dispositivos de boro-silicato, visando o desenvolvimento de nanoinjetores estáticos. A formação de uma camada dupla de titânio e ouro proporcionou uma excelente fixação do filme, resultando em um nanoinjetor para amostragem por ionização/formação do aerossol no sistema de espectrometria de massas. O objetivo deste filme é manter o contato elétrico no sistema. Os nanoinjetores apresentaram repetibilidade e estabilidade elevadas por mais de 100 min de amostragem contínua com apenas 10 µL de amostra.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de Ciências Exatas e da TerraUniversidade de São Paulo Instituto de Ciências BiomédicasUniversidade de São Paulo Instituto de Química de São CarlosUNIFESP, Depto. de Ciências Exatas e da TerraSciEL

Direct determination of plant-growth related metabolites by capillary electrophoresis with spectrophotometric UV detection

The detection of plant hormones and growth regulators is of great interest for many biological studies especially in the determination of metabolites related to plan growth and differentiation. In this work, we propose a simple method based on capillary electrophoresis (CE) for the separation of different classes of plant growth regulators such as auxins, cytokinins, gibberelic acid and abscisic acid. CE with UV detection was used and the analytical conditions were as follows: phosphate buffer 25 mmol L-1, for all the measurements and the separation conditions pH 12 or 2.5, by hydrodynamic injection 5 s at 10 cm and separation voltage of 22 kV. The absorbance detection was fixed at either 220 nm or 270 nm depending on a given phytohormone class. Under these conditions, phytohormones (Indole-3-acetic acid (IAA), Gibberellic acid (GA3), Abscisic acid (ABA), picloram, zeatin and 6-Benzylaminopurine (BAP) were separated in approximately 3 to 5 min. The plant material used to verify the possibility of detection of hormone/plant growth regulators was citro (Citrus sinensis L. Osbeck) callus in the multiplication stage. In the plant tissue sample, zeatin was successfully detected. The results confirmed the potential use of CE as an efficient alternative and simple method to the classical procedures used for phytohormone detection in plant tissues.A detecção de hormônios e reguladores de crescimento em plantas é de grande interesse em uma enorme variedade de estudos biológicos. Visando este propósito nós desenvolvemos um método simples baseado em eletroforese capilar (CE) para a separação de diferentes classes de reguladores de crescimento de plantas como as auxinas, citocinina, ácidos giberélico e abscíssico. Foi utilizada CE, com detecção na região de UV; as condições de separação foram: fosfato de potássio como tampão, em concentração de 25 mmol L-1, pH 12 ou 2,5, tempo de injeção 5 s, elevando por sinfonamento o capilar, à altura de 10 cm e voltagem de separação de 22 kV. A absorbância foi fixada a 220 nm ou 270 nm, dependendo da classe do fitohormônio. Nestas condições os fitohormônios (IAA, GA3, ABA, picloram, zeatina e BAP) foram separados em um tempo de 3 a 5 min. O material oriundo de planta para verificar a possibilidade de detecção de hormônio/reguladores de crescimento de plantas foi a citro (Citrus sinensis L. Osbeck) callus no estágio de multiplicação. Na amostra de tecido de planta, a zeatina foi detectada com sucesso. Os resultados confirmaram a pontencialidade do uso de CE como um método eficiente, de baixo custo e alternativo para a detecção dessa classe de compostos em tecidos de plantas.FAPESPCNP

Evaluation of capillaries with different inner coatings for DNA analysis using dilute polymer solutions by capillary electrophoresis

In this work three capillary columns, one with uncoated inner wall and two with covalently-bound internal coatings - poly(vinyl alcohol) (PVA) and poly(dimethylacrylamide) (PDMA) - both covalently covered - were used to separate DNA fragments and compared to DNA separation using replaceable polymer solutions. The separations were performed using hydroxyethylcellulose (HEC) (90-105 kDa) in concentrations ranging from 0.00 to 2.00% m/v. The results indicated that the separation efficiency was higher in the PVA capillary than in the PDMA in all evaluated concentrations of HEC. In addition, higher resolution was also observed in PVA-coated capillary since in PDMA the shape of the peaks was not reproducible when subsequent runs were performed. Contrary to what has previously been reported in the literature, no reasonable separation was possible in bare fused silica.No presente trabalho, três colunas capilares, uma sem recobrimento interno e duas com recobrimentos internos diferentes foram utilizadas na separação de fragmentos de DNA: poli(vinil álcool) (PVA) e poli(dimetilacrilamida) (PDMA) - ambos de recobrimento covalente - foram comparados para a separação de DNA utilizando soluções poliméricas. As separações foram realizadas usando hidroxietilcelulose (HEC) (90-105 kDa) nas concentrações entre 0,00 e 2,00% m/v. Os resultados indicaram que a eficiência de separação foi maior no capilar de PVA do que no de PDMA, em todas as concentrações de HEC testadas. Ainda, uma resolução superior também foi observada com o capilar de PVA, já que com o capilar de PDMA o formato dos picos não se mostrou reprodutível quando corridas subseqüentes foram realizadas. Contrariamente ao relatado na literatura, nenhuma separação foi conseguida com o capilar sem revestimento interno

Evaluation of a simple hyphenated system for flow injection solid-phase pre-concentration and capillary electrophoresis

In this work, the development and evaluation of a hyphenated flow injection-capillary electrophoresis system with on-line pre-concentration is described. Preliminary tests were performed to investigate the influence of flow rates over the analytical signals. Results revealed losses in terms of sensitivity of the FIA-CE system when compared to the conventional CE system. To overcome signal decrease and to make the system more efficient, a lower flow rate was set and an anionic resin column was added to the flow manifold in order to pre-concentrate the analyte. The pre-concentration FIA-CE system presented a sensitivity improvement of about 660% and there was only a small increase of 8% in total peak dispersion. These results have confirmed the great potential of the proposed system for many analytical tasks especially for low concentration samples.Nesse trabalho apresentamos um sistema hifenizado envolvendo as duas técnicas analíticas: eletroforese capilar (CE) e análises por injeção em fluxo (FIA), denominado de FIA-CE. Parâmetros como a influência do fluxo e a natureza do eluente frente ao sistema CE foram avaliados. O sistema demonstrou-se promissor quanto à possibilidade de aplicações em diferentes áreas da química analítica. O aumento da sensibilidade foi da ordem de 660% devido ao emprego de colunas de troca iônica no sistema FIA. Esse resultado comprova o grande potencial do sistema FIA-CE.Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nivel Superior (CAPES)CNPqFAPES

A representação das deputadas parlamentares na imprensa

Conferência final do projeto "Política no Feminino: Políticas de género e estratégias de visibilidade das deputadas parlamentares". Trata-se de um projeto de investigação de âmbito académico, financiado pela FCT, integrando uma equipa multidisciplinar e internacional com o objetivo de sistematizar a representatividade e o perfil das mulheres na Assembleia da República a partir de 1975 até à atualidade. Outro dos objetivos consistiu em analisar a presença das parlamentares nos media e compreender as respectivas estratégias de visibilidade no espaço público através da mediação dos jornalistas. A conferência reuniu especialistas nas diversas áreas incluídas na investigação, nomeadamente estudos dos media e do jornalismo, ciência política e sociologia da comunicação, bem como jornalistas, deputados, investigadores, docentes e estudantes destas áreas

Development of nanoinjector devices for electrospray ionization - tandem mass spectrometry (ESI-MSn)

In mass spectrometric (MS) systems with electrospray ionization (ESI), the sample can be analyzed coupled to separation systems (such as liquid chromatography or capillary electrophoresis) or simply by direct infusion. The greatest benefit of the type of injection is the possibility of continuous use of small amounts of samples over a long period of time. This extended analysis time allows a complete study of fragmentation by mass spectrometry, which is critical for structure elucidation of new compounds, or when using an ion trap mass analyzer. The injector filled with the sample is placed at the ESI source inlet creating an electric field suitable for the continuous formation of a spray (solvent and sample) and consequently, the gradual and even release of the sample. For the formation of the spray, is necessary that the injector end is metalized. The formation of a bilayer of titanium and gold provided an excellent attachment of the film, resulting in a nanoinjector for ionization/spray formation in the system for MS. The nanoinjectors showed high repeatability and stability over 100 min by continuous sampling with 10 µL of sample