Evaluacion del estado oxidativo de la LDL in Vitro.

68 p.Hoy en día, se sabe que modificaciones en la estructura de las lipoproteínas aumentan su potencial aterogénico. Estas modificaciones se pueden generar a raíz de alteraciones en los procesos biológicos o también en forma experimental por incubación de la solución de lipoproteína con iones metálicos. Una de estas modificaciones, es la oxidación de LDL (lipoproteína de baja densidad) en la cual ésta puede sufrir numerosos cambios por peroxidación de los ácidos grasos poliinsaturados y degradación de la ApoB (apoproteína B). La LDL oxidada, tiene gran afinidad por receptores scavenger de los macrófagos atribuyéndose a este hecho un alto poder aterogénico. En el presente trabajo se evaluó el estado oxidativo de la LDL humana in vitro, el efecto del cobre como oxidante y el efecto protector de la vitamina C como antioxidante, a partir de un grupo de donantes sanos normolipémicos y normoglicémicos, de los cuales se obtuvo una muestra de sangre, utilizando EDTA 1mg/mL como anticoagulante y a partir de ella se obtuvo la LDL por ultracenrifugación diferencial, la que se oxidó en presencia de Sulfato de cobre 5uM. Como productos de oxidación se midieron los dienos conjugados, TBARS y movilidad electroforética, usando como control una LDL nativa

Genotipificacion de la Apolipoproteina E y complicaciones diabeticas.

113 p.Las dislipidemias, son estados fisiopatológicos , en los que se encuentra una elevación de los niveles plasmáticos de lípidos, como consecuencia de las anomalías de tipo cualitativas y/o cuantitativas de las lipoproteínas. En diabéticos, existe una prevalencia entre un 20 a un 80% de dislipidemias (49). Existen numerosos estudios sobre dislipidemias en diabéticos, los cuales atribuyen su causa a factores metabólicos, ambientales y genéticos entre los que se incluyen el polimorfismo de la apolipoproteína E. El presente trabajo, tiene por objetivo principal realizar la genotipificación de la apolipoproteina E sobre una población diabética de la VII región, con el fin de establecer una relación entre genotipo y complicaciones diabéticas (Dislipidemias). La población diabética en estudio, fue determinada según clasificación de la OMS (1985), para esto se tomaron al azar 44 pacientes de la VII región. Los criterios de selección utilizados fueron la medición de glicemia basal y perfil lipídico. Además, con la muestra de sangre total de los pacientes seleccionados al azar, se realizó la genotipificación de la apolipoproteína E mediante la técnica de PCR y digestión del DNA amplificado con la enzima de restricción CfoI y posterior análisis de los fragmentos de restricción de alto polimorfismo, en gel de poliacrilamida. La estandarización de estas técnicas, permitió la genotipificación de la Apo E de los pacientes diabéticos. En el presente estudio se pudo establecer que el genotipo de mayor frecuencia en los pacientes diabéticos de la VII región es el genotipo E 3/3, independiente de la dislipidemia, seguido del E 3/4. Los resultados no permiten concluir que la dislipidemia presente en estos pacientes diabéticos, se correlacione con el polimorfismo genético de la Apo E. Se determinó que la frecuencia de pacientes diabéticos tipo 2 dislipidémicos de la VII región, es mayor respecto a los normolipidémicos de igual patología y origen. En este contexto se encontraron diferencias estadísticamente significativas en los valores de Colesterol total, LDL colesterol y HDL colesterol entre estos pacientes. Por último, se determinó que la Hipercolesterolemia es la mayor causa de dislipidemia en pacientes diabéticos de la VII región, seguido de dislipidemia mixta e hipertrigliceridemia

Efecto de antioxidantes derivados de productos naturales, sobre la modificacion oxidativa in vitro, de lipoproteinas de baja densidad (LDL)

77 p.El presente trabajo tuvo por objetivo principal, evaluar el efecto antioxidante de compuestos aislados de Cymbopogon citratus, sobre lipoproteínas plasmáticas (LDL). Se usó como referente la vitamina C por su reconocida actividad antioxidante. Para ello se oxidó in vitro LDL-plasmáticas con CuSO4, en presencia y ausencia de antioxidantes. Se evalúo la oxidación de LDL, por medio de: medición del tiempo lag, máxima producción de dienos conjugados, TBARS y movilidad electroforética. Material y métodos: Se utilizaron tres compuestos antioxidantes aislados de C. citratus: isoorientina, swertiajaponina e isoorientina 2-O-ramnósido. Para el aislamiento de la LDL humana, se usó plasma fresco, a partir de sangre colectada con EDTA 1 mg/ml, según el protocolo de Galle y Wanner (1998). 132. El contenido proteico de la LDL se cuantificó usando el método de Lowry.135 En la oxidación se usó 35 µg de proteína la que se mezcló con CuSO4 a una concentración final de 10 µM y se incubó a 25ºC durante 6 horas. Para la evaluación de la oxidación de LDL in vitro en ausencia y presencia de los antioxidantes se midió el tiempo lag, la formación de dienos conjugados, contenido de malondialdehido (MDA) medido como TBARS y la migración electroforética de ella. Resultados: Al comparar el tiempo lag de cada uno de los compuestos en estudio, se observó diferencias estadisticamente significativas entre ellos y los controles (p swertiajaponina>isoorientina 2-O-ramnósido. En cuanto a la movilidad electroforética se pudo evidenciar que a medida que transcurre el proceso de oxidación la LDL cambia su patrón de migración, debido a la perdida de las cargas positivas de la lisina presentes en la apoB, proceso que se vió revertido, en presencia de los antioxidantes ensayados

Marcadores de estrés oxidativo en ratas wistar con esteatosis hepática

61 p.La esteatohepatitis no alcohólica (EHNA) corresponde a una enfermedad que puede ser causada por la obesidad, diabetes mellitus e hiperlipemia, se genera una infiltración grasa en las células hepáticas debido a una alimentación desbalanceada principalmente por lípidos en ausencia del consumo de alcohol. Esta enfermedad ha ido aumentando su prevalencia a nivel mundial los últimos años, considerándose como una situación médica reconocida que generalmente es benigna, la cual en casos extremos evoluciona a cirrosis o hepatocarcinoma. La EHNA no posee un tratamiento específico debido a la ausencia de marcadores determinados que reflejen la enfermedad, sin embargo cuando evoluciona a cirrosis se requiere un tratamiento idéntico al utilizado en hepatopatías crónicas. En el presente estudio, se evaluó el efecto antioxidante de la vitamina C en ratas Wistar macho que desarrollaron EHNA experimental a través de un modelo en base a una dieta donde la energía aportada por las grasas fue de un 70%, tomando como referencia la dieta planteada por Lieber et al. Para evaluar el efecto de la vitamina C sobre el estrés oxidativo causado a las ratas con EHNA, se midieron parámetros bioquímicos tales como colesterol, triglicéridos, enzimas hepáticas, además de utilizar la biopsia hepática como método “gold standar” para diagnosticar la enfermedad. Los resultados obtenidos permitieron evidenciar el daño hepático causado por la dieta rica en grasas, a través los niveles de transaminasas en suero y TBARS (Thiobarbituric Acid Reactives Subtancies) en suero como una forma de medir el MDA (malondialdehído) un producto de la oxidación de ácidos grasos. Finalmente, se puede decir que el efecto de la vitamina C en este estudio no fue el esperado porque la vitamina C actuó mas bien regenerando la forma oxidada de la vitamina E. De acuerdo a la bibliografía, se sugiere mezclarlo con vitamina E y así aportar con datos sobre el uso de antioxidantes en la fisiopatología de la EHNA

Poliformismo genetico de la apolipoproteina E en pacientes con nefropatia diabetica.

69 p.Alrededor de un 20 - 40% de los pacientes diabéticos presentan nefropatía, complicación crónica de la diabetes que constituye una de las principales causas de morbilidad y mortalidad prematura en diabéticos tipo 2. Varios factores de riesgo han sido identificados en el desarrollo de esta complicación, incluyendo una influencia genética. El polimorfismo genético de la apolipoproteína E ha sido estudiado por distintos investigadores como un factor asociado al desarrollo de esta complicación. Por otro lado, las alteraciones lipídicas también han sido propuestas como factor de riesgo en el desarrollo y progresión de nefropatía diabética, ya que existen varios aspectos en común entre el desarrollo de nefropatía y aterosclerosis. El polimorfismo de la apo E, tiene conocida influencia sobre los niveles de lípidos plasmáticos (la isoforma apo E2 se asocia con hipertrigliceridemia, mientras que la isoforma apo E4 se asocia con hipercolesterolemia), por lo que se ha planteado que las alteraciones lipidicas, asociadas a la apolipoproteína E, podrían tener un papel importante en el desarrollo de nefropatía diabética. En el presente trabajo se estudio el polimorfismo de la apolipoproteína E en 57 pacientes diabéticos tipo 2 de la séptima región, agrupados en pacientes que presentan complicaciones renales (n=28) y pacientes que no presentan complicaciones renales(n=29). Posteriormente, se estudio la relación entre los distintos alelos apo E y los niveles lipídicos, en pacientes con y sin complicaciones renales. Los resultados muestran que los pacientes sin complicaciones renales presentan una frecuencia significativamente mayor del alelo e4. Sin embargo, no se encontraron diferencias significativas en los niveles de lípidos plasmáticos entre los distintos grupos estudiados, excepto en los niveles de colesterol HDL. Los resultados obtenidos sugieren un papel protector del alelo e4 en el desarrollo y progresión de nefropatía diabética. En este estudio, las alteraciones lipidicas no constituyen un factor de riesgo de nefropatía, por lo que el mecanismo propuesto por el cual el alelo e4 tendría un efecto protector sobre el desarrollo de esta complicación, podría estar asociado a otras funciones atribuidas a esta apolipoproteína

Genotipificacion de apolipoproteina E en pacientes diabeticos tipo II de la VII region

72 p.Se han llevado a cabo múltiples estudios referentes a las apolipoproteínas como marcador de riesgo y enfermedad cardiovascular, estableciéndose así frecuencias geno y genotípicas en diferentes poblaciones sanas o enfermas. Un importante avance en estos estudios ha sido la introducción de técnicas de Biología Molecular. El trabajo que se muestra a continuación, tuvo por objetivo principal caracterizar genotipicamente a un grupo de pacientes diabéticos tipo II de la VII región, según clasificación OMS (1985), que presentaban algún tipo de Dislipidemia. El criterio de selección utilizado fue la medición de glicemia basal y perfil lipidico. Posteriormente, con una muestra de sangre total de cada uno de ellos se hizo genotipificación de apolipoproteína E mediante la técnica de PCR y digestión del DNA amplificado con enzima de restricción Hhal o Cfol y posterior análisis de los fragmentos de restricción de alto polimorfismo (RFLP), en geles de poliacrilamida. El poder estandarizar estas técnicas permitió genotipificar a los dos grupos en estudio y conocer la frecuencia de alelos e2, e3 y e4 en ambos grupos. En el presente estudio se pudo establecer que, no hay diferencias estadísticamente significativas entre ambos grupos y que hay un gran predominio del genotipo E3/3 en las muestras estudiadas y que existe una hipertrigliceridemia asociada al alelo e2 y una hipercolesterolemia asociada al alelo e4. Por otro lado se comparo el genotipo de los pacientes diabéticos de la VII región con el fenotipo de poblaciones: europeas, chinas, japonesas y americaindios a través de pruebas de Chi2, encontrándose diferencias significativas entre los diabéticos de la VII región y la población europea

Marcadores de estres oxidativo en pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva cronica

85 p.La Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica (EPOC) se define actualmente como una patología prevenible y tratable, caracterizada por una limitación progresiva al flujo aéreo, no completamente reversible, y por presentar efectos extra-pulmonares que contribuyen a su gravedad, a través de una respuesta inflamatoria anormal pulmonar. Esta inflamación se observa en respuesta a partículas o gases nocivos (principalmente el tabaco) y da lugar a un fenómeno inflamatorio generalizado, por lo tanto la EPOC es una enfermedad con compromiso sistémico que afecta, entre otros órganos, a la musculatura periférica. Además de la inflamación, del desbalance de proteinasas y antiproteinasas, hay evidencias de que en la patogenia de la EPOC es importante el estrés oxidativo, el cual estaría amplificando la respuesta inflamatoria sistémica que se observa en esta enfermedad. Recientemente, se ha demostrado que el estrés oxidativo y el estatus redox intracelular puede regular modificaciones de histonas nucleares tales como acetilaciones, metilaciones, y fosforilaciones que producen un remodelamiento de la cromatina y un reclutamiento de factores de transcripción basal que lleva a la inducción de mediadores proinflamatorios. La metodología empleada para la realización de esta revisión es la búsqueda de información actualizada en revistas de base de datos (ISI) vía Pubmed, SciELO y capítulos de libros que traten el tema a abordar

Sistema Contable de la Empresa Agrícola Las Lajas Mierisch S.A del municipio de Matagalpa, Departamento de Matagalpa en el I semestre del año 2015.

La presente investigación tiene como temática Sistema Contable de la Empresa Agrícola Las Lajas Mierisch S.A del municipio de Matagalpa, departamento de Matagalpa en el I semestre del año 2015. El propósito es evaluar el Sistema Contable de la empresa agrícola, identificando cada uno de los elementos que son necesarios de acuerdo a la naturaleza y giro de la entidad. Los Sistemas Contables son importantes para el sector agropecuario pues permite definir los procesos para la contabilización de los costos para que la entidad pueda realizar diferentes análisis financieros de las operaciones realizadas. Al finalizar la investigación se llegó a las principales conclusiones que al Sistema de Las Lajas Mierisch S.A falta implementar la Guía Contabilizadora, Manual de Procedimientos, de Organización y Funciones y Control Interno qué harán más eficiente y eficaz el registro y manejo de las diferentes operaciones que integran la actividad económica que ejercen. La elaboración de dichos instrumentos es nuestra recomendación más importante para fortalecer el desarrollo de las tareas que se practican durante el proceso productivo del café

Evaluación del estado oxidativo en individuos prediabéticos

49 p.Las enfermedades cardiovasculares y la diabetes son dos patologías que se han constituido como las causas más importantes de morbilidad y mortalidad en países desarrollados. Debido a esto, la caracterización epidemiológica y estudios de la población local adquieren importancia. En condiciones normales, los niveles de glucosa plasmática suelen permanecer estables, en cambio en personas pre-diabéticas y principalmente diabéticas, la producción de insulina baja, por lo que la glucosa no ingresa en las células y su concentración permanecerá elevada en la sangre, provocado un aumento de las especies reactivas del oxígeno (ROS) y la capacidad de detoxificar dichas sustancias y prevenir el daño tisular, generando lo que se conoce como estrés oxidativo. El Glutatión reducido (GSH), junto a vitaminas y enzimas como la catalasa, peroxidasa y superóxido dismutasa representan una barrera importante en la mantención del equilibrio oxidativo en el organismo. El objetivo de este estudio fue evaluar el estado de oxidación de pacientes con glicemia alterada de ayuno, reflejados en la concentración de GSH y TBARS, y relacionarlo con el estado de alteración de la glucosa plasmática. Obteniéndose correlaciones negativas significativas entre los niveles de GSH y TBARS (p>0,01), la glicemia y GSH (p>0,01), TBARS y la edad de los pacientes (p>0,05), y una correlación positiva estadísticamente significativa entre la concentración de glucosa y TBARS (p>0,01), además de una asociación significativa entre el sexo y la concentración de TBARS (p>0,01), en donde los hombres mostraron niveles más elevados de TBARS

Sustancias reactivas al acido tiobarbiturico "TBARS" como marcador de riesgo de estres oxidativo

45 p.En la actualidad, es muy conocido el rol de patologías como el Síndrome Metabólico y la Diabetes Mellitus en las modificaciones de la pared endotelial, que serán la base para la aparición de Enfermedades Cardiovasculares. Uno de los elementos comúnmente asociados a estas patologías es el estrés oxidativo. El estrés oxidativo, es decir, el desbalance entre las sustancias antioxidantes y las prooxidantes a favor de estas últimas, se presenta como uno de los mayores factores de riesgo de Enfermedad Cardiovascular. Su mecanismo de daño es múltiple, al igual que sus blancos de ataque. Uno de estos blancos son los ácidos grasos poliinsaturados, en un proceso denominado peroxidación lípidica, proceso que derivara finalmente en la destrucción celular. En el presente trabajo se midieron los niveles de TBARS como marcador de peroxidación lípidica, y por ende de estrés oxidativo, en un grupo de pacientes diagnosticados con Síndrome Metabólico pertenecientes al Programa de Investigación de Factores de Riesgo de Enfermedad Cardiovascular PIFRECV, con el fin de evaluar el estado oxidativo de dichos pacientes y compararlo con los niveles de TBARS presentados por pacientes controles sanos