Praktijkervaringen met waterberging en natuur in een beekdal : achtergrondrapport : Beerze

Hoofddoel van het pilotprogramma is waterbeheerders, terreinbeherende instanties en provincies te ondersteunen in hun activiteiten een koppeling tot stand te brengen tussen waterberging en - buffering en natuurbehoud en -ontwikkeling. Eén van de geselecteerde pilots uit het pilotprogramma ligt langs de Beerze. De Beerze is representatief voor de huidige situatie in veel Brabantse beekdalen: er is sprake van een waterkwantiteitsprobleem, en (tijdelijke) berging van het beekwater in natuurgebieden stuit op problemen, vooral vanwege de (eutrofe) waterkwaliteit. Tegelijkertijd speelt verdroging van natuurgebieden een rol. De pilot Beerze ligt in het traject Logtse Baan - Logtse Velden - Smalbroeken. De onderzoeksperiode van deze pilot besloeg 2004 tot medio 200

Differential effects of human and plant N-acetylglucosaminyltransferase I (GnTI) in plants

In plants and animals, the first step in complex type N-glycan formation on glycoproteins is catalyzed by N-acetylglucosaminyltransferase I (GnTI). We show that the cgl1-1 mutant of Arabidopsis, which lacks GnTI activity, is fully complemented by YFP-labeled plant AtGnTI, but only partially complemented by YFP-labeled human HuGnTI and that this is due to post-transcriptional events. In contrast to AtGnTI-YFP, only low levels of HuGnTI-YFP protein was detected in transgenic plants. In protoplast co-transfection experiments all GnTI-YFP fusion proteins co-localized with a Golgi marker protein, but only limited co-localization of AtGnTI and HuGnTI in the same plant protoplast. The partial alternative targeting of HuGnTI in plant protoplasts was alleviated by exchanging the membrane-anchor domain with that of AtGnTI, but in stably transformed cgl1-1 plants this chimeric GnTI still did not lead to full complementation of the cgl1-1 phenotype. Combined, the results indicate that activity of HuGnTI in plants is limited by a combination of reduced protein stability, alternative protein targeting and possibly to some extend to lower enzymatic performance of the catalytic domain in the plant biochemical environment

Praktijkervaringen met waterberging in natuur(ontwikkelings)gebieden : hoofdrapport pilotprogramma waterberging en natuur

In 2002 is het “Pilotprogramma Waterberging-Natuur”gestart. Het hoofddoel van het pilotprogramma was waterbeheerders, terreinbeherende instanties en provincies te ondersteunen in het koppelen van de functies waterberging en natuur. Daarbij is het pilotprogramma primair gericht geweest op het opdoen en verspreiden van ervaringskennis. Dit rapport geeft een overzicht van de belangrijkste resultaten van het pilotprogramma waterberging-natuur. Naast dit hoofdrapport is er per pilot een achtergrondrapport beschikbaar waar in meer detail wordt ingegaan op aanpak van de monitoring en de resultaten. Een samenwerking tussen vele partijen: WUR, Deltares, Natuurmonumenten, Staatsbosbeheer, RU Groningen, Twentse Vogelwerkgroep, waterschappen, Rijkswaterstaat en LNV (Natuur, Kennis

Characterization of the single-chain Fv-Fc antibody MBP10 produced in Arabidopsis alg3 mutant seeds

ER resident glycoproteins, including ectopically expressed recombinant glycoproteins, carry so-called high-mannose type N-glycans, which can be at different stages of processing. The presence of heterogeneous high-mannose type glycans on ER-retained therapeutic proteins is undesirable for specific therapeutic applications. Previously, we described an Arabidopsis alg3-2 glycosylation mutant in which aberrant Man5GlcNAc2 mannose type N-glycans are transferred to proteins. Here we show that the alg3-2 mutation reduces the N-glycan heterogeneity on ER resident glycoproteins in seeds. We compared the properties of a scFv-Fc, with a KDEL ER retention tag (MBP10) that was expressed in seeds of wild type and alg3-2 plants. N-glycans on these antibodies from mutant seeds were predominantly of the intermediate Man5GlcNAc2 compared to Man8GlcNAc2 and Man7GlcNAc2 isoforms on MBP10 from wild-type seeds. The presence of aberrant N-glycans on MBP10 did not seem to affectMBP10 dimerisation nor binding of MBP10 to its antigen. In alg3-2 the fraction of underglycosylated MBP10 protein forms was higher than in wild type. Interestingly, the expression of MBP10 resulted also in underglycosylation of other, endogenous glycoproteins

Characterization of the single-chain Fv-Fc antibody MBP10 produced in Arabidopsis alg3 mutant seeds

ER resident glycoproteins, including ectopically expressed recombinant glycoproteins, carry so-called high-mannose type N-glycans, which can be at different stages of processing. The presence of heterogeneous high-mannose type glycans on ER-retained therapeutic proteins is undesirable for specific therapeutic applications. Previously, we described an Arabidopsis alg3-2 glycosylation mutant in which aberrant Man5GlcNAc2 mannose type N-glycans are transferred to proteins. Here we show that the alg3-2 mutation reduces the N-glycan heterogeneity on ER resident glycoproteins in seeds. We compared the properties of a scFv-Fc, with a KDEL ER retention tag (MBP10) that was expressed in seeds of wild type and alg3-2 plants. N-glycans on these antibodies from mutant seeds were predominantly of the intermediate Man5GlcNAc2 compared to Man8GlcNAc2 and Man7GlcNAc2 isoforms on MBP10 from wild-type seeds. The presence of aberrant N-glycans on MBP10 did not seem to affectMBP10 dimerisation nor binding of MBP10 to its antigen. In alg3-2 the fraction of underglycosylated MBP10 protein forms was higher than in wild type. Interestingly, the expression of MBP10 resulted also in underglycosylation of other, endogenous glycoproteins

Praktijkervaringen met waterberging en natuur in een beekdal : achtergrondrapport : Beerze

Hoofddoel van het pilotprogramma is waterbeheerders, terreinbeherende instanties en provincies te ondersteunen in hun activiteiten een koppeling tot stand te brengen tussen waterberging en - buffering en natuurbehoud en -ontwikkeling. Eén van de geselecteerde pilots uit het pilotprogramma ligt langs de Beerze. De Beerze is representatief voor de huidige situatie in veel Brabantse beekdalen: er is sprake van een waterkwantiteitsprobleem, en (tijdelijke) berging van het beekwater in natuurgebieden stuit op problemen, vooral vanwege de (eutrofe) waterkwaliteit. Tegelijkertijd speelt verdroging van natuurgebieden een rol. De pilot Beerze ligt in het traject Logtse Baan - Logtse Velden - Smalbroeken. De onderzoeksperiode van deze pilot besloeg 2004 tot medio 200