Estudos em monitoramento entomológico: mudanças na freqüência de mosquitos em habitats ripários da usina hidroelétrica de Igarapava, Sudeste do Brasil

Diversity of mosquito species was evaluated in different habitats before and after the Igarapava reservoir flooding in the Grande River, Southern Cerrado of Brazil. We aimed at verifying changes in these mosquito populations in consequence of the lake formation. Four habitats were selected as sampling stations: peridomiciliary habitat, pasture, "veredas" and gallery forest patch. Bimonthly collections were made with the Shannon trap and human bait, including diurnal, crepuscular and nocturnal period of mosquito activity. The Shannon Index results from the potential vectors were compared using Student t-test. Aedes scapularis, Anopheles darlingi and An. albitarsis senso latu seasonal abundance were described with moving average and compared using chi2 test. There were changes in the mosquito frequency in the habitats, except for the "veredas" that was 13 km away from the catchment area. The altering in mosquito species seasonal abundance suggests breeding places expansion. Diversity indexes can be used to monitor changes in mosquito vector population in environments where abrupt disturbance can alter disease transmission cycles.Avaliou-se a diversidade de mosquitos em diferentes habitats antes e depois da formação do reservatório de Igarapava no Rio Grande, Cerrado do Sudeste do Brasil, com objetivo de verificar alteração nessas populações de mosquitos. Quatro habitats foram selecionados como sítios de coleta: a) peridomicílio rural, b) pastagem, c) veredas e d) mata ciliar. Realizaram-se coletas bimestrais com isca humana e armadilha de Shannon, incluindo períodos de atividade culicídea diurna, crepuscular vespertina e noturna. Os resultados do Índice de Shannon para os potenciais vetores nos diferentes habitats foram comparados pelo teste t de Student. As abundâncias sazonais de Aedes scapularis, Anopheles darlingi e Anopheles albitarsis s.l., foram descritas com a média móvel e comparadas com o teste chi2. Houve alteração nas freqüências dos mosquitos nos habitats, com exceção das veredas, que estavam afastadas 13 km da área de influência do reservatório. A modificação nas abundâncias sazonais dos potenciais vetores sugere o incremento de criadouros após a formação do reservatório. Índices de diversidade são ferramentas úteis para monitorar populações de mosquitos vetores em ambientes cujas mudanças drásticas podem alterar ciclos de transmissão de doenças transmitidas por vetores

Molecular phylogeny of the Myzorhynchella Section of Anopheles (Nyssorhynchus) (Diptera: Culicidae): genetic support for recently described and resurrected species

Phylogenetic relationships among species of the Myzorhynchella Section of Anopheles (Nyssorhynchus) were investigated using the nuclear ribosomal DNA second internal transcribed spacer (ITS2), the nuclear whitegene and mitochondrial cytochrome oxidase subunit I (COI) regions. The recently described Anopheles pristinus and resurrected Anopheles guarani were also included in the study. Bayesian phylogenetic analyses found Anopheles parvus to be the most distantly related species within the Section, a finding that is consistent with morphology. An. pristinus and An. guarani were clearly resolved from Anopheles antunesi and Anopheles lutzii, respectively. An. lutzii collected in the same mountain range as the type locality were found within a strongly supported clade, whereas individuals from the southern state of Rio Grande do Sul, tentatively identified as An. lutzii based on adult female external morphology, were distinct from An. lutzii, An. antunesi and from each other, and may therefore represent two new sympatric species. A more detailed examination of An. lutzii sensu latoalong its known geographic range is recommended to resolve these anomalous relationships.FAPESPCNP

Evaluation of the larval development of Anopheles darlingi (Diptera - Culicidae) raised in the laboratory on different diets

Three diets for A. darlingi larvae were tested in order to arrive at the following parameters indicative of development in this phase: length of time, both for overall as for each stage of evolution and daily and total stage-survival. A methodology which combined two vital statistical methods of analysis, adjusted to the study of populations under laboratory conditions, was used for determining these parameters. The length of time for overall and for each stage of, evolution were graphically assessed on the basis of trend curves of colony median stages, in sequential surveys. Values for the total and the daily stage-survival were stimated from survival tables. Results permitted the selection of the most adequate diet for the larval development as that composed of one part of fish flour to two parts of bread flour and two parts of a heat germ, giving an average length of 12.9 days between the first larval stage and the emergent adult. Total survival rate was of 95%.São testadas três dietas para larvas de A. darlingi, buscando-se os seguintes parâmetros indicativos de desenvolvimento nesta fase: tempo de evolução total e de cada estádio, sobrevivência ao estádio, diária e total. A metodologia utilizada na determinação desses parâmetros constitui-se da combinação de dois métodos de análise da estatística vital, adaptados ao estudo de populações mantidas em laboratório. Os tempos de evolução total e de cada estádio foram determinados gráficamente a partir das curvas de tendência dos estádios medianos da colônia, em inspeções sucessivas. Os valores de sobrevivência diária, ao estádio e total foram calculados a partir de tábuas de sobrevivência. Os resultados permitiram eleger a dieta composta de uma parte de farinha de peixe para duas partes de farinha de pão e duas partes de germe de trigo como a mais adequada ao desenvolvimento larval, com duração de 12,9 dias entre o primerio estádio e a emersão do adulto e sobrevivência total de 95%

A multi-locus approach to barcoding in the Anopheles strodei subgroup (Diptera: Culicidae)

Abstract\ud \ud \ud \ud Background\ud \ud The ability to successfully identify and incriminate pathogen vectors is fundamental to effective pathogen control and management. This task is confounded by the existence of cryptic species complexes. Molecular markers can offer a highly effective means of species identification in such complexes and are routinely employed in the study of medical entomology. Here we evaluate a multi-locus system for the identification of potential malaria vectors in the Anopheles strodei subgroup.\ud \ud \ud \ud Methods\ud \ud Larvae, pupae and adult mosquitoes (n = 61) from the An. strodei subgroup were collected from 21 localities in nine Brazilian states and sequenced for the COI, ITS2 and white gene. A Bayesian phylogenetic approach was used to describe the relationships in the Strodei Subgroup and the utility of COI and ITS2 barcodes was assessed using the neighbor joining tree and “best close match” approaches.\ud \ud \ud \ud Results\ud \ud Bayesian phylogenetic analysis of the COI, ITS2 and white gene found support for seven clades in the An. strodei subgroup. The COI and ITS2 barcodes were individually unsuccessful at resolving and identifying some species in the Subgroup. The COI barcode failed to resolve An. albertoi and An. strodei but successfully identified approximately 92% of all species queries, while the ITS2 barcode failed to resolve An. arthuri and successfully identified approximately 60% of all species queries. A multi-locus COI-ITS2 barcode, however, resolved all species in a neighbor joining tree and successfully identified all species queries using the “best close match” approach.\ud \ud \ud \ud Conclusions\ud \ud Our study corroborates the existence of An. albertoi, An. CP Form and An. strodei in the An. strodei subgroup and identifies four species under An. arthuri informally named A-D herein. The use of a multi-locus barcode is proposed for species identification, which has potentially important utility for vector incrimination. Individuals previously found naturally infected with Plasmodium vivax in the southern Amazon basin and reported as An. strodei are likely to have been from An. arthuri C identified in this study.We are grateful to the Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP, No. 2011/20397-7 to MAMS), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq, No. 301666/2011-3 to MAMS) and Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES, No. 23038.005274/2011-24 to LSR) for financial support. We are also indebted to Denise Sant’Ana who kindly helped us with field collections

Distribution of anopheline vectors on human environment in an agricultural and ranching region of the interior of São Paulo State - Brazil

Objetivos - Este trabalho foi motivado pela ausência de dados sobre mosquitos vetores de malária no interior do estado de São Paulo, Brasil. Buscou-se a atualização das informações sobre a ocupação do ambiente antropogênico, representado por pastagens e plantações de cana de açúcar, por espécies de Anopheles. O objetivo foi analisar as freqüências das distribuições peri e extradomiciliares durante o período crepuscular vespertino. Isso foi feito pela comparação da atração dos mosquitos a três diferentes métodos de coleta, os quais evidenciaram diferenças espaciais e sazonais específicas, bem como suas diferentes abundâncias no ambiente alterado. Métodos - A localidade escolhida para essas observações foi uma fazenda localizada próximo ao centro geográfico do estado de São Paulo, Brasil, às margens do rio Jacaré Pepira, onde estudos anteriores haviam mostrado grande variedade específica de Anopheles. Os mosquitos foram coletados semanalmente utilizando-se armadilha tipo Shannon no extradomicílio, e aspiração menor e isca animal no peridomicílio. Resultados - As coletas totalizaram 5.172 Anopheles distribuídos por 14 espécies pertencentes ao subgênero Nyssorhynchus. Deste total 4.346 mosquitos foram obtidos na armadilha tipo Shannon, 786 na isca animal e apenas 40 na aspiração menor. Do ponto de vista epidemiológico, Anopheles (Nys.) darlingi foi a espécie mais importante daquela área, tendo sido mais abundante no mês de março e ausente em outubro, novembro e dezembro. Anopheles (Nys.) albitarsis foi separado e designado \"A\" e \"B\", baseado apenas na proporção da marcação negra do segundo tarsômero posterior. A Forma B foi a mais abundante na área amostrada, principalmente na armadilha tipo Shannon, e a forma A foi mais abundante na coletas realizadas sobre a isca animal. A distribuição sazonal de ambas as formas de An. albitarsis foi irregular. Outras espécies prevalentes na área foram Anopheles (Nys.) galvaoi e Anopheles (Nys.) strodei. Em linhas gerais, as espécies da Seção Albimanus do subgênero Nyssorhynchus foram mais abundantes durante o mês de Março. Não houve correlação significativa entre o número de mosquitos coletados, chuvas e temperatura. Conclusões - A grande variabilidade específica de Anopheles é uma evidência de que as modificações antropogênicas resultantes da ocupação do solo por cana de açúcar e pastagens não alterou de modo irreversível o ambiente ocupado pelos anofelíneos. Não houve evidência de colonização do espaço humano por esses mosquitos. As variações quantitativas mensais registradas no extradomicílio foram muito semelhantes àquelas registradas no peridomicílio sobre a isca animal. A presença de animais domésticos no peridomicílio, como bovinos e eqüinos, atuou como barreira, evitando a aproximação dos Anopheles da casa habitada, reduzindo a possibilidade de contato domiciliar homem-vetor.Objective- This work was motivated by the lack of data on malaria vector mosquitoes in the State of São Paulo and updated information on the colonization of anthropogenic environments, such as sugar cane fields and pastures by Anopheles species. The aim was to analyse the frequency at both peri- and extra-domiciliary range during the dusk. This was done through comparison of the insects attraction to three different catches methods, which yielded specific spatial and seasonal differences and their abundances in the disturbed environment. Methods- The collections were done at a farm located near the geographical center of São Paulo State, Brazil, at the edge of Jacaré Pepira River, where previous studies have showed the presence of several species. Mosquitoes were collected weekly for one year with extra domiciliary Shannon trap, near the river, and with peridomiciliary animal and human baits. Results- The collection total was 5,172 Anopheles distributed in 14 species, 4,346 of these in Shannon trap, 786 from animal bait and only 40 from human bait. From the epidemiological point of view, An. (Nys.) darlingi was the most important species in this area. It was most abundant in March and absent in October, November, and December. An. (Nys.) albitarsis samples were separated and designated \"A\" and \"B\" based on the proportion of the dark part of the second posterior tarsomere. Form A was the most abundant in the sampled area, mainly in the Shannon trap, and the form B was the most abundant in the collections carried out on animal bait. The seasonal distribution of both forms was irregular. Other prevalent species in the area were An. (Nys.) galvaoi and An. (Nys.) strodei. In general, the species of the Albimanus Section of the Nyssorhynchus subgenus were more abundant in March. There was no significant correlation among the number of mosquitoes collected, rainfall, and temperature. Conclusions- The high species diversity of Anopheles is evidence that anthropogenic modifications resulting from soil occupation by sugar cane and pastures did not change from irreversible way the environment occupied by the anophelines. There was no evidence of colonization of human environment by any Anopheles species, because the curves of seasonal distribution were very similar for both, extradomiciliary and peridomiciliary catches. The presence of livestock in the vicinity of the farm may have acted as a barrier to the entrance of Anopheles into the house, reducing the possibility of human-vector domiciliary contact

Manutenção de colônia de anopheles darlingi root, 1926, em laboratório

Descreve-se a instalação e manutenção inicial de uma colônia de An. darlingi, no município de Araraquara, SP, como parte do programa de pesquisas em malária da Superintendência de Controle de Endemias - SUCEN. Participando-se de experiência semelhante descrita por CORRÊA na década de 70, apresenta as modificações sugeridas por outros autores e pela experiência de seis meses de funcionamento. A perspectiva c dc desenvolvimento de uma colônia com simplificações de técnicas e equipamentos. São dadas informações sobre alimentação de larvas e alados, duração dos estádios larvais, mortalidade e acasalamento

Maintenance of anopheles darlingi, Root, 1926, in laboratory

The authors describe the installation and the initial efforts to maintain anopheles darlingi laboratory colonies in Araraquara - SP, as part of the Malaria Research Program - SUCEN. Based on other investigators' suggestions and on their own experience in the first six months of work, the authors present some modifications to the original methods of insect rearing, described by CORREA in the 70\s. The aim is to maintain insect colonies, using simple techniques and equipment. Information on larval and adult feeding, duration of larval instars, insect mortality and mating are provided.Descreve-se a instalação e manutenção inicial de uma colônia de An. darlingi, no município de Araraquara, SP, como parte do programa de pesquisas em malária da Superintendência de Controle de Endemias - SUCEN. Participando-se de experiência semelhante descrita por CORRÊA na década de 70, apresenta as modificações sugeridas por outros autores e pela experiência de seis meses de funcionamento. A perspectiva c dc desenvolvimento de uma colônia com simplificações de técnicas e equipamentos. São dadas informações sobre alimentação de larvas e alados, duração dos estádios larvais, mortalidade e acasalamento