Opposite effects of two zinc(II) dithiocarbamates on NF-kB pathway

Inhibiting nuclear factor-kappaB (NF-kB) activation in anticancer and antiinflammatory therapy is of topical interest. Current research in molecular biology has dramatically advanced in the understanding of the cellular events involved in NF-kB induction. Dithiocarbamates, in particular diethyldithiocarbamate and pyrrolidinedithiocarbamate, have been known and widely used as strong inhibitors of NF-kB signaling pathway for more than ten years. Their activity is frequently thought to be due to chelating of zinc or copper present in serum supplemented in the culture medium. Zinc(II) diethyldithiocarbamate (Et2Zn) and zinc(II) dibenzyldithiocarbamate (Bz2Zn) were prepared by direct synthesis in aqueous millieu. They were structurally characterized by X-ray analysis (solid phase) and mass spectrometry (aqueous conditions). Et2Zn and Bz2Zn both in 20 micromolar concentration were applied to HeLa cells. The status of NF-kB signaling was assessed as nuclear translocation of p65 subunit. Surprisingly, Et2Zn activated NF-kB pathway, while TNF-dependent activation of NF-kB was inhibited by Bz2Zn. Our results are preliminary

Rifampicin Does not Significantly Affect the Expression of Small Heterodimer Partner in Primary Human Hepatocytes

The small/short heterodimer partner (SHP, NR0B2) is a nuclear receptor corepressor lacking a DNA binding domain. SHP is induced by bile acid-activated farnesoid X receptor (FXR) resulting in CYP7A1 gene suppression. In contrast, Pregnane X receptor (PXR) activation by its ligands was recently suggested to inhibit SHP gene transactivation to maximize the induction of PXR target genes. However, there are also conflicting reports in literature whether PXR or rodent Pxr activation down-regulates SHP/Shp expression. Moreover, the PXR-mediated regulation of the SHP gene has been studied only at the SHP mRNA and transactivation (gene reporter assay) levels. In this study, we studied the effect of rifampicin, a prototype PXR ligand, on SHP mRNA, and protein expression in three primary human hepatocyte cultures. We found that SHP mRNA is not systematically down-regulated in hepatocyte in culture after 24 h treatment with rifampicin. Consistently, we did not observe down-regulation of SHP protein in primary human hepatocytes after 24 and 48 h of incubation with rifampicin. We can conclude that although we observed slight down-regulation of SHP mRNA and protein in several hepatocyte preparations, the phenomenon is unlikely critical for PXR-mediated induction of its target genes

LWM2M for Cellular IoT : Protocol Implementation and Performance Evaluation

With the growing number of IoT devices, numerous IoT protocols are being developed to provide the market with options based on product requirements. With the release of cellular IoT (CIoT) technologies in the Czech Republic, recently LTE Cat-M, the focus shifts towards not only satisfying the requirements of the device application but also minimizing the generated traffic and overall co-existence of many devices under one cell. It led to the modification of the existing and the creation of new IoT protocols designed to generate as little overhead traffic as possible while adopting the existing well- known communication schemes. Namely, the new UDP-based protocol for IoT, LWM2M strives to be the alternative to the well-established IoT protocols used outside of CIoT. This paper explains the communication principles and capabilities of the well-established IoT protocols with a heavy focus on the LWM2M protocol. Further, it describes difficulties during user implementation of the LWM2M protocol. Furthermore, two carefully designed scenarios are used to compare the differences among these protocols, focusing on generated overhead as it is subject to a fee paid to the network operators within the CIoT networks.Peer reviewe

Exploiting NB-IoT Network Performance and Capacity for Smart-Metering Use-Cases

The requirements introduced in directive 2019/944 of the European Parliament for the smart metering scenarios, which differ from the ones defined in ITU-R M.2410, accelerated the integration of cellular technologies for the Internet of Things (IoT). Requiring a permanent connection to the cellular network (radio resource control in a connected state) and more synchronous-oriented data transmissions led to selecting the Narrowband IoT (NB-IoT) technology as the main enabler for the secured data transmissions. This paper focuses on the features in- troduced by 3GPP in Release 13, i.e., user plane and control plane optimization, and Release 15 early data transmissions (EDT) for the smart metering scenarios. Our simulation results confirm that EDT is a powerful feature for decreasing transmission delay and improving spectrum efficiency with reduced overheads. Our results show that the transmission delay is reduced by over 50 %. Notably, the data indicates EDT significantly improves latency for smaller messages (for Release 13, less than 97 B in uplink and 57 B in downlink). Finally, the results confirm that an NB-IoT network (3GPP Release. 13; NB1) can manage 1000 smart meters per single base station communicating in a 15 minutes window.Peer reviewe

Effects of microtubule-interfering agents on aryl hydrocarbon receptor signalling

Les cytochromes P450 1A (CYP1A) sont impliqués dans le métabolisme des hydrocarbures polycycliques aromatiques et la formation de métabolites réactifs à partir de ces molécules. Le contrôle transcriptionnel de l'expression de ces gènes dépend en partie du récepteur des hydrocarbures polycycliques aromatiques (AhR). Les fonctions de ce récepteur sont affectées par toute une série de stimuli physiopathologiques, incluant notamment les agents perturbateurs du réseau de microtubules (MIAs). Toutefois, le rôle du cytosquelette sur la voie de signalisation dépendante du AhR n'est pas totalement élucidé. Dans ce travail, je me suis intéressé aux effets de divers MIAs présentant des structures chimiques différentes et souvent utilisés dans le traitement de cancers (colchicine, nocodazole, taxol, vincristine, vimblastine) sur la fonction du AhR. Dans la première partie de la thèse, j'ai travaillé sur les cellules HepG2 (carcinome hépatocellulaire humain) et les hépatocytes de rat en culture primaire (RH). Dans les deux types cellulaires, colchine et nocodazole produisent un effondrement du réseau des microtubules, analysé en microscopie et immunofluorescence utilisant des anticorps anti-b-tubuline. Dans les cellules HepG2, la colchicine et le nocodazole provoquent une diminution dose- et temps-dépendante de l'induction du CYP1A1 (mRNA, protéine et activité) en réponse à la dioxine (TCDD). Des résultats similaires sont observés dans les RH avec la colchicine, mais pas avec le nocodazole. Des analyses de liaison de ligand ont révélé qu'aucune de ces deux molécules n'est antagoniste du AhR de souris. La colchicine diminue la translocation nucléaire d'une construction chimérique AhR-GFP en réponse au TCDD dans des cellules HeLa. L'analyse par FACS des cellules HepG2 et des RH exposés pendant 24 heures à la colchicine ou au nocodazole montre une augmentation très importante de la population des cellules HepG2 en G2/M par rapport aux contrôles, alors que la distribution des populations de RH reste inchangée. En conclusion de cette partie du travail, l'intégrité du réseau des microtubules est importante pour la transduction du signal dépendant du AhR dans les cellules HepG2 et les RH. Cet effet n'est pas exclusivement dû à la perturbation du cycle cellulaire (observée sur les cellules HepG2) comme le montrent les résultats obtenus avec les RH. Dans la deuxième partie de ma thèse, j'ai étudié l'effet des MIAs sur la fonction du AhR dans les hépatocytes humains en culture primaire (HH). A l'exception du taxol (comme attendu), tous les MIAs testés produisent après 6 et 24 heures de traitement un effondrement dose-dépendant du réseau des microtubules, analysé en microscopie et immunofluorescence utilisant des anticorps anti-b-tubuline. Par contre, seuls le nocodazole et la vimblastine provoquent une diminution significative de l'induction du CYP1A1 mRNA en réponse au TCDD. Tous les MIAs produisent une diminution dose- et temps-dépendante significative de l'expression du CYP1A2 mRNA en réponse au TCDD. De même, après 16 heures de traitement, tous les MIAs (taxol inclus) provoquent une inhibition de la translocation nucléaire du Ahr en réponse au TCDD, mesurée par analyse en western blot des extraits nucléaires. Les MIAs seuls ou en association avec TCDD produisent une augmentation d'accumulation de la protéine AhR et du mRNA. En conclusion, les MIAs affectent la transduction de signal du AhR, notamment l'expression inductible des CYP1A1 et 1A2. Cependant ces effets ne sont pas directement corrélés à l'impact des MIAs sur le réseau des microtubules et semblent être dépendants des types cellulaires (HH versus RH, ou HepG2 versus HH) et des espèces (HH versus RH). Ces effets pourraient être dépendants de la dynamique du réseau des microtubules plutôt que de son intégrité, comme le suggèrent le fait que les résultats obtenus avec le taxol sont identiques à ceux obtenus avec les autres molécules. Le lien entre réseau des microtubules et cycle cellulaire observé sur les cellules HepG2 ne tient pas avec les RH et HH qui, dans nos conditions de culture, sont des cellules en G0.MONTPELLIER-BU Médecine UPM (341722108) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocMONTPELLIER-BU Médecine (341722104) / SudocPARIS-BIUM (751062103) / SudocSudocFranceF