Response of pineapple plantlets to inoculation with diazotrophic bacteria in greenhouse

O objetivo deste trabalho foi selecionar e avaliar bactérias diazotróficas isoladas de abacaxizeiro (Ananas comosus (L.) Merril) no desenvolvimento de cultivares micropropagadas da mesma espécie em casa de vegetação. Plantas da cultivar Perolera foram submetidas à inoculação com Asaia bogorensis (AB219) e cultivadas em tubetes, durante 145 dias, com as misturas: casca de arroz carbonizada, folha de carnaubeira triturada e vermicomposto; casca de arroz carbonizada, pó da casca do coco maduro e vermicomposto; casca de arroz carbonizada, vermiculita e vermicomposto. Plantas da cultivar Primavera receberam inóculos com o AB219 e bactérias relacionadas a Burkholderia cepacia (AB202 e AB213), enquanto plantas das cultivares Pérola e Smooth Cayenne receberam AB219 e AB213, sendo cultivadas, por 140 dias, em tubetes com a mistura de vermicomposto e vermiculita. A colonização dos abacaxizeiros pelas bactérias diazotróficas foi confirmada. As plantas da cultivar Perolera cresceram melhor em casca de arroz carbonizada, vermiculita e vermicomposto e responderam positivamente ao AB219. Já as plantas da cultivar Primavera não apresentaram resposta significativa à inoculação com AB219, AB202 e AB213. Houve incremento de 23,1% a 38,5% na matéria seca de raízes das plantas da cultivar Pérola na presença de AB213 e AB219, respectivamente. A presença de AB213 incrementou em 15,2% a matéria seca da parte aérea das plantas da cultivar Smooth Cayenne. Os resultados revelam a eficiência de bactérias diazotróficas na promoção do crescimento de abacaxizeiros.The objective of this work was to select and to evaluate isolates of diazotrophic bacteria associated to pineapple (Ananas comosus (L.) Merril) plants in the development of micropropagated plantlets of cultivars pineapple in greenhouse. Plantlets from the Perolera cultivar have been submitted to inoculation with Asaia bogorensis (AB219) and were cultivated during 145 days on the following mixtures: carbonized rice hulls, leave dust from carnaúba (Copernica cerifera) palm tree, vermicompost; carbonized rice hulls, rip coir dust, vermicompost; and carbonized rice hulls, vermiculite, vermicompost. Plantlets of the Primavera cultivar had received bacterial inocules containing AB219 and bacteria related to Burkholderia cepacia (AB202 and AB213), while plantlets of Pérola and Smooth Cayenne cultivars were bacterized with AB213 and AB219, and had been cultivated during 140 days on vermicompost and vermiculite mixture. The plant colonization by diazotrophs was confirmed. Plantlets of Perolera cultivar grew better on substratum with carbonized rice hulls, vermiculite and vermicompost and obtained benefits from AB219 bacterium. All diazotrophs did not improve significantly the biomass of the Primavera cultivar. Increment on root dry matter of Pérola cultivar ranged from 23.1% to 38.5%, when AB213 and AB219 were applied, respectively. The AB213 isolate incremented 15.2% of dry matter in shoots of Smooth Cayenne cultivar. The results indicated the diazotrophic bacteria efficiency in promotion of pineapple plant growth

Efeito da bactéria diazotrófica em mudas micropropagadas de abacaxizeiros Cayenne Champac em diferentes substratos

The objective of this work was to evaluate the effect of a diazotrophic bacteria isolated from pineapple (Ananas comosus) plants on plantlets growth and nutrient accumulation of the cultivar Cayenne Champac grown with different substrates in tubules conditions. Treatments consisted of six substrates: carbonized rice hulls + leave dust from carnauba (Copernicia cerifera) palm tree + vermicompost; carbonized rice hulls + rip coir dust + vermicompost; carbonized rice hulls + vermiculite + vermicompost; carbonized rice hulls + leave dust from carnauba palm tree + vermiculite; carbonized rice hulls + ripe coir dust; and carbonized rice hulls + vermiculite. The bacterium isolate was identified by similarity (97% to 98%) of sequences of 16S rDNA with the species Asaia bogorensis. After the bacterial inoculation, plants were transferred to substrates into tubules conditions. After four months, at harvesting, acclimated plants were ready to be planted in the field. The occurrence of diazotrophic bacteria related to A. bogorensis in pineapple plants is presented here for the first time. The bacterial isolate AB219 promoted higher plant surviving onto tubules conditions, and induced higher root weight with the substrate of carbonized rice hulls, vermiculite and vermicompost. Higher sodium contents were detected in bacterized plants, independently of substrates.Este trabalho objetivou avaliar o efeito de uma bactéria diazotrófica isolada de abacaxizeiro (Ananas comosus) sobre o crescimento e o acúmulo de nutrientes de mudas micropropagadas da cultivar Cayenne Champac, crescidas em tubetes com diferentes substratos. Os substratos foram: casca de arroz carbonizada, bagana de carnaúba e vermicomposto; casca de arroz carbonizada, pó de coco e vermicomposto; casca de arroz carbonizada, vermiculita e vermicomposto; casca de arroz carbonizada, bagana de carnaúba e vermiculita; casca de arroz carbonizada e pó de coco; e casca de arroz carbonizada e vermiculita. O isolado de bactéria foi identificado pela similaridade (97% a 98%) de sequências de DNAr 16S com a espécie Asaia bogorensis. Após a inoculação do isolado bacteriano nas mudas micropropagadas, estas foram transferidas para os substratos dos tubetes. Aos quatro meses de aclimatação, por ocasião de colheita, as mudas estavam aptas para o plantio no campo. A ocorrência de bactéria diazotrófica relacionada a A. bogorensis em abacaxizeiros está sendo apresentada pela primeira vez. O isolado de bactéria diazotrófica AB219 propiciou maior taxa de sobrevivência e, no substrato com casca de arroz carbonizada, vermiculita e vermicomposto, maior acúmulo de massa seca de raízes das plantas. O conteúdo de sódio nas mudas foi superior com a inoculação bacteriana, independentemente do substrato

Shoot growth and development in the multiplication of Eucalyptus spp. in vitro in liquid and solid tissue culture media

Avaliou-se semanalmente, na fase de multiplicação, o crescimento e desenvolvimento de gemas de E. grandis, E. grandis x E.uvophylla e de E. urophylla x E. grandis em meio da cultura líquido, sólido em 42 dias e de E. grandis em meio bifásico em 35 dias. Segmentos nodais foram retirados de árvores com 30 ou 36 meses de idade. Utilizou-se o meio JADS (1989) com 0,5 mg/l BAP. O crescimento e desenvolvimento de gemas dos clones foi avaliado a cada 7 dias através do peso de matéria fresca (PMF) seca (PMS), taxa de crescimento relativo (5) e número de brotações em classes de altura. Houve variações entre clones e/ou tratamentos para PMF, PMS e taxa de crescimento relativo em meio líquido, sólido ou bifásico. Maior PMF e PMS foram obtidos em meio líquido e sólido para E. grandis e E. grandis x E. urophylla, respectivamente; reduções da taxa de crescimento relativo a pós o 14º dia e não houve diferença no PMF e PMS para E. urophylla x E. grandis em meio líquido ou sólido em meio bifásico, a maior frequência de acréscimos de meio líquido promoveu maior PMF, PMS, taxa de crescimento relativo até o 21º dia e número de brotações por explante com alturas mais homogêneasThe objectives of this work were: 1) to evaluate weekly the shoot growth and development from clones of Eucalyptus grandis Hill ex Maiden, of E. grandis x E. urophylla and of E. urophylla x E. grandis in liquid and solid tissue culture media in the multiplication phase for 42 days; 2) to evaluate weekly the shoot growth and development of two E. grandis clones in solid + liquid tissue culture media with weekly additions in the multiplication phase for 35 days. For the tissue culture establishment, nodal explants were collected from tree branchs in the field and/or from epicormic shoots from coppices of trees obtained from cuttings and maintained in shade house. The four trees of E. grandis were 36 months old, while the five trees of E. grandis x E. urophylla and the one of E. urophylla x E. grandis were 30 months old. A modified GONÇALVES (1980) tissue culture media was utilized for the establishment and the shoot muItiplication phases. Nineteen successive transfers were made at every 30 days for two clones of E. grandis, twenty additional transfers were made in the solid JADS (1989) tissue culture media. Weekly evaluation of shoot growth and development were made through the measurement of: fresh (FW) and oven dry weight (ODW) and relative growth rate (R%) i the total number of shoots and shoot height classes from the 14th to the 35th day of culture were made only for two E. grandis clones in solid and liquid tissue culture media. The evaluation of shoot growth and development of the clones in liquid and solid JADS tissue culture media showed: - interclonal variation for FW and ODW in liquid and solid tissue culture media for 42 days of culture; - higher R(%) in liquid and solid tissue culture media at the 7th day of culture; - reduction and stabilization of R(%) after the 14th day of culture in liquid and solid media; - in the liquid tissue culture media, there was a higher FW and ODW production for E. grandis; - in the solid tissue culture media, there was a higher FW and ODW production for E. grandis x E. urophyllai; - there was no difference for FW and ODW production either in the liquid as in the solid tissue culture media for E. urophylla x E. grandis. The evaluation of shoot growth and development of two E. grandis clones cultivated in solid + liquid culture media with weekly additions showed: - interclonal and among treatment variations for FW, ODW, R(%) and shoot number and shoot height classes; - that the mean of R(%) was 21,9 in the solid media at the 7th day of culture; - that the weekly additions of liquid tissue culture media to the culture favored the maintenance of the R(%) at 10,8 until the 21st days of culture and the largest mean number of shoots/explant with more uniformity at the shoot height at the 35th day of culture; - reduction and stabilization of R(%) after the 21st day and/or after the last addition of liquid media to alI treatment

Macronutrients, biochemical and nutritional aspects of Eucalyptus grandis shoot growth in vitro

Os objetivos deste estudo foram avaliar o equilíbrio iônico dos meios de cultura, o crescimento, aspectos nutricionais e bioquímicos em brotações de Eucalyptus grandis cultivadas em meio líquido suplementado com nitrogênio (17,3; 26,0; 39,0 e 58,5 mmol L-1), fósforo (2,0; 3,0; 4,5 e 6,75 mmol L-1), potássio (7,5; 11,0; 16,5 e 24,75 mmol L-1), cálcio (3,3; 5,0; 7,5 e 11,25 mmol L-1); magnésio (2,0; 3,0; 4,5 e 6,75 mmol L-1) e enxofre (2,29; 3,29; 4,79 e 7,04 mmol L-1). O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente aleatorizado com 19 tratamentos. As massas fresca e seca, porcentagem de massa seca, taxa de crescimento relativo, pH dos meios de cultura foram avaliadas semanalmente durante 21 dias de cultivo e teores de nutrientes minerais, carboidratos não-estruturais solúveis totais, proteínas solúveis totais e prolina foram avaliados aos 21 dias de cultivos. O equilíbrio iônico dos meios de cultura mostrou alterações em função do macronutriente e concentração utilizada. Fósforo e cálcio foram os que mais influenciaram as estimativas da especiação iônica. A morfogênese das brotações foi afetada pelo macronutriente e concentração utilizada. Concentrações a partir de 39 mmol L-1 de nitrogênio, 4,5 mmol L-1 de fósforo, 16,5 mmol L-1 de potássio, 7,5 mmol L-1 de cálcio, 6,75 mmol L-1 de magnésio e 4,79 mmol L-1 de enxofre mostraram-se excessivas. O meio de cultura JADS (CORREIA et al., 1995) contendo, em mmol L-1, 26,0 (N), 3,0 (P), 11,0 (K), 5,0 (Ca), 3,0 (Mg) e 3,0 (S) apresentou crescimento ótimo das brotações, mas não o crescimento máximo. As massas frescas e secas apresentaram incrementos ao longo do período de cultivo e maiores taxas de crescimento relativo durante os primeiros 7 dias de cultivo. Variações das concentrações dos macronutrientes em meios de cultura promoveram respostas diferenciadas para teores de macronutrientes e de micronutrientes na massa seca de brotações. Teores de carboidratos nãoestruturais solúveis totais, proteínas solúveis totais e prolina da massa fresca das brotações variaram em função do macronutriente e concentração utilizada aos 21 dias de cultivo.The aim of this work were to evaluate the ionic equilibrium of the culture media, biochemical and nutritional aspects of Eucalyptus grandis shoot growth in liquid media suplemented with nitrogen (17,3; 26,0; 39,0 and 58,5 mmol L-1), phosphate (2,0; 3,0; 4,5 and 6,75 mmol L-1), potassium (7,5; 11,0; 16,5 and 24,75 mmol L-1), calcium (3,3; 5,0; 7,5 and 11,25 mmol L-1); magnesium (2,0; 3,0; 4,5 e 6,75 mmol L-1) and sulphate (2,29; 3,29; 4,79 and 7,04 mmol L-1). The experiment was carried out on a completely randomized statistical design with 19 treatments. The fresh weight, the oven dry weight, the dry weight percentage, the relative growth rate and the pH value were weekly evaluated for 21 days culture period. Mineral nutrients contents, total soluble non-structural carbohydrate, total soluble protein and proline were determined at the 21rst day of culture. The ionic equilibrium of the culture media showed alterations in functions of the macronutrient and concentration utilized. Concentration from nitrogen 39 mmol L-1, phosphate 4,5 mmol L-1, potassium 16,5 mmol L-1, calcium 7,5 mmol L-1, magnesium 6,75 mmol L-1 and sulphate 4,79 mmol L-1 showed to be excessives. The culture medium JADS (CORREIA et al., 1995) composition (N 26,0; P 3,0; K 11,0; Ca 5,0; Mg 3,0, and S 3,0 mmol L-1) showed the optimum shoot growth, but not the maximum growth rate. The fresh and oven dry weight production showed increament along the culture period and the relative growth rates were higher at the first week of culture. Variations on the macronutrient concentrations in the culture media showed diferentiated response to the mineral nutrient content in the shoot dry mass. Fresh mass content of total soluble non-structural carbohydrate, total soluble protein and proline showed variations in function of the macronutrients and of the concentration utilized at the 21rst day of culture

Macronutrientes, aspectos nutricionais e bioquímicos no crescimento de brotações de <i>Eucalyptus</i> <i>grandis</i> <i>in</i> <i>vitro</i>

Os objetivos deste estudo foram avaliar o equilíbrio iônico dos meios de cultura, o crescimento, aspectos nutricionais e bioquímicos em brotações de Eucalyptus grandis cultivadas em meio líquido suplementado com nitrogênio (17,3; 26,0; 39,0 e 58,5 mmol L-1), fósforo (2,0; 3,0; 4,5 e 6,75 mmol L-1), potássio (7,5; 11,0; 16,5 e 24,75 mmol L-1), cálcio (3,3; 5,0; 7,5 e 11,25 mmol L-1); magnésio (2,0; 3,0; 4,5 e 6,75 mmol L-1) e enxofre (2,29; 3,29; 4,79 e 7,04 mmol L-1)

Método para abertura dos frutos, biometria e descrição anatômica do desenvolvimento embriogênico em sementes de pau-branco (Cordia oncocalyx Allemão)

The tree species Pau-branco, Cordia oncocalyx Allemão has great economic potential, especially for logging, but its extraction is uncontrolled and can cause depredation. This type of harvest does not guarantee sufficient raw material to supply the demanding sectors such as furniture industries. The propagation of the species in plant nurseries starting from fruits and seeds could offer a solution to this problem. However, the fruits obtained from native plants comprise different sizes and different degrees of ripeness, making germination and propagation processes a difficult task. Knowledge of the final zygotic embryogenesis (fruit phase) anatomy is very important to establishing a propagation protocol for this species, especially to achieve a successful seed rescue of those containing mature zygotic embryos. The objectives of the present work was to establish a method to open the fruits and to study the microstructure and anatomy of the embryo in seeds of pau-branco, never shown before, with the goal of determining in which phase of development seed rescue is most appropriate for subsequent planting and seedling propagation. Mature fruits of pau-branco at different developmental stages were collected and subjected to microscopic investigation or biometrics determination. Transverse and longitudinal sections were obtained and processed for optical and scanning electron microscopy for the anatomical description of fruits and seeds. It was observed that the fruit has an exocarp and mesocarp. The mesocarp is divided into a sub exocarp-like mesocarp and a sclerenchymatous mesocarp, the latter of which gives hardness and rigidity to the fruit. The embryo, generally approximately 1.5 cm, is visible inside the fruits. When the embryo reaches 2.0 cm, it is considered fully developed, and it is recommend that excision can take place at this stage. the use of a hydraulic press was the most viable method for the extraction of seeds from the fruits. Furthermore, it was also concluded that the embryo of pau-branco seeds contain protein reserves.A exploração do pau-branco (Cordia oncocalyx Allemão), espécie de grande potencial madeireiro, é feita por extrativismo, sendo depredatória e sem garantia de oferta de matéria-prima suficiente e constante aos setores demandantes. A propagação da espécie em viveiros a partir de frutos e sementes poderia oferecer uma solução para esse problema. Os frutos obtidos de plantas nativas apresentam, no entanto, tamanhos diferentes e distintos graus de maturação, dificultando a germinação e o sucesso da propagação. Para estabelecer-se um protocolo de propagação para o pau-branco, partindo de um resgate com sucesso de sementes com embrião zigótico maduro, o conhecimento da anatomia da embriogênese zigótica final (na fase do fruto) é de grande importância. O presente trabalho objetivou determinar um método de abertura do fruto e estudar aspectos relacionados à microestrutura e anatomia do embrião da semente de pau-branco, inéditos até então, com o intuito de se determinar em qual fase de desenvolvimento torna-se apropriado o resgate de sementes para cultivo visando à obtenção de mudas. Frutos maduros e em diferentes estádios de desenvolvimento de pau-branco foram coletados para serem submetidos à investigação microscópica ou para a determinação da biometria. Para a descrição anatômica dos frutos e das sementes, seções transversais e longitudinais foram obtidas e processadas para microscopia óptica e eletrônica de varredura. Constatou-se que o fruto possui exocarpo e o mesocarpo, sendo este, dividido em mesocarpo sub-exocárpico e mesocarpo esclerenquimático, sendo esse último, o que confere dureza e rigidez ao fruto. O embrião torna-se visível em frutos com comprimento em torno de 1,5 cm, encontrando-se totalmente desenvolvido somente a partir de 2,0 cm, sendo este tamanho o recomendado para realizar sua excisão. A prensa hidráulica constitui-se em um método eficaz de abertura dos frutos. Conclui-se ainda que o embrião da semente de pau-branco apresenta reserva protéica

Influência do meio bifásico na multiplicação de gemas e no alongamento de brotos in vitro de Ananas lucidus Miller.

Este estudo foi realizado no Laboratório de Biotecnologia Vegetal da Embrapa Agroindústria Tropical, em Fortaleza (CE). Nele objetivou-se avaliar a influência do meio de cultura bifásico na multiplicação de gemas e no alongamento de brotos, in vitro, de abacaxi ornamental (Ananas lucidus Miller). Na multiplicação de gemas, utilizaram-se como explantes, brotos de cultura in vitro, com altura aproximada de 0,5 cm. Utilizou-se o meio MS, solidificado e líquido, suplementado com 1,0 mg.L-1 de 6- benzilaminopurina (BAP) e 0,1 mg.L-1 de ácido naftaleno-acético (ANA). O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado com os seguintes tratamentos: acréscimos de 10 mL de meio líquido/frasco nos períodos de cultivo 0; 15; 30; 15 e 30; 30 e 60 e, a cada 15 dias durante 75 dias, com 14 repetições e 6 explantes/parcela. Avaliaram-se os pesos de matéria fresca e de matéria seca aos 90 dias de cultivo. No mesmo período, as culturas de cada tratamento foram transferidas para o meio de cultura de Murashige & Skoog (MS) solidificado com 0,4% (p/v) de ágar e suplementado com 0,01 mg.L-1 de ANA para o alongamento dos brotos, utilizando, como explante, aglomerado de gemas com aproximadamente 0,5 cm de diâmetro. Cada tratamento foi composto por 6 epetições e 6 explantes/parcela, dispostos em delineamento inteiramente casualizado. Realizaram-se três subcultivos sucessivos para o mesmo meio “novo” a cada 30 dias. Aos 90 dias de cultivo em meio de alongamento avaliaram-se o número de rotos/explante e as porcentagens de número de brotos e de brotos enraizados em quatro amplitudes de altura. Os maiores valores médios para pesos de matéria fresca (913,7 mg/explante) e matéria seca (69,1 mg/explante) foram obtidos com o acréscimo de 10 mL de meio líquido aos 30 dias de cultivo. Os acréscimos de meio líquido efetuados aos 15 e 30 dias de cultivo proporcionaram a maior média de número de brotos (32,6 brotos/explante) aos 90 dias de cultivo em meio de alongamento de brotos. Em todos os tratamentos, as maiores porcentagens para o número de brotos e de brotos enraizados encontravam-se na amplitude de altura entre 1,0 cm e 2,0 cm

Crescimento e desenvolvimento de gametófitos de avencão em diferentes meios nutritivos.

O estudo objetivou avaliar o crescimento e desenvolvimento de avencão em diferentes meios nutritivo