Hepatocellular carcinoma and multidrug resistance: Past, present and new challenges for therapy improvement

Hepatocellular carcinoma (HCC) is the most common malignancy of the liver and the third cause of cancer death worldwide. Chronic hepatitis due to HBV and HCV infection are two major risk factors for HCC worldwide. Advances in early detection and treatment have improved life expectancy of patients with HCC. However, this disorder remains as a disease with poor prognosis. In fact, epidemiological studies have shown that the median survival of patients is 8 months and approximately 20% of them survive one year, while only 5% remain alive after three years. Additionally, HCC is particularly difficult to treat because of its high recurrence rate, and its resistance to conventional chemotherapy due to, among other mechanisms, the over-expression of several members of the ATP-Binding Cassette (ABC) protein family involved in drugs transport. Fortunately, there is evidence that these patients may benefit from alternative molecular-targeted therapies. This manuscript reviews the current knowledges on the etiology, molecular mechanisms involved in HCC development and the current therapy strategies for the management of this malignancy. The challenges in the development of drug delivery systems for the targeting of antitumoral drugs to the liver parenchyma are also discussed. Finally, perspectives in the design of a more efficient pharmacotherapy to overcome multidrug resistance are reviewed.Fil: Cuestas, María Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Oubiña, Jose Raul. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Mathet, Veronica Lidia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; Argentin

Hepatitis B Virus (HBV) and S-Escape Mutants: From the Beginning until Now

Despite of the progress made in vaccine and antiviral therapy development, hepatitis B virus (HBV) infection remains a major health care problem. More than 240 million people are chronically infected worldwide showing differences in the severity of liver disease, clinical outcome and response to immune- and antiviral-therapy. Parameters associated with the host immune system (HBV specific T- and/or B-cell repertoires, defective antigen presentation and diminished Th1/Th2 response ratio) and viral factors such as the HBV genotypes and their evolving variants/mutants, have largely contributed to explaining such differences. The unique genomic structure and replication cycle of HBV provide much opportunity for mutations to occur in any of its genes undergoing selection pressures, such as those associated with the host immune system, the hepatitis B vaccine and/or hepatitis B immune globulin and the antiviral therapy with nucleos(t)ide analogues. Firstly, this review describes the current prevalence of S-escape mutants worldwide. Secondly, the clinical implications of such surface gene variants and the impact of universal hepatitis B vaccination on HBV mutations and genotypes are discussed. Finally, the fact that the immune escape process also extends well beyond HBV is addressed.Fil: Perazzo, Priscila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Eguibar, Nair. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Gonzalez, Rodrigo Horacio. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Nusblat, Alejandro David. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Cuestas, María Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; Argentin

Virus emergentes y reemergentes: un nuevo reto para la salud mundial del milenio

La historia de la humanidad siempre estuvo azotada por distintas emergencias sanitarias a raíz de conflictos bélicos, catástrofes naturales y grandes epidemias. Pero los «animálculos» de Anton van Leeuwenhoek del nuevo milenio apuntan específicamente a lo imprevisto, lo inesperado, lo nuevo. Estos «animálculos mileniales», los llamados virus emergentes y reemergentes, han provocado diferentes brotes, con consecuencias devastadoras para la salud y la economía globalFil: Cuestas, María Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Minassian, Maria Laura. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

COVID-19: Impact of a pandemic

El brote de enfermedad por el coronavirus SARS-CoV-2 (COVID-19) fue notificado por primera vez en Wuhan (China) el 31 de diciembre de 2019. En poco tiempo, dicho brote localizado de COVID-19 se propagó a varios países del mundo. El 30 de enero, la OMS declaró a esta enfermedad una emergencia de salud pública internacional y el 11 de marzo alcanzó el status de pandemia. La velocidad de propagación del virus llevó a que se desbordaran los sistemas sanitarios de numerosos países y ha provocado una gran crisis social y económica en todo el mundo. Algunos países han sido (o están siendo) duramente castigados por esta pandemia, como es el caso de Italia, España, Reino Unido, Ecuador, EE. UU., Brasil, Perú, e incluso Argentina.Fil: Cuestas, María Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Minassian, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Smart release of antimicrobial ZnO nanoplates from a pH-responsive keratin hydrogel

A smart antibacterial biomaterial based on a keratin hydrogel with pH-dependent behavior and Zinc Oxide nanoplates as biocide agent has been developed. The pH of a chronic wound is basic due to bacterial metabolism. Originally shrank at acid pH, keratin hydrogels swell upon contact with a bacterial contaminated media leading to the release of the nanoparticles. The material has been thoroughly characterized by infrared spectroscopy, Raman, scanning electron microscope, swelling behavior, Differential scanning calorimetry, Small-angle X-ray scattering, rheology, antimicrobial activity and cytotoxicity. The results show that 5% of Zinc Oxide nanoparticles concentration is the optimum for wound dressing applications.Fil: Villanueva, María Emilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Cuestas, María Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Pérez, Claudio Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ingeniería. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales; ArgentinaFil: Campodallorto, Viviana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Copello, Guillermo Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; Argentin

Self-assembled Amphotericin B Pharmacosome like Vesicles Derived from Lipid-based Microtubes: a Model Carrier to Further Explore

Background: Self-assembled drug delivery systems are of much interest since they can be produced by simple low cost and solvent-free procedures. Pharmacosomes are supramolecular-structured nanocarriers with benefits for drug stability and targeting delivery. Amphotericin B (AmB) still remains an important agent for the treatment of invasive mold infections, e.g invasive aspergillo-sis, although the challenge for new formulations is still prevailing due to high rates of toxicity. Objective: We have previously reported the incorporation of AmB into 12-hydroxystearic acid lipid-based microtubes (MTs) for topical use, herein we report the ability of AmB-MTs to self-assemble into vesicles upon dilution. Methods: AmB-MTs with different drug concentrations (1, 3, 5 mg/ml) were prepared, and size de-termination was carried out for different dilutions. Morphology was evaluated by microscopy. In vitro cytotoxicity was evaluated in Vero cells and in vitro activity against Aspergillus fumigatus and Asper-gillus flavus was assessed. Results: AmB-MTs closed upon dilution to form vesicles ranging from 200 nm to 1µm. AmB MIC (Minimum inhibitory concentration) for both Aspergillus species was 0.0625 and 0.125 µg/ml for dis-persion and reconstituted lyophilized, respectively. Conclusion: AmB pharmacosome-like vesicles are smaller structures than MTs may thus be favoura-ble for other delivery routes. We assume that this kind of pharmacosomes-like carrier is a promising model for the obtention of new vesicular carriers based on lipid MTs.Fil: Salerno, Claudia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Cuestas, María Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Manco, Karina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Chiappetta, Diego Andrés. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lucangioli, Silvia Edith. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentin

A novel combination of CYP51A mutations confers pan-azole resistance in aspergillus fumigatus

The treatment of invasive and chronic aspergillosis involves triazole drugs. Its intensive use has resulted in the selection of resistant isolates, and at present, azole resistance in Aspergillus fumigatus is considered an emerging threat to public health worldwide. The aim of this work is to uncover the molecular mechanism implicated in the azole resistance phenotype of three Aspergillus fumigatus clinical strains isolated from an Argentinian cystic fibrosis patient under long-term triazole treatment. Strain susceptibilities were assessed, and CYP51A gene sequences were analyzed. Two of the studied Aspergillus fumigatus strains harbored the TR34- L98H allele. These strains showed high MIC values for all tested triazoles (>16.00μg/ml, 1.00 μg/ml, 1.00 μg/ml, and 2.00 μg/ml for itraconazole, isavuconazole, posaconazole, and voriconazole, respectively). The third strain had a novel amino acid change (R65K) combined with the TR34-L98H mutations. This new mutation combination induces a pan-azole MIC augment compared with TR34-L98H mutants (>16 μg/ml, 4.00μg/ml, 4.00μg/ml, and 8.00μg/ml for itraconazole, isavuconazole, posaconazole, and voriconazole, respectively). The strain harboring the TR34-R65K-L98H allele showed no inhibition halo when voriconazole susceptibility was evaluated by disk diffusion. The effect of these mutations in the azole-resistant phenotype was confirmed by gene replacement experiments. Transformants harboring the TR34-L98H and TR34-R65KL98H alleles mimicked the azole-resistant phenotype of the clinical isolates, while the incorporation of the TR34-R65K and R65K alleles did not significantly increase azole MIC values. This is the first report of the TR34-L98H allele in Argentina. Moreover, a novel CYP51A allele (TR34-R65K-L98H) that induces a pan-azole MIC augment is described.Fil: Macedo, Daiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Brito Devoto, Tomás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Pola, Santiago. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Finquelievich, Jorge L.. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Cuestas, María Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Garcia Effron, Guillermo. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentin

Nanotechnology, Drug Delivery Systems and their Potential Applications in Hepatitis B Vaccines

Since the Nobel Prize in Physiology or Medicine 1976 Baruch Blumberg and Irving Millman developed the first prophylactic plasma-derived hepatitis B vaccine - also considered the world´s first cancer vaccine- so much progress has been made in the development of new immunogenic and safe vaccines. However, improvements are still clearly required since vaccines currently available in the market produce mainly a humoral immune response, require cold storage, a three dose schedule, the costs of the vaccines are high, many developing or low-incoming countries display a poor compliance in vaccination programs, and 5-10% of the vaccinated individuals are poor or non-responders.To overcome such drawbacks, nanotechnology has emerged as a new platform for vaccine development. Nanocarrier-based delivery systems offer an opportunity to stimulate both humoral as well as cell-mediated responses and to induce mucosal and systemic immunity simultaneously. Furthermore, nanocarrier-based delivery systems avoid the need for sterile needles. This manuscript reviews the current knowledges on the vailable hepatitis B vaccines and introduces the recent advances in nanocarrier-based hepatitis B vaccine delivery systems. The challenges in the development of needle-free nanotechnologies are also discussed.Fil: Perazzo, Priscila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Rodriguez del Valle, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Sordelli, Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Gonzalez, Rodrigo Horacio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; ArgentinaFil: Nusblat, Alejandro David. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cuestas, María Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; Argentin

Rapid Identification of Histoplasma capsulatum Directly from Cultures by Multiplex PCR

The multiplex PCR developed from a suspension of the yeast fungi correctly identified fifty-one clinical of H. capsulatum var. capsulatum strains isolated from clinical samples and soil specimens. The multiplex PCR was developed by combining two pairs of primers, one of them was specific to the H. capsulatum and the other one, universal for fungi, turned out to be specific to H. capsulatum, regardless of the fungus isolate studied. Primers designed to amplify a region of about 390-bp (Hc I-Hc II) and a region of approximately 600-bp (ITS1-ITS4) were used to identify a yeast isolated as H. capsulatum when both regions could be amplified. Absolute agreement (100 % sensitivity) could be shown between this assay and the cultures of H. capsulatum according to their morphological characteristics. Failure to amplify the target DNA sequence by PCR with primers Hc I-Hc II in the presence of the ITS1-ITS4 amplicon in isolates of P. brasiliensis, Cryptococcus neoformans, Trichosporon spp, Candida glabrata, C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. krusei, or Penicillium marneffei was an unequivocal sign of the high specificity of this assay. The assay specificity was also found to be 100 %. Incipient yeast forms obtained from clinical samples were identified as H. capsulatum by the PCR assay described before the morphological characteristics were registered shortening the time of diagnosis.Fil: Elías, Nahuel Alejandro. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología. Área Virología; ArgentinaFil: Cuestas, María Luján. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología. Área Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sandoval, Macarena. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología. Área Virología; ArgentinaFil: Poblete, Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología. Área Virología; ArgentinaFil: López Daneri, Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología. Área Virología; ArgentinaFil: Jewtuchowicz, Virginia Marta. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología. Área Virología; ArgentinaFil: Iovannitti, Cristina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología. Área Virología; ArgentinaFil: Mujica, María Teresa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología. Área Virología; Argentin

Innovative Therapeutic and Delivery Approaches Using Nanotechnology to Correct Splicing Defects Underlying Disease

Alternative splicing of pre-mRNA contributes strongly to the diversity of cell- and tissue-specific protein expression patterns. Global transcriptome analyses have suggested that >90% of human multiexon genes are alternatively spliced. Alterations in the splicing process cause missplicing events that lead to genetic diseases and pathologies, including various neurological disorders, cancers, and muscular dystrophies. In recent decades, research has helped to elucidate the mechanisms regulating alternative splicing and, in some cases, to reveal how dysregulation of these mechanisms leads to disease. The resulting knowledge has enabled the design of novel therapeutic strategies for correction of splicing-derived pathologies. In this review, we focus primarily on therapeutic approaches targeting splicing, and we highlight nanotechnology-based gene delivery applications that address the challenges and barriers facing nucleic acid-based therapeutics.Fil: Suñé Pou, Marc. Universidad de Barcelona; EspañaFil: Limeres, María José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Moreno Castro, Cristina. Institute of Parasitology and Biomedicine “López-Neyra"; EspañaFil: Hernández Munain, Cristina. Institute of Parasitology and Biomedicine “López-Neyra"; EspañaFil: Suñé Negre, Josep M.. Universidad de Barcelona; EspañaFil: Cuestas, María Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Suñé, Carlos. Institute of Parasitology and Biomedicine “López-Neyra"; Españ