Antibiotic-free selection in E. coli: new considerations for optimal design and improved production

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>The increasing regulatory requirements to which biological agents are subjected will have a great impact in the field of industrial protein expression and production. There is an expectation that in a near future, there may be "zero tolerance" towards antibiotic-based selection and production systems. Besides the antibiotic itself, the antibiotic resistance gene is an important consideration. The complete absence of antibiotic-resistance gene being the only way to ensure that there is no propagation in the environment or transfer of resistance to pathogenic strains.</p> <p>Results</p> <p>In a first step, we have designed a series of vectors, containing a stabilization element allowing a complete elimination of antibiotics during fermentation. Vectors were further improved in order to include alternative selection means such as the well known poison/antidote stabilization system. Eventually we propose an elegant positive pressure of selection ensuring the elimination of the antibiotic-resistance gene through homologous recombination. In addition, we have shown that the presence of an antibiotic resistance gene can indirectly reduce the amount of expressed protein, since even in absence of selection pressure the gene would be transcribed and account for an additional stress for the host during the fermentation process.</p> <p>Conclusions</p> <p>We propose a general strategy combining plasmid stabilization and antibiotic-free selection. The proposed host/vector system, completely devoid of antibiotic resistance gene at the end of construction, has the additional advantage of improving recombinant protein expression and/or plasmid recovery.</p

Beneficial Effects of ε-Viniferin on Obesity and Related Health Alterations

Viniferin is a phenolic compound belonging to the group of stilbenoids. In particular, ε-viniferin is a dimer of resveratrol, found in many plant genders, among which grapes (Vitis vinifera) are a primary source. Due to the fact that ε-viniferin is mainly present in the woody parts of plants, their use as a source of this bioactive compound is a very interesting issue in a circular economy. Both, in vitro studies carried out in pre-adipocytes and mature adipocytes and in vivo studies addressed in mice show that ε-viniferin is able to reduce fat accumulation. Moreover, it prevents the development of some obesity co-morbidities, such as type 2 diabetes, dyslipidemias, hypertension and fatty liver. ε-viniferin can be absorbed orally, but it shows a very low bioavailability. In this scenario, further research on animal models is needed to confirm the effects reported in a great number of studies; to determine which metabolites are involved, including the main one responsible for the biological effects observed and the mechanisms that justify these effects. In a further phase, human studies should be addressed in order to use ε-viniferin as a new tool for obesity management, as a nutraceutical or to be included in functional foods.This research was funded by CIBEROBN under Grant CB12/03/30007 and the Government of the Basque Country (IT1482-22)

SCHIZOPHRÉNIE : Accompagner un itinérant dans son traitement

Pour information, contactez Mark Bédard au mark.bedard@umontréal.caRemerciements pour les conseils donnés: 1) Dominique Saheb, M. Ps., Psychologue, Clinicienne et chargée de cours à la Faculté de l'éducation permanente de l'Université de Montréal 2) Mathieu Gattuso, Ph.D., Psychologue, Leduc Ressources Humaines 3) Philippe Vincent, B. Pharm., M. Sc., Professeur adjoint de clinique à la faculté de pharmacie de l'Université de MontréalTravail réalisé dans le cadre du cours PHA2415Nous, étudiants en pharmacie de l'Université de Montréal, sommes heureux de vous présenter le résultat de notre implication dans un projet d’envergure communautaire portant sur les maladies mentales. Plus précisément, ce guide se penche sur l’étude des relations entre l’itinérance et la schizophrénie. En révisant la littérature, nous avons été en mesure de déterminer la portée de votre travail sur les itinérants. Une enquête faite auprès des sans-abris de la région de Montréal-Centre et de Québec montre une prévalence notable de personnes souffrant de schizophrénie chez les sans-abris qui ont recours aux centres d’aide. Selon cette enquête, l’intervention de première ligne devrait miser sur un meilleur encadrement des personnes victimes de troubles mentaux pour éviter qu’ils se retrouvent sans abri.Cet outil vise à apporter une aide considérable au travail d'intervenants sociaux d'organismes communautaires de Montréal travaillant avec une clientèle itinérante. Détaillant les symptômes de la maladie ainsi que les approches possibles par rapport au traitement de la schizophrénie, ce document vous offrira l’opportunité de mieux comprendre l’individu ayant un diagnostic de schizophrénie. De plus, il vous donnera aussi des outils pour mieux l’accompagner dans son traitement et favoriser sa motivation. C’est un guide pratique se voulant visuel et simple pour une utilisation quotidienne efficace

Influence of premedication with alprazolam on the occurrence of obstructive apneas

peer reviewe

Development and validation of a liquid chromatography coupled to mass spectrometer (LC-MS) method for the simultaneous quantification of estrone-3-sulfate, progesterone, estrone and estradiol in serum of mares and American bisons

peer reviewedSteroid concentrations in serum are fluctuating during pregnancy of many mammal species. The current knowledge about endocrinology of gestation is mainly based on immunoassays. However, the lack of specificity of these assays hampers the reliability of the results. In the present work, we developed and validated a methodology associating liquid chromatography (LC) and mass spectrometry (MS) to simultaneously quantify, with high specificity and accuracy, estrone-3-sulfate (E3S), progesterone (PRO), estrone (E1) and estradiol (E2) in serum of two different mammal species. The sample preparation procedure is based on a simple protein precipitation and a derivatization with dansyl chloride. After the chromatographical separation, compounds were analyzed with a triple-quadrupole mass spectrometer operating in multiple reaction monitoring. Mare and American bison serum samples were analyzed with the validated method and results were compared with concentrations measured with commercial radioimmunoassay (RIA), enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and chemiluminescent microparticle immunoassay (CMIA). Following these criterions: relative standard deviation <15% and relative bias <15%, lower limits of quantification of 0.5 ng/mL (E3S), 0.1 ng/mL (PRO) and 2 pg/mL (E1 and E2) were achieved. Most of the comparison between immunoassays and LC-MS showed poor correlation and proportional differences. Our LC-MS method is able to simultaneously quantify several steroid hormones with high specificity, accuracy and sensitivity in serum of two different mammal species. Our method constitutes a useful and performant tool for veterinary clinicians and LC-MS should thus be used to update and refine the current knowledge about the endocrinology of pregnancy in mammals

J. Agric. Food Chem.

Stilbene metabolites are attracting great interest because many of them exhibit similar or even stronger biological effects than their parent compounds. Furthermore, the metabolized forms are predominant in biological fluids; therefore, their study is highly relevant. After hemisynthesis production, isolation, and structural elucidation, three glucuronide metabolites for oxyresveratrol (ORV) were formed: trans-ORV-4′-O-glucuronide, trans-ORV-3-O-glucuronide, and trans-ORV-2′-O-glucuronide. In addition, two glucuronide metabolites were obtained for gnetol (GN): trans-GN-2′-O-glucuronide and trans-GN-3-O-glucuronide. When the metabolism of ORV and GN is studied in vitro by human and rat hepatic enzymes, four of the five hemisynthesized compounds were identified and quantified. Human enzymes glucuronidated preferably at the C-2′ position, whereas rat enzymes do so at the C-3 position. In view of these kinetic findings, rat enzymes have a stronger metabolic capacity than human enzymes. Finally, ORV, GN, and their glucuronide metabolites (mainly at the C-3 position) decreased nitric oxide, reactive oxygen species, interleukin 1β, and tumor necrosis factor α production in lipopolysaccharide-stimulated macrophages

Tourisme et territoire : gérer le passé et préparer l'avenir

Tourisme et territoire : gérer le passer pour préparer l'aveni

Fiches touristiques, Recueil – Volume 1.

editorial reviewedCe recueil de fiches consiste en une caractérisation des équipements touristiques parmi les plus importants en termes de territoire dédié en Wallonie. Le premier volume est principalement consacré aux attractions touristiques. Après un premier chapitre expliquant comment a été conçu le modèle de fiche, quatre types d'attractions sont caractérisées : « Attractions du pôle d'intérêt culturel », « Attractions du pôle d'intérêt naturel », « Attractions du pôle d'intérêt récréatif » et « Golfs ». Une dernière fiche s’intéresse aux « Infrastructures pour foires, salons et congrès ». La description proposée aborde notamment la répartition spatiale de ces différents types d’infrastructures (dont l'emprise au sol pour les équipements de grande taille), leurs caractéristiques touristiques (capacité d'accueil ou fréquentation, reconnaissance officielle et des utilisateurs), leur rapport au territoire (accessibilité, contraintes physiques et légales…) et leur dynamique spatio-temporelle. Avec ces fiches, le premier objectif de la recherche « Tourisme et Territoire : gérer le passé et préparer l'avenir (2020-2022) » était de mobiliser les données disponibles, voire de les créer, afin d’acquérir une meilleure connaissance territoriale du tourisme wallon. Les traitements ont également abouti à des recommandations quant à des améliorations possibles dans la gestion des données touristiques et à des pistes pour approfondir les liens entre les infrastructures touristiques et l’aménagement du territoire.Tourisme et territoire: gérer le passé et préparer l'aveni

Fiches touristiques, Recueil – Volume 2.

editorial reviewedCe recueil de fiches consiste en une caractérisation des équipements touristiques parmi les plus importants en termes de superficies consommées en Wallonie. Ce deuxième volume est dédié aux hébergements utilisés par les touristes. Onze types d’hébergement y sont caractérisés : « Aires d'accueil pour motor-homes », « Campings touristiques », « Centres de tourisme social », « Endroits de camp », « Hébergements issus de plateformes d'échanges (Airbnb, Vrbo / HomeAway) », « Hébergements touristiques de terroir et meublés de vacances », « Hôtels », « Parcs résidentiels de week-end », « Résidences secondaires cadastrales », « Terrains de caravanage », « Villages de vacances ». La description de ces différentes infrastructures aborde notamment leur répartition spatiale (dont l’emprise au sol pour les équipements de grande taille), leurs caractéristiques touristiques (capacité d’accueil ou fréquentation, reconnaissance officielle et par les utilisateurs), leur rapport au territoire (accessibilité, contraintes physiques et légales…) et leur dynamique spatio-temporelle. Avec ces fiches, le premier objectif de la recherche « Tourisme et Territoire : gérer le passé et préparer l'avenir (2020-2022) » était de mobiliser les données disponibles, voire de les créer, afin d’acquérir une meilleure connaissance territoriale du tourisme wallon. Les traitements ont également abouti à des recommandations quant à des améliorations possibles dans la gestion des données touristiques et à des pistes pour approfondir les liens entre les infrastructures touristiques et l’aménagement du territoire. Le premier volume de ce recueil est quant à lui principalement consacré aux attractions touristiques et explique comment a été conçu le modèle de fiche.Tourisme et territoire: gérer le passé et préparer l'aveni