Results of the study of intestine biocenosis in children

Department of Surgery № 2 with the course of pediatric surgery, Odessa National Medical University, Odessa, Ukraine, The 6th International Medical Congress for Students and Young Doctors, May 12-14, 2016Introduction. Changes in intestinal microbiocenosis play an important role in the development of functional disorders of the digestive tract in children. The aim of the study was to determine the diagnostic value of bacteriological studies of intestinal dysbiosis. Patients and methods. We performed a retrospective analysis of 127 results of fecal survey on dysbiosis in children aged 1 to 17 years with impaired bowel function, that turned to the Odessa Regional Children's Clinical Hospital in 2014-2015. Results. According to our research, more of the analysis on dysbiosis was conducted in patients of younger age group of 1 to 3 years ─ 68,8% of all cases. In the same age group, 81.4% examinationed children were bacteriological signs of dysbiosis of transient nature. There was a seasonal correlation of the research, since 44.8% of analyzes were carried out in the period from February to April, due to an increase in functional disorders of the digestive tract in children during this period. For the majority ofpatients (78.6%) fecal dysbiosis has been performed in occasion of functional disorders of the gastrointestinal tract. The most common conditional pathogens St. Aureus were detected in the youngest age groups: from 1 year up to 3 years ─ at 44.2%; 4 to 7 years old children ─ 42,3%. On the second place were sown fungi of the genus Candida and other yeast in 38.6% of patients, as well mainly in young children. On the third place - E.cloaceae (11,02%) and lactosonegative (10,8%) Escherichia, then Kl. Pneumoniae 9,4%, P.aeruginosa in 2.36% of patients, respectively. The remaining microorganisms disembarked in single cases. Results of analyzes, unfortunately, were ready on day 10, when was advanced clinical remission in patients and there was no need for a correction of infringements. Conclusions. Violation of intestinal microbiocenosis is most characteristic for young children, is rarely correlated with clinical data and is transient. Are most commonly defined conditional Pathogens St.Aureus and fungi of the genus Candida. However, the diagnostic value of the study is reduced due to the timing of the tests

Study of molecular mechanisms of proapoptotic action of novel heterocyclic 4-thiazolidone derivatives

Цель. Исследовать механизмы индукции апоптических сигнальных путей новыми гетероциклическими производными 4-тиазолидонов со структурно отличающимися боковыми группами в злокачественных клетках млекопитающих. Методы. Окрашивание клеток аннексином V, иодидом пропидия, DAPI, Вестерн-блот анализ. Результаты. Структурно различающиеся производные 4тиазолидонов обладают схожей цитотоксической активностью (ІС50 = 5 мкМ) и индуцируют апоптоз в лейкозных (Jurkat, CCRF-CEM) и карциномных (MCF-7, MDA-MD-231) клетках. Вестерн-блот анализом с использованием ряда антител к белкам, функционирующим на разных стадиях апоптоза, показано, что структура боковых групп 4-тиазолидонов может непосредственно влиять на биологическую активность этих проапоптических белков в лейкозных клетках-мишенях. В частности, соединения Les-3120 (пиразолин-замещенный тиазолидинон) и Les-3166 (конъюгат тиазолидинона и бензтиазола) индуцируют рецептор-опосредованный апоптоз в клетках Т-лейкемии человека линии Jurkat. 4-Иминотиазолидинон Les-3372 предопределяет апоптоз митохондриального типа, опосредованный белком AIF. Выводы. Установлены структурно-функциональные взаимосвязи между специфическими боковыми группами в молекулах 4-тиазолидонов и сигнальными путями апоптоза, что позволяет конструировать новые, «гибридные» препараты с потенциальной способностью одновременно запускать несколько апоптических каскадов в клетках-мишенях. Ключевые слова: опухолевые клетки, апоптоз, 4-тиазолидоны, каспазы, AIF, структурно-функциональные взаимосвязи.Мета. Дослідити механізми індукції апоптичних сигнальних шляхів новими гетероциклічними похідними 4-тіазолідонів зі структурно відмінними бічними групами у злоякісних клітинах ссавців. Методи. Фарбування клітин аннексином V, йодидом пропідію, DAPI, Вестерн-блот аналіз. Результати. Структурно відмінним похідним 4-тіазолідонів притаманна схожа цитотоксична активність (ІС50 = 5 мкМ), вони також індукують апоптоз у лейкозних (Jurkat, CCRF-CEM) і карциномних (MCF-7, MDA-MD-231) клітинах. Вестерн-блот аналізом із використанням низки антитіл до білків, функціонуючих на різних стадіях апоптозу, показано, що структура бічних груп 4-тіазолідонів може безпосередньо впливати на біологічну активність цих апоптичних білків у лейкозних клітинах-мішенях. Зокрема, сполуки Les-3120 (піразолін-заміщений тіазолідинон) та Les-3166 (кон’югат тіазолідинону і бензтіазолу) індукують рецептор-опосередкований апоптоз у клітинах Т-лейкемії людини лінії Jurkat. 4-Імінотіазолідинон Les-3372 зумовлює апоптоз мітохондріального типу, опосередкований білком AIF. Висновки. Встановлено структурно-функціональні взаємозв’язки між специфічними бічними групами у молекулах 4-тіазолідонів та сигнальними шляхами апоптозу, що дозволяє конструювати нові, «гібридні» препарати з потенційною здатністю одночасно запускати кілька апоптичних каскадів у клітинах-мішенях. Ключові слова: пухлинні клітини, апоптоз, 4-тіазолідони, каспази, AIF, структурно-функціональні взаємозв'язки.Aim. Mechanisms of induction of apoptosis signaling pathways in mammalian tumor cells treated by novel heterocyclic 4-thiazolidones with different side groups were studied. Methods. Annexin V/propidium iodide and DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole) staining of cells, Western-blot analysis of specific proteins. Results. 4-Thiazolidone derivatives of various structure possess similar cytotoxic activity in vitro (IC50 = 5 µM), and induce apoptosis in both leukemia (Jurkat, CCRF-CEM) and carcinoma (MCF-7, MDA-MD-231) cells. Western-blot analysis of the expression of several proteins of apoptosis signaling showed that the structure of lateral groups of 4-thiazolidones may directly affect biological activity of these proteins in leukemia cells. In particular, compounds Les-3120 (pyrazoline-substituted thiazolidinone) and Les-3166 (thiazolidinone-benzothiazole conjugate) induced receptor-mediated apoptosis in Jurkat T-leukemia cells. 4-Iminothiazolidinone Les-3372 caused mitochondrial type apoptosis, mediated by AIF protein. Conclusions. Structure-functional relationships between the presence of specific side groups in novel 4-thiazolidones and the signaling apoptotic pathways induced by these compounds have been established. The obtained results allow designing new, «hybrid» compounds which can simultaneously induce more than one apoptotic pathway in tumor cells. Keywords: tumor cells, apoptosis, 4-thiazolidones, caspases, AIF, structure-functional relationships

Study of molecular mechanisms of proapoptotic action of novel heterocyclic 4-thiazolidone derivatives

Цель. Исследовать механизмы индукции апоптических сигнальных путей новыми гетероциклическими производными 4-тиазолидонов со структурно отличающимися боковыми группами в злокачественных клетках млекопитающих. Методы. Окрашивание клеток аннексином V, иодидом пропидия, DAPI, Вестерн-блот анализ. Результаты. Структурно различающиеся производные 4тиазолидонов обладают схожей цитотоксической активностью (ІС50 = 5 мкМ) и индуцируют апоптоз в лейкозных (Jurkat, CCRF-CEM) и карциномных (MCF-7, MDA-MD-231) клетках. Вестерн-блот анализом с использованием ряда антител к белкам, функционирующим на разных стадиях апоптоза, показано, что структура боковых групп 4-тиазолидонов может непосредственно влиять на биологическую активность этих проапоптических белков в лейкозных клетках-мишенях. В частности, соединения Les-3120 (пиразолин-замещенный тиазолидинон) и Les-3166 (конъюгат тиазолидинона и бензтиазола) индуцируют рецептор-опосредованный апоптоз в клетках Т-лейкемии человека линии Jurkat. 4-Иминотиазолидинон Les-3372 предопределяет апоптоз митохондриального типа, опосредованный белком AIF. Выводы. Установлены структурно-функциональные взаимосвязи между специфическими боковыми группами в молекулах 4-тиазолидонов и сигнальными путями апоптоза, что позволяет конструировать новые, «гибридные» препараты с потенциальной способностью одновременно запускать несколько апоптических каскадов в клетках-мишенях. Ключевые слова: опухолевые клетки, апоптоз, 4-тиазолидоны, каспазы, AIF, структурно-функциональные взаимосвязи.Мета. Дослідити механізми індукції апоптичних сигнальних шляхів новими гетероциклічними похідними 4-тіазолідонів зі структурно відмінними бічними групами у злоякісних клітинах ссавців. Методи. Фарбування клітин аннексином V, йодидом пропідію, DAPI, Вестерн-блот аналіз. Результати. Структурно відмінним похідним 4-тіазолідонів притаманна схожа цитотоксична активність (ІС50 = 5 мкМ), вони також індукують апоптоз у лейкозних (Jurkat, CCRF-CEM) і карциномних (MCF-7, MDA-MD-231) клітинах. Вестерн-блот аналізом із використанням низки антитіл до білків, функціонуючих на різних стадіях апоптозу, показано, що структура бічних груп 4-тіазолідонів може безпосередньо впливати на біологічну активність цих апоптичних білків у лейкозних клітинах-мішенях. Зокрема, сполуки Les-3120 (піразолін-заміщений тіазолідинон) та Les-3166 (кон’югат тіазолідинону і бензтіазолу) індукують рецептор-опосередкований апоптоз у клітинах Т-лейкемії людини лінії Jurkat. 4-Імінотіазолідинон Les-3372 зумовлює апоптоз мітохондріального типу, опосередкований білком AIF. Висновки. Встановлено структурно-функціональні взаємозв’язки між специфічними бічними групами у молекулах 4-тіазолідонів та сигнальними шляхами апоптозу, що дозволяє конструювати нові, «гібридні» препарати з потенційною здатністю одночасно запускати кілька апоптичних каскадів у клітинах-мішенях. Ключові слова: пухлинні клітини, апоптоз, 4-тіазолідони, каспази, AIF, структурно-функціональні взаємозв'язки.Aim. Mechanisms of induction of apoptosis signaling pathways in mammalian tumor cells treated by novel heterocyclic 4-thiazolidones with different side groups were studied. Methods. Annexin V/propidium iodide and DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole) staining of cells, Western-blot analysis of specific proteins. Results. 4-Thiazolidone derivatives of various structure possess similar cytotoxic activity in vitro (IC50 = 5 µM), and induce apoptosis in both leukemia (Jurkat, CCRF-CEM) and carcinoma (MCF-7, MDA-MD-231) cells. Western-blot analysis of the expression of several proteins of apoptosis signaling showed that the structure of lateral groups of 4-thiazolidones may directly affect biological activity of these proteins in leukemia cells. In particular, compounds Les-3120 (pyrazoline-substituted thiazolidinone) and Les-3166 (thiazolidinone-benzothiazole conjugate) induced receptor-mediated apoptosis in Jurkat T-leukemia cells. 4-Iminothiazolidinone Les-3372 caused mitochondrial type apoptosis, mediated by AIF protein. Conclusions. Structure-functional relationships between the presence of specific side groups in novel 4-thiazolidones and the signaling apoptotic pathways induced by these compounds have been established. The obtained results allow designing new, «hybrid» compounds which can simultaneously induce more than one apoptotic pathway in tumor cells. Keywords: tumor cells, apoptosis, 4-thiazolidones, caspases, AIF, structure-functional relationships