The GnRH receptor and the response of gonadotrope cells to GnRH pulse frequency code. A story of an atypical adaptation of cell function relying on a lack of receptor homologous desensitization.

Brain control of the reproductive system is mediated through hypothalamic gonadotropin-releasing hormone (GnRH) which activates specific receptors (GnRHR) present at the surface of the pituitary gonadotropes to trigger secretion of the two gonadotropins LH and FSH. A unique feature of this system is the high dependence on the secretion mode of GnRH, which is basically pulsatile but undergoes considerable fluctuations in pulse frequency pattern in response to endogenous or external factors. How the physiological fluctuations of GnRH secretion that orchestrate normal reproduction are decoded by the gonadotrope cell machinery to ultimately control gonadotropin release and/or subunit gene transcription has been the subject of intensive studies during the past decades. Surprisingly, the mammalian GnRHR is unique among G protein-coupled receptor family as it lacks the carboxy-terminal tail usually involved in classical endocytotic process. Accordingly, it does not desensitize properly and internalizes very poorly. Both this atypical intrinsic property and post-receptor events may thus contribute to decode the GnRH signal. This includes the participation of a network of signaling pathways that differently respond to GnRH together with a growing amount of genes differentially sensitive to pulse frequency. Among these are two pairs of genes, the transcription factors EGR-1 and NAB, and the regulatory factors activin and follistatin, that function as intracellular autoregulatory feedback loops controlling respectively LHbeta and FSHbeta gene expression and hence, LH and FSH synthesis. Pituitary gonadotropes thus represent a unique model of cells functionally adapted to respond to a considerably fluctuating neuroendocrine stimulation, from short individual pulses to sustained GnRH as observed at the proestrus of ovarian cycle. Altogether, the data emphasize the adaptative reciprocal complementarity of hypothalamic GnRH neurones and pituitary gonadotropes to function as an original unit

A New Marker on Chicken Hematopoietic Cells is Defined by a Monoclonal Antibody Raised Against a V ß Chain of the Human TCR

In this paper, we show that a mouse monoclonal antibody, 111-427, specific for the V ß 5.3 chain of the human T-cell receptor (TCR) for antigen, also reacts with chicken hematopoietic cells. Our data indicate that the majority of 111-427 positive cells among peripheral blood leucocytes (PBL) are thrombocytes. This antibody also recognizes two in vitro cell lines, III-C5, an IL-2-dependent T-cell-line and HD11, a macrophage cell line. In addition, erythrocytes and a minor subpopulation of thymus and spleen cells are also stained by the monoclonal antibody (mAb). No specific immunoprecipitation could be detected from 125I radiolabeled cell lysates. By Western blotting techniques, the 111- 427 mAb identifies a single band of apparent molecular weight 91 kD, unaffected by reduction, from III-C5 and HD11 cell lysates. This band is absent in negative cell control lysates. On thrombocytes, the apparent molecular weight of the band is shifted to 87 kD. These results indicate that the mAb does not recognize the chicken T-cell receptor for antigen, but a cell surface marker shared primarily between thrombocytes and erythrocytes. This new chicken cell marker is compared to other cell surface markers in avian or mammalian species that present some analogies in their tissue distribution

Multicenter trial of one HLA-DR–matched or mismatched blood transfusion prior to cadaveric renal transplantation

Multicenter trial of one HLA-DR–matched or mismatched blood transfusion prior to cadaveric renal transplantation.BackgroundThe beneficial effect of blood transfusions before cadaveric renal transplantation on allograft survival, although previously well documented, has become controversial in light of their adverse effects. Recently, it has been suggested that their clinical benefits are due to HLA-DR sharing between the blood donor and recipient.MethodsIn this prospective study, 144 naive patients were randomly assigned to receive one unit of blood matched for one-HLA-DR antigen (N = 49), or one unit of mismatched blood (N = 48), or to remain untransfused (N = 47). Graft survival and acute rejection rate were analyzed in 106 cadaveric renal allograft recipients receiving the same immunosuppressive protocol.ResultsGraft survival was similar in the three groups at one and five years: 91.7 and 80% in untransfused patients, 90.3 and 79.3% in patients transfused with one DR-antigen–matched unit, and 92.3 and 83.7% in patients transfused with HLA-mismatched blood. The difference in the incidence of six-month post-transplant acute rejections was not statistically significant in the three groups: 12 out of 36, 33.3% in nontransfused patients; 6 out of 31, 19.4% in patients transfused with one DR-matched blood; and 13 out of 39, 33.3% in patients transfused with mismatched blood.ConclusionThe results of our prospective randomized trial showed that in a population of naive patients, one transfusion mismatched or matched for one HLA-DR antigen given prior to renal transplantation had no significant effect on the incidence and severity of acute rejection, and did not influence overall long-term graft outcome. Considering the potentially deleterious adverse effects of blood transfusions, the costs, and the considerable logistical efforts required to select and type blood donors, such a procedure cannot be recommended in a routine practice for patients awaiting cadaveric kidney transplantation

Le rôle ambigu du facteur de transcription SF-1 dans l’expression génique du récepteur de la GnRH. Leçons de la transgenèse

Compte tenu du rôle primordial du récepteur de la GnRH dans le fonctionnement de l’axe de reproduction, la connaissance des assemblages moléculaires qui président à l’expression histospécifique et à la régulation de ce gène doit permettre, à terme, de mieux comprendre la physiologie et la physiopathologie de la fonction gonadotrope. Pour élucider ces mécanismes, nous avons mis en œuvre deux approches complémentaires in vivo et in vitro. Nous avons tout d’abord isolé le promoteur hypophysaire de ce gène et analysé son activité par transfection transitoire dans deux lignées de type gonadotrope, les cellules αCT3-1 et LβT2. Nous avons ainsi défini une première combinatoire de facteurs de transcription impliqués dans l’expression histospécifique maximale du gène du récepteur de la GnRH, où le facteur stéroïdogénique SF-1 joue un rôle décisif en interagissant avec des facteurs de transcription apparentés aux familles GATA et LIM à homéodomaine. De même, en démontrant la fonction stimulatrice du PACAP (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide) sur l’activité du promoteur, nous avons mis en évidence l’implication critique de SF-1 et son interaction avec un facteur apparenté à CREB. Ces avancées nous ont alors conduits à analyser l’activité de ce promoteur par transgenèse chez la Souris en utilisant le gène rapporteur de la phosphatase alcaline placentaire humaine. En accord avec les données obtenues in vitro, ce promoteur hypophysaire s’est avéré capable de conférer au transgène une expression spécifique des cellules gonadotropes. Il est également capable de cibler l’expression de la phosphatase alcaline dans plusieurs zones du système nerveux central, notamment le complexe hippocampo-septal. Certains de ces tissus n’expriment pas SF-1, suggérant qu’in vivo son rôle ne serait pas aussi déterminant que le prédisaient les expériences réalisées in vitro. De manière surprenante, au cours de l’ontogenèse hypophysaire, le transgène s’exprime dès 13,5 jours postconception alors que le facteur SF-1 n’est pas encore présent. In vivo, SF-1 ne serait donc pas nécessaire à l’activation du gène du récepteur de la GnRH pendant les étapes précoces du développement. Ces résultats sont cohérents avec les données obtenues après invalidation générale ou ciblée dans l’hypophyse du gène codant SF-1, suggérant que le récepteur de la GnRH s’exprime malgré l’absence de ce facteur. Connaître le ou les facteurs responsables de l’activation du gène du récepteur de la GnRH lors des étapes précoces du développement devrait permettre de mieux cerner le rôle de SF-1, non seulement dans l’expression du gène du récepteur mais, plus généralement, dans la physiologie et la physiopathologie de la fonction gonadotrope