Alteraciones Histopatológicas y de los niveles de Inmunoglobulina G en la Criptococosis inducida en mus musculus balb/c a diferentes tiempos de infección

The present study had the purpose of evaluate histopatological alterations and IgG levels in induced criptococosis in Mus musculus BALB/c "mouse" at different times of infection. For that it was worked with a culture of Cryptococcus neoformans and 45 specimens of Mus musculus BALB/c of both sexes, of 45 days of age and approximately 25g weigh, in 5 of those randomly chosen natural infection by C.neoformans was discarded by means of the test of negative tint with 10% nigrosine in brain samples and lungs, the 40 remaining were distributed at random in control group and experimental group of 20 especimens each one and were subdivided in 4 subgroups of 5 specimens each one. The mice of the experimental group were inoculated intraperitoneally with 0,5 mL of a suspension from the fungus in a similar concentration to the tube Nº 3 of of Mac Farland's Nefelometer, and for the control group it was used 0,5 mL of sterile physiologic saline solution (SSF). At the 10, 15, 20 and 25 days of the inoculation, there were taken samples of blood to evaluate the levels of IgG in serum, and after the sacrifice there were extracted the encephal, lungs, spleen, liver and kidneys for their macroscopic and histological evaluation after their conservation in 10% formol and were later colorated with Hematoxylin. eosin. In relation to the control group in the organs of the experimental group were observed macroscopic changes as: size Increase in longitude presenting marked hepatomegalia and esplenomegalia, change of color, hemorrhagic aspect and presence of abscesses that went increasing in number at more time of infection and histopatological alterations were also observed at the days 10 and 15 as hiperemia in meninxes, chronicle inflammatory infiltration in meninxes, alveolus and interstice in lung, liver and kidney; edema in cerebral cortex; necrosis in cerebral cortex, spleen, liver and kidney; areas of hemorrhages in brain, lung, and perirrenal adipose tissue; tendency to form granuloma in lung, and liver; hiperplasia of lymphatic nodules and megacarioblastos in spleen; proliferation of lymphocytes in spleen, sinusoids dilation in liver; Cryptococcus in meninxes, brain in bilateral form, lung, liver and kidney. At the 20 and 25 days of infection besides the histopatological alterations observed at the days 10 and 15, it was observed granulomatose chronic inflammatory Infiltration in meninxes and lung; hiperemy in cerebral cortex; chronicle inflammatory infiltration in spleen; multiple necrosis focuses in liver and kidney; abundant Cryptococcus in meninxes, brain, spleen, lung, liver and kidney. The evaluation of the levels of anticriptococosic IgG of experimental group and control was carried out by means of ELISA'S test, being the control group negative for anticriptococosic IgG, and the experimental group positive with titles of 1/80, 1/320, 1/160, 1/160 corresponding to the 10, 15, 20, and 25 days of infection. It was concluded that at more times of infection bigger histopatological alterations were presented in the evaluated organs and the levels of IgG increases until the 15 days of infection and then they diminish starting from the 20 days of infection. The test of correlation of Pearson was used, to determine if there is relationship between the size of the evaluated organs and the time of infection with C. neoformans, and it was found that it is highly significant, and the test of Chi squared to determine the dependence relationship between the histopalogical alterations and the levels of Ig G and it was found that dependence relationship exists.El presente estudio tuvo por finalidad evaluar las alteraciones histopatológicas y los niveles de IgG en la criptococosis inducida en Mus musculus BALB/c “ratón” a diferentes tiempos de infección. Se trabajó con Cryptococcus neoformans y 45 ejemplares de Mus musculus BALB/c de ambos sexos, de 45 días de edad y de aproximadamente 25g, en 5 de los cuales elegidos al azar se descartó infección natural por C.neoformans mediante la prueba de tinción negativa con nigrosina al 10 % en muestras de cerebro y pulmones, con los 40 restantes se distribuyeron al azar en grupo control y grupo experimental de 20 ejemplares cada uno y subdividiéndose en 4 subgrupos de 5 ejemplares cada uno. Los ratones del grupo experimental fueron inoculados intraperitonealmente con 0,5 mL de una suspensión del hongo a una concentración similar al tubo No 3 del Nefelómetro de Mac Farland, y para el grupo control se utilizó 0,5 mL solución salina fisiológica (SSF) estéril. A los 10, 15, 20 y 25 días de la inoculación, se tomaron muestras de sangre para evaluar los niveles de IgG en suero, y luego del sacrificio se extrajeron el encéfalo, los pulmones, el bazo, el hígado y los riñones para su evaluación macroscópica e histológica luego de su conservación en formol al 10% y su posterior coloración con Hematoxilina eosina. Se observó cambios macroscópicos como: Aumento de tamaño en longitud presentándose marcada hepatomegalia y esplenomegalia, cambio de color, aspecto hemorrágico y presencia de abscesos que iban aumentando en número a mayor tiempo de infección y alteraciones histopatológicas que variaron de acuerdo al tiempo de infección, así tenemos que : a los 10 y 15 días se observó hiperemia en meninges, infiltración inflamatoria crónica en meninges , alvéolos e intersticio en pulmón, hígado y riñón; edema en corteza cerebral; necrosis en corteza cerebral , bazo, hígado y riñón; zonas de hemorragias en cerebro, pulmón, y tejido adiposo perirrenal; tendencia a formar granuloma en pulmón, e hígado; hiperplasia de nódulos linfáticos y de megacarioblastos en bazo; proliferación de linfocitos en bazo, dilatación de sinusoides en hígado; Cryptococcus en meninges, cerebro en forma bilateral, pulmón, higado y riñón. A los 20 y 25 días de infección además de las alteraciones histopatológicas observadas a los 10 y 15 días, se encontró: Infiltración inflamatoria crónica granulomatosa en meninges y pulmón; hiperemia en corteza cerebral; infiltración inflamatoria crónica en bazo; múltiples focos de necrosis en hígado y riñón; abundantes Cryptococcus en meninges, cerebro, bazo, pulmón, hígado y riñón. La evaluación de los niveles de IgG anticriptococósico del grupo experimental y control se realizó mediante la prueba de ELISA, siendo el grupo control negativo para IgG anticriptococósico, y el grupo experimental positivo con títulos de 1/80, 1/320, 1/160, 1/160 correspondientes a los días 10, 15, 20, y 25 días de infección. Se concluyó que a mayores tiempos de infección se presentaron mayores alteraciones histopatológicas en los órganos evaluados y los niveles de IgG aumentan hasta los 15 días de infección y luego disminuyen a partir de los 20 días de infección. Se utilizó la prueba de correlación de Pearson, para determinar si hay relación entre el tamaño de los órganos evaluados y el tiempo de infección con C. neoformans, y la prueba de Chi cuadrado para determinar la relación de dependencia entre los niveles de alteración histopatológica y los niveles de Ig G encontrandose que existe relación de dependencia entre estos

EFECTO DEL COMPLEJO ENZIMÁTICO PRODUCIDO POR Aspergillus oryzae SOBRE PRODUCCIÓN DE ETANOL POR Saccharomyces cerevisiae

RESUMENPara determinar el efecto del complejo enzimático producido por Aspergillus oryzae CECT 2094 y CECT 2095 sobre la producción de etanol por Saccharomyces cerevisiae en condiciones de laboratorio, se acondicionaron cuatro sistemas de fermentación empleando botellas con 400 ml de caldo melaza, a las que se adicionó extracto enzimático a las concentraciones de 2, 4, y 6% (v/v), y un control sin extracto enzimático. Los sistemas fueron inoculados con S. cerevisiae e incubados a temperatura ambiente durante 48h. en condiciones de anaerobiosis, luego se procedió a medir la concentración de alcohol expresada en porcentaje, en cada uno de los sistemas de fermentación. El mayor porcentaje de alcohol se obtuvo en el tratamiento con 4% de extracto enzimático, con una media de 4,47% de alcohol y una biomasa final de 1,36 x 108 cel/ml a diferencia del control en el que se obtuvo 3,73% de alcohol y la biomasa final de 9,92X107 cel/ml. En todos los tratamientos se observó una disminución del Brix (14 a 6,57ºB). Se concluye que el complejo enzimático producido por A. oryzae tiene efecto positivo sobre la producción de etanol por S. cerevisiae en condiciones de laboratorio.Palabras clave: Aspergillus oryzae, complejo enzimático, producción de etanol.ABSTRACTIn order to determine the effect of the concentration of the enzyme complex produced by Aspergillus oryzae CECT 2094 and CECT 2095 on the production of ethanol by Saccharomyces cerevisiae in laboratory conditions, four fermentation’s systems were conditioned using bottle with 400 ml molasses broth, which was added enzymatic extract at concentrations of 2, 4, and 6% (v / v) and a control without enzyme extract. The systems were inoculated with S. cerevisiae and incubated at environment temperature for 48hrs under anaerobicconditions, then it was proceeded to measure the concentration of alcohol expressed in percent in each of thefermentation systems. The highest percentage of alcohol was obtained in the treatment with 4% extract enzyme,with an average of 4,47% alcohol and a biomass at the end of 1,36 x 108 cells / ml as opposed to the control which was obtained 3,73% and its biomass at the end of fermentation was 9,92 X107 cel / ml. In all treatments was observed a decrease of the Brix (14 a 6,57ºB). The conclusion was that the enzyme complex produced by A. oryzae has an positive effect on ethanol production by S. cerevisiae under laboratory conditions.Key words: Aspergillus oryzae, enzyme complex, ethanol´s production

Comparación de los medios Ogawa y LöwensteinJensen en el aislamiento de Mycobacterium tuberculosis de pacientes con tuberculosis pulmonar. Hospital Regional Docente de Trujillo, Perú

The present investigation compare quantitative and qualitatively the culturing in Ogawa and Löwenstein Jensen media, for the isolation of M. tuberculosis in samples of saliva BK (+) in patients of Tuberculosis Program Regional Hospital of Trujillo, Peru. We tried 54 samples of saliva BK (+), being sowed by duplicate in the means of culture(culturing) in study and they were observed every three days for 2 months, the identification of M. tuberculosis was realized by means of the niacin test, according to the technology(skill) described by the National Institute of Health. One thought that 85.19 % of the samples was positive in both means; 39.13 % it(he,she) had growth eugénico in the way Ogawa and 28.26 % in the Löwenstein Jensen, having significant difference statistically. The difference of time of growth between both means was of 1.3 days favorably in the way Ogawa and the difference of the number of colonies between both means belonged to 7.43, not existing significant difference, in both. Therefore, one concludes that both means of culture(culturing) have the same efficiency in the isolation of M. tuberculosis.La presente investigación tuvo por objetivo comparar cuantitativa y cualitativamente los cultivos en los medios Ogawa y Löwenstein-Jensen para el aislamiento de M. tuberculosis en muestras de esputo BK (+) de pacientes del Programa de Tuberculosis del Hospital Regional Docente de Trujillo, Perú. Se procesaron 54 muestras de esputos BK (+), sembrándose por duplicado en los medios de cultivo en estudio y se observaron cada tres días durante 2 meses, la identificación de M. tuberculosis se realizó mediante la prueba de niacina, según la técnica descrita por el Instituto Nacional de Salud. Se encontró que el 85.19% de las muestras fueron positivas en ambos medios; el 39.13% tuvo crecimiento eugénico en el medio Ogawa y un 28.26% en el Löwenstein-Jensen, teniendo diferencia significativa estadísticamente. La diferencia de tiempo de crecimiento entre ambos medios fue de 1.3 días favorable en el medio Ogawa y la diferencia del número de colonias entre ambos medios fue de 7.43, no existiendo diferencia significativa, en ambos. Por lo tanto, se concluye que ambos medios de cultivo tienen la misma eficacia en el aislamiento de M. tuberculosis

Evaluación comparativa de Agar Sangre de Carnero y Agar Sangre Humana en el aislamiento de Streptococcus beta hemolíticos de pacientes con faringitis del Hospital Almanzor Aguinaga Asenjo de Chiclayo, Perú. 2006

It were evaluated comparatively sheep blood agar and human blood agar, in the isolation of beta hemolytic Streptococcus of patients from Almanzor Aguinaga Asenjo from Chiclayo between January and December of 2006. The investigation was realized with 242 samples of patients with pharyngitis, every sample was scattered in three plates with human blood agar and in three plates with sheep blood agar. The plates with both mediums were distributed to be incubated paralelaly in three different atmospheres: in aerobiosis, with 5% of CO and in 2 anaerobiosis. The macroscopic and microscopically colonies compatible with Streptococcus genus it was realized the catalasa test, and them it was cultivated in Todd – Hewitt broth. The isolations were identified as beta hemolytic Streptococcus by the Lancefield Precipitation method, using specificity well known group serum. The comparative evaluation of the used culture mediums demonstrate that, human blood agar allow the isolation of beta hemolytic Streptococcus as well as sheep blood agar; although it does not find a significantly difference in the frequency of isolation between both culture mediums. It was found also that the anaerobic incubation allows a high number of isolations of beta hemolytic Streptococcus as well as in human blood agar and sheep blood agar. It was determined also that the incubation by 48 hours allows a high number of isolations in both mediums.Se evaluó comparativamente el Agar sangre de carnero y el Agar sangre humana, en el aislamiento de Streptococcus beta hemolíticos de pacientes del hospital Almanzor Aguinaga Asenjo de Chiclayo entre Enero y Diciembre del 2006. La investigación se realizó con 242 muestras de pacientes con faringitis, cada muestra fué sembrada en tres placas con Agar sangre humana y en tres placas con Agar sangre de carnero. Las placas de ambos medios fueron distribuidas para ser incubadas paralelamente en tres atmósferas diferentes, en aerobiosis, con 5% de CO y en 2 anaerobiosis. A las colonias macroscópica y microscópicamente compatibles con el género Streptococcus se les realizó la prueba de la catalasa, y se las cultivó en caldo Todd-Hewitt. Los aislamientos se identificaron como Streptococcus beta hemolíticos por el método de Precipitación de Lancefield, mediante sueros de agrupamiento de especificidad conocida. La evaluación comparativa de los medios de cultivo utilizados demostró, que el Agar sangre humana permite el aislamiento de Streptococcus beta hemolíticos al igual que el Agar sangre de carnero, puesto que no se encontró una diferencia significativa en la frecuencia de aislamiento entre ambos medios de cultivo. Así mismo se encontró que la incubación anaeróbica permite el mayor número de aislamientos de Streptococcus beta hemolíticos tanto en el Agar sangre humana como en el Agar sangre de carnero. También se determinó que la incubación por 48 horas permite el mayor número de aislamientos en ambos medios

Frecuencia y susceptibilidad a los antimicrobianos de Proteus mirabilis aislados de pacientes con infecciones urinarias. “Hospital Belén de Trujillo”, Perú.

The frequency and antimicrobial susceptibility of Proteus mirabilis was determined in patient with urinary tract infections, treated at the “Hospital Belén de Trujillo”, in 2009. A total of 111 urine samples was evaluated, obtained by harvesting technique clean and planted on selective and differential media for isolation of Enterobacteriaceae. To the compatible isolates with Proteus genus was realized identification tests for P. mirabilis, obtaining a 6.31% positivity. By age group this microorganism is presented with a 14.29% in young patients of 15 years, 42.85% from 15 to 50 years and 28.57% in patients over 50 years, while by sex P. mirabilis was presented in 28.57% and 71.43% in men and women. The Kirby-Bauer method was realized on the antimicrobial susceptibility, using Mueller-Hinton medium and using antimicrobial discs recommended by the Clinical and Laboratory Standards Institute. P. mirabilis had a sensibility of 100% to gentamicin and imipenem, 71.43% to cephalothin, amoxicillin/clavulanate, ceftriaxone and ciprofloxacin, and 28.57% to ampicillin and trimethoprim /sulfamethoxazole. It was concluded that P. mirabilis had a low frequency to cause urinary tract infections and high sensibility to gentamicin and imipenem antimicrobial.Se determinó la frecuencia y susceptibilidad a los antimicrobianos de Proteus mirabilis, en pacientes con infecciones urinarias, atendidos en el “Hospital Belén de Trujillo”, durante el año 2009. Se evaluó un total de 111 muestras de orina, obtenidas mediante la técnica de recolección limpia y sembradas en medios selectivos y diferenciales para el aislamiento de Enterobacteriaceae. A los aislamientos compatibles con el género Proteus se les realizó las pruebas de identificación para P. mirabilis, obteniendo un 6,31% de positividad. Por grupo etario este microorganismo se presentó con un 14,29% en pacientes menores de 15 años; 42,85% de 15 a 50 años y 28,57% en mayores de 50 años; mientras que por sexo P. mirabilis se presentó en un 28,57% en hombres y 71,43% en mujeres. La susceptibilidad a los antimicrobianos de P. mirabilis se realizó mediante el método de Kirby-Bauer, empleando el medio de Mueller-Hinton y usando los discos de antimicrobianos recomendados por el Clinical and Laboratory Standards Institute. P. mirabilis presentó una sensibilidad de 100% a gentamicina e imipenem; 71,43% a cefalotina, amoxicilina/ácido clavulánico, ceftriaxona y ciprofloxacina; y 28,57% a ampicilina y trimetoprima/sulfametoxazol. Se concluyó que P. mirabilis presentó una baja frecuencia como causante de infecciones del tracto urinario y una alta sensibilidad a los antimicrobianos gentamicina e imipenem

Efecto de la savia liofilizada de Musa acuminata Colla “plátano de seda” sobre la respuesta inmune de Mus musculus BALB/c frente a Escherichia coli O157: H7

This study attempted to determine the effect of lyophilized sap from Musa acuminata Colla on “in vitro” activation of peritoneal macrophages and antibody production in BALB/c mice infected with Escherichia coli O157:H7. Macrophage activation was determined by phagocytic index and microbicidal activity of murine peritoneal macrophages which were distributed in three groups: experimental A and experimental B, both had different concentrations of lyophilized sap (SLM), while control group had minimal essential medium. After that, we added E. coli O157:H7, so the concentration of SLM was 16,3 ug/mL in experimental A and 8,75 ug/mL in experimental B. Then we took samples in order to determine the phagocytic index and microbicidal activity. Antibody production was studied in BALB/c mice randomly allocated in three groups: experimental A, experimental B and control. Experimental A and B were orally administered with SLM at 20 mg/kg and 10 mg/kg respectively, control group was administered with sterile normal saline. They were infected with E. coli O157:H7 and then blood samples were collected in order to determine the antibody titer. Results showed that macrophages stimulated with SLM at 8,75 ug/mL had an increasing phagocytic index compared with the others. Besides microbicidal activity and antibody titer obtained in both experimental A and B were higher than control group. As a conclusion, lyophilized sap from Musa acuminata Colla increases phagocytic index, microbicidal activity and antibody production in BALB/c mice infected with Escherichia coli O157:H7.Se determinó el efecto de la savia liofilizada de Musa acuminata Colla “plátano de seda” sobre la activación “in vitro” de macrófagos peritoneales y la producción de anticuerpos en Mus musculus BALB/c infectados experimentalmente con Escherichia coli O157:H7. Para la activación “in vitro”, los macrófagos fueron distribuidos en 03 sistemas: experimentales A y B estimulados con diferentes concentraciones de savia liofilizada de Musa acuminata Colla (SLM) y control estimulado con Medio Mínimo Esencial. Posteriormente, se adicionó E. coli O157:H7, teniendo una concentración de savia de 16,3 ug/mL en el experimental A y 8,75 ug/mL en el B. Luego se tomaron muestras para determinar el índice fagocítico y la actividad microbicida. Para la producción de anticuerpos, se utilizaron 03 grupos, dosificando a los experimentales A y B con SLM en concentraciones de 20 mg/kg y 10 mg/kg de peso respectivamente y al control con solución salina fisiológica, luego fueron infectados con E. coli O157:H7 y se les extrajo muestras de sangre para la titulación de anticuerpos. Los resultados en la activación de macrófagos indicaron que los estimulados con 8,75 ug/mL de SLM presentaron un mayor índice fagocítico que los otros. El índice microbicida y eltítulo de anticuerpos en los grupos con SLM en ambas concentraciones fueron mayores que el control. Concluyéndose, que la savia liofilizada de Musa acuminata Colla favorece el aumento del índice fagocítico, la actividad microbicida y el título de anticuerpos en Mus musculus BALB/c infectados experimentalmente con E. coli O157:H7