TopBP1 functions with 53BP1 in the G1 DNA damage response

TopBP1 (Topoisomerase II β binding protein) est une protéine qui sert de point de contrôle du cycle cellulaire et qui colocalise avec ATR (Ataxia telangiectasia and Rad3 related) aux sites de stress réplicatif. Nous démontrons ici que TopBP1 colocalise également avec 53BP1 (p53 binding protein 1) aux sites de cassure double brin, mais seulement lors de la phase G1 du cycle cellulaire. Le recrutement de TopBP1 aux sites de stress réplicatif est dépendant des domaines 1 et 2 plus 7 et 8 de BRCT, tandis que le recrutement aux sites de cassure double brin est dépendant des domaines 1 et 2 plus 4 et 5 de BRCT. Les domaines 4 et 5 de BRCT interagissent avec 53BP1, qui est nécessaire pour le recrutement de TopBP1 aux sites de cassure double brin en phase G1 du cycle cellulaire. Comme TopB1 contient un domaine important pour l'activation d'ATR, nous avons testé s'il contribuait au point de contrôle G1 du cycle cellulaire. En irradiant des cellules en phase G1, puis en contrôlant leur entrée en phase S, nous avons observé un défaut de ce point de contrôle après déplétion de TopBP1, 53BP1 ou ATM à l'aide de petits ARN interférents. TopBP1 pourrait donc servir d'intermédiaire pour la fonction de point de contrôle du cycle cellulaire de 53BP1

TopBP1 functions with 53BP1 in the G1 DNA damage checkpoint

The replication stress protein TopBP1 co-localizes with 53BP1 at sites of DNA damage and mediates its G1 cell cycle checkpoint function

Characterization of lptA and lptB, Two Essential Genes Implicated in Lipopolysaccharide Transport to the Outer Membrane of Escherichia coli

The outer membrane (OM) of gram-negative bacteria is an asymmetric lipid bilayer that protects the cell from toxic molecules. Lipopolysaccharide (LPS) is an essential component of the OM in most gram-negative bacteria, and its structure and biosynthesis are well known. Nevertheless, the mechanisms of transport and assembly of this molecule in the OM are poorly understood. To date, the only proteins implicated in LPS transport are MsbA, responsible for LPS flipping across the inner membrane, and the Imp/RlpB complex, involved in LPS targeting to the OM. Here, we present evidence that two Escherichia coli essential genes, yhbN and yhbG, now renamed lptA and lptB, respectively, participate in LPS biogenesis. We show that mutants depleted of LptA and/or LptB not only produce an anomalous LPS form, but also are defective in LPS transport to the OM and accumulate de novo-synthesized LPS in a novel membrane fraction of intermediate density between the inner membrane (IM) and the OM. In addition, we show that LptA is located in the periplasm and that expression of the lptA-lptB operon is controlled by the extracytoplasmic σ factor RpoE. Based on these data, we propose that LptA and LptB are implicated in the transport of LPS from the IM to the OM of E. coli