24 research outputs found

    Avaliação Citogenética em Indivíduos Ocupacionalmente Expostos ao Chumbo

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    Realizou-se uma avaliação citogenética de indivíduos ocupacionalmente expostos ao chumbo. As anomalias que mais se apresentaram elevadas foram os Broken eggs e as binucleações celulares. A média das freqüências de células binucleadas no grupo exposto foi 3,5 vezes superior a do grupo-controle e a média das freqüências de Broken eggs no grupo exposto foi 16,5 vezes superior à  freqüência apresentada pelo grupo controle. Os dados demonstraram um alto grau de citotoxidade nos indivíduos do grupo exposto ao chumbo

    Epidemiological, molecular and citogenetics analyses of Hypopharynx Cancer in Goiania, Goiás, Brazil

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    Submitted by Luciana Ferreira ([email protected]) on 2014-11-07T12:10:47Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Cesar Augusto Sam Tiago Vilanova Costa - 2006.pdf: 1500361 bytes, checksum: 3401843db66da8f77a90a41b7a08f826 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5)Approved for entry into archive by Luciana Ferreira ([email protected]) on 2014-11-07T12:14:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Cesar Augusto Sam Tiago Vilanova Costa - 2006.pdf: 1500361 bytes, checksum: 3401843db66da8f77a90a41b7a08f826 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5)Made available in DSpace on 2014-11-07T12:14:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Cesar Augusto Sam Tiago Vilanova Costa - 2006.pdf: 1500361 bytes, checksum: 3401843db66da8f77a90a41b7a08f826 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2006-09-29Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqHypo pharynx is the under region of pharynx and serves both respiratory and digestive tract, acting as a passageway to air and food. It’s composed by squamous nonkeratinized epithelial tissue. Statistical studies indicates that 85 to 90% of neoplasies rush pyriform sinus and are characterized by fast dissemination and metastization. Epidemiological trends of hypo pharynx cancer in Goiania on period 1998 to 2003 analyzing data derived from Cancer Registry of Association for Cancer Combat of Goias, shows that the relative survival rate for men diagnosed with hypo pharynx cancer was 38% past 60 months while women presented a survival rate of 100%. Surgery was the treatments that present fewer rates (34%) and chemotherapy was associated to the most survival rate (54%). Patients that use tobacco presented a survival rate of 43% while non-tabagists present a rate of 60% of surviving. Relative survival rate for patients diagnosed with hypo pharynx tumor was 38% and estimated censure for 5 years was just 5%. Survival rate was extremely decreased due to 45% of cases were diagnosed in advanced stages of disease. It is important to point out that preventive campaign is important to evade the increasing of these pathologies that are related to behavior of tabagism and etilism. Present study also evaluates cytogenetically individuals diagnosed with hypo pharynx cancer. Cytogenetic analysis of exfoliated cells is largely used to evaluate cytotoxic and genotoxic alterations on people exposed to potentially mutagens. A number of 36 individuals were analyzed, representing case group, and 36 healthy individuals composed control group. Data was collected and analysis was performed to estimate main nuclear alterations. Standard protocols were adopted to collect and counting cells. Micronuclei test was used to determinate the frequency of cytotoxic and genotoxic alterations. Besides than micronuclei others alterations like broken-eggs, binucleated cells and piknotic nuclei are good markers of cell alterations because they are resulted from cytotoxic events frequently related to occupational exposure. Behaviors like tabagism, etilism and exposition time were also investigated to correlate cells alterations. The correlation between micronuclei frequencies of case and control group test doesn’t show statistic difference. Broken egg and binucleated cells were the most observed anomalies on case group and showed up significant statistic difference (p=0.03). Results indicates a high grade of cytotoxic anomalies on individuals with hypo pharynx cancer, specially in tabagists and chronic etilists individuals, behaviors that are correlated to induct and promote tumors in susceptible people due their capabilities to affect cell cycle. Studies about relationship between Human Papillomavirus (HPV) and cancer development are performed since 80’s. Although the correlation of HPV and cervical cancer are well established, the possible role of HPV and head and neck cancer are still unclear. Among controversial factors of HPV and carcinogenesis of squamous epithelial cells, there is a viral incidence that oscillates from 0 to almost 100% on studies that includes a myriad of viral genome detect methods, such Blotting and PCR. Importance of HPV infection and epithelial carcinogenesis is related to capabilities of High risk HPV 16 and 18 to promote cell alterations, by tumor suppressor proteins inactivation, tumor suppressor genes blockage and insertions of HPV oncogenes. On present study, HPV detection and typing was performed on tumors derived from hypo pharynx of 24 patients diagnosed with cancer (CID-O: C12,0 to C13,9). All samples was submitted to PCR with generic primers MY09/11 and GP05/06, as specific primers to HPV 6, 11, 16, 18, 33, 35, 45 and 58. Results shows that on 9 of 24 samples, HPV were detected by generic primers (a rate of 37,5%) and HPV types 16, 18 and 45 were identified, with a sample presenting coinfection of HPV 16 and 18.A hipofaringe, região inferior da faringe, também chamada de laringofaringe ou faringolaríngea, serve aos sistemas respiratório e digestivo, funcionando como passagem para o ar e os alimentos. É composta de tecido epitelial escamoso estratificado não-queratinizado, com grande quantidade de glândulas seromucosas. As estatísticas mostram que entre 85 e 90% dos cânceres que acometem a hipofaringe são carcinomas espino-celulares. A lesão inicial no seio piriforme apresenta-se macroscopicamente sob o aspecto de um nódulo ou úlcera, tendo como característica principal, a rápida disseminação pela submucosa. Atualmente, com a associação de cirurgias radicais e radioterapia pós-peratória aumentou-se o controle locorregional destes tumores, contudo, a sobrevida global não sofreu alterações em decorrência das metástases à distância, o que não representa uma falha no tratamento realizado e sim uma evolução natural devido à característica invasiva desse tipo de neoplasia. Os tumores malignos de hipofaringe não são freqüentes, representando entre 5 a 10% das neoplasias das vias aerodigestivas superiores e apenas 0,5 % de todos os cânceres. Porém, do conjunto das neoplasias malignas da região da cabeça e pescoço, tumores de hipofaringe apresentam o pior prognóstico. A avaliação das tendências epidemiológicas apresentadas pelo câncer de hipofaringe em Goiânia no período de 1998 a 2003, analisando os dados disponíveis pelo Registro de Câncer de Base Populacional da Associação de Combate ao Câncer em Goiás, mostrou uma sobrevida relativa dos pacientes do sexo masculino diagnosticados com câncer de hipofaringe foi de 38% após 60 meses de segmento, enquanto que para o feminino apresentou-se uma sobrevida máxima de 100%, com todas as pacientes curadas. Dentre os tratamentos realizados, a cirurgia apresentou a menor taxa de sobrevida (34%) ao passo que para a quimioterapia foi associada uma sobrevida de 54%. A sobrevida dos pacientes tabagistas (43%) se mostrou muito inferior à dos indivíduos que não eram tabagistas (60%). Em fim, ao longo de cinco anos de segmento deste estudo, a taxa de sobrevida relativa para portadores de tumores malignos da hipofaringe foi de aproximadamente 38%, estimada para cinco anos com uma censura de apenas 5%. A taxa de sobrevida relativa é diminuída uma vez que cerca de 45% dos casos, o diagnóstico é feito tardiamente. O presente estudo também avaliou as alterações citogenéticas nucleares de pacientes portadores de câncer na região da hipofaringe. Foram analisados 36 indivíduos do grupo de casos, constituído de pacientes diagnosticados com tumores de hipofaringe, e 36 indivíduos saudáveis do grupo controle. Para obtenção dos dados foram considerados hábitos de consumo como tabagismo e etilismo e principalmente o tempo de exposição. Foram contadas 5000 células por indivíduo e as freqüências de micronúcleo, binucleadas, broken eggs e demais aberrações nucleares, foram calculadas para ambos os grupos. A freqüência de micronúcleo mostrada entre o grupo controle e o de casos não apresentaram diferença estatística. Porém, foi observado, por parte do grupo de casos, um grande número de células com broken eggs e binucleadas. Tais resultados demonstraram diferença estatística (p = 0,03). A binucleação e a formação de dois núcleos em forma de broken egg sugere que agentes como o tabaco e o alcoolismo crônico podem estar relacionados com a indução e progressão de tumores em pessoas susceptíveis, devido à capacidade desses mutágenos afetarem o ciclo celular. Dentre os fatores que geram controvérsias, podemos destacar o achado freqüente de variados tipos de HPV em mucosa oral normal, numa incidência que varia de 0% a quase 100% em diversos estudos, com numerosos métodos de identificação, incluindo entre eles um método altamente sensível, a PCR. A importância da infecção pelo HPV na carcinogênese de células epiteliais é suportada pela capacidade dos HPVs de alto risco, principalmente os tipos 16 e 18, de imortalizar os queratinócitos orais, quando em análise in vitro. O processo de imortalização pode envolver a desativação de proteínas supressoras de tumores pré-formadas pelas oncoproteínas virais, o bloqueio da transcrição de genes supressores de tumores como resultado da inserção do oncogene do HPV, ou a estimulação da transcrição do oncogene celular pela inserção de seqüências ativadoras de transcrição derivadas do próprio genoma do HPV. No presente estudo, o grupo amostral foi constituído de 24 pacientes diagnosticados com carcinoma de hipofaringe. Os casos foram obtidos do Registro de Câncer de Base Populacional de Goiânia/GO da Associação de Combate ao Câncer em Goiás. Todos os pacientes considerados foram diagnosticados como carcinomas de hipofaringe (CID-O: C12.0 a C13.9). Todas as amostras foram submetidas a uma PCR com os primers genéricos MY09/11 e GP05/06 para detecção em amplo espectro do genoma de HPV. Posteriormente, utilizou-se a mesma abordagem, com os primers tipo-específico para HPVs 6, 11, 16, 18, 33, 35, 45 e 58. Em 9 das 24 amostras utilizadas, foi observada amplificação com os primers genéricos, identificando-se o genoma de HPV em 37,5% (6/24) dos casos. Em 67% (6/9) das amostras, o genoma viral foi detectado por MY09/11 e em 33% (3/9) pelos primers GP05/06. As amostras positivas foram então submetidas a uma segunda PCR para a genotipagem dos HPVs, tendo sido observados os tipos 16, 18 e 45. Os tipos virais mais associados ao câncer da hipofaringe, no presente estudo, foram os HPV 16 e 18, presente em 6 amostras e o HPV45, encontrado em 1 amostra. Em um paciente foi observada a co-infecção de tipos virais de HPVs 16 e 18. Contudo, mesmo diante de tantas pesquisas realizadas, há muito para ser explorado, apesar de uma hipótese possível para a carcinogênese ser a interação sinérgica de carcinógenos químicos, virais, oncogenes e genes supressores de tumores

    Expression of multiple drug resistance gene (MDR) on different cell lines treated with ruthenium (III) complexes

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    Submitted by Marlene Santos ([email protected]) on 2014-12-11T16:01:41Z No. of bitstreams: 2 Tese -Cesar Augusto Sam Tiago Vilanova Costa - 2013.pdf: 2101811 bytes, checksum: 1cf67584701df4c2df1009b299703f7b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5)Approved for entry into archive by Jaqueline Silva ([email protected]) on 2014-12-11T19:00:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese -Cesar Augusto Sam Tiago Vilanova Costa - 2013.pdf: 2101811 bytes, checksum: 1cf67584701df4c2df1009b299703f7b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5)Made available in DSpace on 2014-12-11T19:00:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese -Cesar Augusto Sam Tiago Vilanova Costa - 2013.pdf: 2101811 bytes, checksum: 1cf67584701df4c2df1009b299703f7b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-02-21Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESNão consta resumo em outro idioma.Foi com a descoberta da atividade antimitótica da cisplatina por Rosenberg na década se 1960 e 70, em seu célebre estudo com bactérias Escherichia coli, que surgiu o interesse em sintetizar e entender as bases moleculares responsáveis pelo mecanismo de ação biológica dos compostos metálicos, visto que a própria cisplatina foi inicialmente sintetizada por Peyrone nos idos de 1840. Os primeiros estudos envolvendo o uso de complexos metálicos de rutênio como agentes antitumorais foram realizados por Tochter no final dos anos 1980 (Dale et al., 1992). Àquela época, foi inferido que todos os compostos de rutênio apresentavam como mecanismo de ação, a sua ligação com o DNA, formando adutos e desencadeando processos celulares de natureza deletéria que, por fim, levariam a morte celular. É interessante lembrar que esse é o mesmo mecanismo de ação dos compostos de platina mais aceitos nos dias atuais. Sadler e Dyson (2003) estudando compostos de rutênio que continham cloro em sua estrutura, como o cloreto de cis-(dicloro)tetraaminorutênio(III) [cis-[RuCl2(NH3)4]Cl], observaram que estes compostos apresentavam mecanismos de ação biológica muito parecidos com os apresentados pela cisplatina [Pt(NH3)2Cl2], onde a hidrólise da ligação Ru–Cl pode ser fortemente influenciada pela natureza dos coligantes presentes na estrutura do rutenato, como grupamentos amino ou até mesmo pela presença de átomos de carbono. A alta concentração de cloretos no sangue permite a esses compostos metálicos, levados por proteínas séricas, chegar até as células e atravessar sua membrana celular e nuclear. Uma vez no interior do núcleo, a ligação Ru–Cl é hidrolisada, devido a queda abrupta da concentração de cloretos (que é cerca de 25 vezes menor), levando o composto a se ligar ao DNA, mais especificamente à posição N7 da base nitrogenada guanina. Por outro lado, compostos que não possuem cloro em sua estrutura, parecem apresentar mecanismos de ação diferentes ao padrão "ligação ao DNA". Sabe-se que compostos que apresentam carboxilatos em sua molécula, como a carboplatina, oxaliplatina e o próprio ditionato de cis-tetraammino(oxalato)rutênio(III) [Cis-[Ru(C2O2)(NH3)4]2(S2O6)], uma vez no interior das células, são hidrolisados muito mais lentamente do que os compostos ricos em cloretos, o que leva a um acúmulo desses compostos no citoplasma, diminuindo sua migração até o núcleo e, assim reduzindo a sua capacidade de se ligar ao DNA. Mas se o DNA não é o alvo desses compostos, então, quem poderia ser? Essa pergunta está sendo respondida com recentes estudos, que revelaram a interação desses compostos, ricos em carboxilatos, com uma miríade de proteínas e enzimas, que vão desde catepsinas, chegando até mesmo à Pgp (Melchart & Sadler, 2008). Estudos realizados por Dyson e colaboradores (2007), utilizando alguns inibidores da proteína Pgp, como fenoxazinas e antracenos, coordenados com compostos de rutênio, observaram que estes novos complexos não somente inibiram a ação da enzima, como também induziram morte celular, demonstrando uma multifuncionalidade. Seguindo essa linha de pensamento, acreditamos que a capacidade do composto ditionato de cistetraammino(oxalato)rutênio(III) em induzir apoptose nas células tumorais, assim como os baixos níveis de expressão de Pgp apresentados pelas células tratadas, corroboram os resultados previamente observados por outros grupos, utilizando compostos de rutênio similares. A resistência a fármacos mediada por Pgp é o mecanismo de MDR mais estudado atualmente. Apesar do desenvolvimento de novos agentes antitumorais, a MDR mediada pela Pgp protege as células de possíveis agentes citotóxicos, limitando a eficácia dos tratamentos quimioterápicos em pacientes com câncer. Atualmente, a extensa maioria dos inibidores da Pgp disponíveis estão associados a vários inconvenientes, que limitam o seu uso no reestabelecimento da eficácia da quimioterapia antineoplásica, após o aparecimento do fenótipo MDR. A procura de inibidores de Pgp alternativos, com um processo sintético exequível e efeitos secundários reduzidos, continua a ser um desafio para os químicos, farmacêuticos e pesquisadores. É nesse contexto que estão sendo desenvolvidos e estudados novos agentes antitumorais que possam agir como inibidores de Pgp, apresentando um efeito dual, ou até mesmo multifuncional, no tratamento clínico das neoplasias malignas. Muito tem se discutido que a próxima geração de fármacos antitumorais poderá ser formada por substâncias que se ligam a mais do que um único alvo terapêutico, o que poderia acelerar tratamento contra a doença, reduzindo o número e a concentração de fármacos que deveriam ser administrados, como os coquetéis atualmente utilizados, e até mesmo aumentando a adesão ao tratamento por parte do paciente. No presente trabalho, estudamos dois complexos de rutênio, o cloreto e o ditionato de rutênio(III), que se apresentam como promissores no possível desenvolvimento de um novo fármaco antitumoral. Essa promessa transparece no fato de ambos serem de síntese química relativamente simples (processo sintético exequível) e, principalmente, por apresentarem efeito biológico de interesse em células tumorais, como citotoxicidade e indução de morte celular, especialmente por apoptose. Pelo que foi observado nos resultados de nossa pesquisa, os complexos aqui estudados, podem constituir um modelo para o estudo de novos agentes anticancerígenos com concomitante capacidade de não induzir MDR. Esta característica se mostrou muito evidente sobre a linhagem leucêmica K-562, onde os níveis de expressão de MDR1, após o tratamento com os rutenatos, foram muito inferiores aos apresentados pelas células tumorais tratadas com o fármaco controle Cisplatina. Ainda, é importante pontuar que o composto ditionato de cistetraammino(oxalato)rutênio(III) apresentou efeito citotóxico em ambas as linhagens tumorais K-562 e A549, sem contudo induzir altos níveis de expressão de Pgp (MDR1), apresentados pelos fármacos platinados. Assim, estudos mais aprofundados sobre a estrutura e funcionamento biológico desses complexos de rutênio, representam um ponto de partida interessante para o desenvolvimento de fármacos multifuncionais e de efeito desejável, auxiliando na delineação de estudos clínicos dirigidos a grupos selecionados de pacientes que reúnam características genotípicas e fenotípicas preditivas de máxima resposta terapêutica com mínima toxicidade. Posteriormente, estes estudos podem levar às realizações de testes diagnósticos e farmacológicos mais eficazes que poderão ser estabelecidos como rotina voltada para uma melhor definição de tratamentos. Isso traria um maior sucesso no teste de novos medicamentos e reduziria os custos e riscos, minimizando o tempo gasto para aprovação de um novo medicamento e a sua disponibilização para a sociedade

    Extração e Purificação de DNA em Material Biológico Parafinado

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    Elaborou-se uma técnica de isolamento de DNA total de amostras parafinadas. Ela possibilitou a obtenção de DNA de qualidade, de forma rápida, prática e eficiente. No estudo, foram utilizados blocos de parafina, que continham tecido tumoral de biópsias de câncer da orofaringe, das quais, cerca de 55% se amplificaram, e amostras de câncer de mama, que foram submetidas ao mesmo tratamento, e o DNA obtido foi amplificado para todos os casos

    Análise do Polimorfismo no Gene CIP2C29 em Camundongos Swiss e sua Influência no Tratamento do Câncer

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    Resumo: realizou-se uma identificação alélica dos genes CYP2C29 de 19 camundongos SWISS, buscando estabelecer um perfil alélico do grupo estudado para posteriores estudos de metabolização de fármacos. O DNA obtido de amostras de sangue total foi submetido a PCR usando primers específicos para a região genômica das proteínas CYP2C29 de camundongo (homólogo de CYP2C9 em humanos). A frequência do alelo selvagem CYP2C29*1 (MEs) foi de somente 21% (4/19) no grupo estudado. Os resultados revelaram que os alelos mutados, geralmente tidos como MPs, perfizeram um total de 79% dos indivíduos estudados. Os resultados deste trabalho serão importantes para futuros estudos de metabolismo de drogas utilizando esta linhagem de camundongos, a fim de se estabelecer uma possível correlação entre o genótipo individual e sua capacidade de metabolização celular. Palavras-chave: Farmacogenômica. Farmacogenética. Câncer. Citocromo. Metabolismo. Camundongo

    O Teste de Micronúcleo como Ferramenta Qualitativa de Dano Genético: aspectos citotécnicos

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    A freqüência de micronúcleos em células esfoliadas humanas pode ser utilizada como uma ferramenta endógena potente, que reflete o efeito de agentes genotóxicos e carcinogênicos sobre os tecidos alvos, nos quais os carcinomas podem se desenvolver. Caso não haja um rígido controle na confecção das lâminas, o citogeneticista incorrereria em erros que poderiam subestimar a freqüência de lesões nucleares e levar a uma avaliação quantitativa errônea dos dados. Realizou-se então um teste qualitativo da técnica de coloração de micronúcleo, que possibilitou a identificação e controle dos diversos fatores interferentes que poderiam atuar sinergisticamente, prejudicando a qualidade das lâminas a serem analizadas

    Padronização e Comparação de Métodos Aplicados à Extração de RNA Total em Serpentes do Gênero Micrurus

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    Áreas de genoma e transcriptoma permitem a análise do perfil genético das toxinas produzidas por serpentes do gênero Micrurus, a partir da extração de RNA total das glândulas de veneno. A obtenção de RNA com boa qualidade é uma etapa fundamental para gerar dados de alto valor científico. Neste estudo, adaptações foram realizadas no processo de extração pelo método de Trizol, resultando em dois protocolos modificados que evidenciam a importância de cada etapa para a obtenção do material genético. O objetivo foi padronizar a metodologia utilizada para a extração de RNA total em glândulas de veneno de serpentes. O RNA total foi extraído de glândulas de veneno colhidas a fresco de espécimes de Micrurus surinamensis, acondicionadas em RNAlater® e purificados pela metodologia de Trizol. No protocolo 1 foi utilizado o homogeneizador, com a manutenção das amostras em gelo, e o protocolo 2 as especificações do método original proposto foram mantidas, excluindo apenas a etapa de homogeneização. O material obtido foi submetido à análise por espectrofotometria e eletroforese. Os dados foram analisados por estatística descritiva e comparativa, utilizando o teste T. Contrapondo a mesma quantidade de tecido, as amostras submetidas à extração pelo protocolo 1 apresentaram uma quantidade média de RNA superior àquela obtida pelo protocolo 2, com médias de 1560 ng (+366ng) e 132 ng (+31,5ng) de RNA (p=0,0005). Apesar das modificações nos protocolos, a integridade do produto extraído nos dois grupos foi equivalente, com valores de 1,94 (+0,022ng) e 1,96 (+0,013ng) (p=0,55). Conclui-se que o protocolo 1, que utiliza a homogeneização, deve permitir maior contato do Trizol com o tecido, garantindo melhor desnaturação das proteínas teciduais, enquanto as baixas temperaturas devem interromper a atividade enzimática das RNases, permitindo a obtenção de maiores concentrações de RNA e conservando a qualidade do material extraído. Standardization and Comparison of Methods Applied to Total RNA Extraction in Snakes of the Genus Micrurus Genome and transcriptome allow the analysis of the genetic profile of the toxins produced by snakes of the genus Micrurus, from the extraction of total RNA of the venom glands. To obtain RNA with good quality is a fundamental step to generate data of high scientific value. In this study, adaptations were made in the RNA extraction process by the Trizol method, with two modified protocols that highlight the importance of each step to obtain the genetic material. The objective of this study was to standardize the methodology used for the extraction of total RNA in the venom glands of coralsnakes. Total RNA was extracted from venom glands from specimens of Micrurus surinamensis, conditioned on RNAlater®, and purified by the Trizol methodology. In protocol 1 the homogenizer was used with the maintenance of the samples on ice, and protocol 2 the specifications of the original method proposed were maintained, excluding only the homogenization step. The material obtained was analyzed by spectrophotometry and electrophoresis. The data were analyzed by descriptive and comparative statistics, using the T-test. Comparing the same amount of tissue, the samples submitted to the extraction by protocol 1 presented an average amount of RNA superior to that obtained by protocol 2, with averages of 1560 ng (+ 366ng) and 132 ng (+ 31.5ng) RNA (p = 0.0005). Despite the modifications in the protocols, the integrity of the product extracted in the two groups was equivalent, with values of 1.94 (+ 0.022ng) and 1.96 (+ 0.013ng) (p = 0.55). It is concluded that protocol 1, which uses homogenization, should allow a greater contact of Trizol with the tissue, guaranteeing better denaturation of the tissue proteins, while the low temperatures should interrupt the enzymatic activity of the RNases, allowing to obtain higher concentrations of RNA and preserving the quality of the extracted material

    Atividade citotóxica e antitumoral do extrato bruto etanólico de Spermacose poaya A. Saint-Hilaire (Rubiacee) em células normais e tumorais in vitro

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    Spermacoce poaya é uma espécie pertencente à família Rubiaceae, tribo Spermacoceae, gênero Borreria, popularmente conhecida no Brasil como poaia-do-campo, poaia-rasteira e poaia-do-arador. Sua infusão é utilizada em casos de bronquite, asma e pneumonia. Nenhum estudo fitoquímico, farmacológico e/ou toxicológico foi encontrado na literatura acerca dessa espécie até o presente momento. No presente estudo, foi investigada a atividade citotóxica do extrato bruto de S. poaya por meio dos testes colorimétricos MTT e azul de tripano. As linhagens celulares HFF-1 e K-562 foram expostas por 24 h a diferentes concentrações do extrato bruto etanólico das folhas de S. poaya. Os resultados mostraram que, para as células normais (HFF-1), o extrato bruto é antiproliferativo nas concentrações de 0,001 mg.mL-1 e 0,1 mg.mL-1; já para as células tumorais (K-562), não apresentou efeito citotóxico em nenhuma das concentrações testadas. Torna-se necessária a continuação dos estudos com essa planta utilizando outras linhagens celulares tumorais e, principalmente, células normais, para que seu efeito citotóxico possa ser comprovado

    Cytotoxic activity of the etha nolic crude extract of Spermacoce poaya A. Saint-Hilaire (Rubiaceae) in normal and tumor cells in vitro

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    v. 8, n. 1, p. 25-32, 2011.Submitted by João Ferreira Sobrinho Junior ([email protected]) on 2013-09-20T19:03:33Z No. of bitstreams: 1 ATIVIDADE CITOTÓXICA E ANTITUMORAL DO EXTRATO BRUTO ETANÓLICO DE Spermacoce poaya A. Saint-Hilaire .PDF: 1519275 bytes, checksum: 10b1d7178f29e704c17fd0cdbb44a0ac (MD5)Approved for entry into archive by Claudia Moura ([email protected]) on 2013-10-26T20:10:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ATIVIDADE CITOTÓXICA E ANTITUMORAL DO EXTRATO BRUTO ETANÓLICO DE Spermacoce poaya A. Saint-Hilaire .PDF: 1519275 bytes, checksum: 10b1d7178f29e704c17fd0cdbb44a0ac (MD5)Approved for entry into archive by Claudia Moura ([email protected]) on 2013-10-26T20:11:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ATIVIDADE CITOTÓXICA E ANTITUMORAL DO EXTRATO BRUTO ETANÓLICO DE Spermacoce poaya A. Saint-Hilaire .PDF: 1519275 bytes, checksum: 10b1d7178f29e704c17fd0cdbb44a0ac (MD5)Made available in DSpace on 2013-10-26T20:11:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ATIVIDADE CITOTÓXICA E ANTITUMORAL DO EXTRATO BRUTO ETANÓLICO DE Spermacoce poaya A. Saint-Hilaire .PDF: 1519275 bytes, checksum: 10b1d7178f29e704c17fd0cdbb44a0ac (MD5) Previous issue date: 2011Spermacoce poaya is a species that belongs to the family Rubiaceae, tribe Spermacoce, and genus Borreria, popularly known in Brazil as “poaia-do-campo”, “poaia-rasteira”, and “poaia-do-arador”. The infusion is used in cases of bronchitis, asthma, and pneumonia. So far, no phytochemical, pharmacological, and/or toxicological studies about this species have been found in the literature. In the present study, we investigated the cytotoxic activity of S. poaya crude extract using the colorimetric assays MTT and trypan blue. The cellular strains HFF-1 and K-562 were exposed for 24 h to different concentrations of the ethanolic crude extract of S. poaya leaves. The results showed that, for normal cells (HFF-1), the crude extract is antiproliferative at the concentrations of 0.001 mg.mL-¹ and 0.1 mg.mL-¹; on the other hand, for the tumor cells (K-562), it showed no cytotoxic effect at the tested concentrations. It is necessary to continue the studies about this plant using other tumor cell lines and, mainly, normal cells, so that its cytotoxic effect can be testified.Spermacoce poaya é uma espécie pertencente à família Rubiaceae, tribo Spermacoceae, gênero Borreria, popularmente conhecida no Brasil como poaia-do-campo, poaia-rasteira e poaia-do-arador. Sua infusão é utilizada em casos de bronquite, asma e pneumonia. Nenhum estudo fitoquímico, farmacológico e/ou toxicológico foi encontrado na literatura acerca dessa espécie até o presente momento. No presente estudo, foi investigada a atividade citotóxica do extrato bruto de S. poaya por meio dos testes colorimétricos MTT e azul de tripano. As linhagens celulares HFF-1 e K-562 foram expostas por 24 h a diferentes concentrações do extrato bruto etanólico das folhas de S. poaya. Os resultados mostraram que, para as células normais (HFF-1), o extrato bruto é antiproliferativo nas concentrações de 0,001 mg.mL-1 e 0,1 mg.mL-1; já para as células tumorais (K-562), não apresentou efeito citotóxico em nenhuma das concentrações testadas. Torna-se necessária a continuação dos estudos com essa planta utilizando outras linhagens celulares tumorais e, principalmente, células normais, para que seu efeito citotóxico possa ser comprovado
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