Seminal characteristics evaluation of the male broiler breeder selected by comb development to reproduction

The selection of cocks for reproduction by comb development has been employed usually in the aviculture; however, studies have been necessary to establish the efficiency of this method of selection. The objective of this paper was to compare the seminal characteristics in cocks selected to reproduction by comb development. Sixty-five broiler breeder males (AgRoss strain) were selected to breed at 20th week old and divided in two groups, A: birds without comb (n=33) and B: birds with comb (n=32). To evaluate seminal characteristics, semen was collected weekly between 24 to 71 weeks of age. Group means were compared by the Student's t and Wilcoxon tests while profile analysis were performed for to verify effects of group, age, and group x age. Seminal volume, sperm concentration, motility and vigor were greater (p < 0.01) for group B from 24-31 weeks of age. Percentage of sperm morphological defects was greater in group A during 24-27 (p < 0.01) and 32-35 (p < 0.05) weeks of age. Mean body weight was higher for group B between 24-39 weeks of age (p < 0.05) and for group A between 60-71 weeks of age. There were no main effects of group for seminal characteristics or body weight (p >; 0.05), but effects of age (p < 0.001) and group x age interaction were significant (p < 0.05), except for vigor (p >; 0.05). Low or no correlations were observed between seminal characteristics and body weight. In conclusion, the method to select cocks by observation of comb development at 20 weeks of age showed efficient.A seleção de galos para a reprodução pelo desenvolvimento da crista vem sendo empregada rotineiramente na avicultura, sendo necessários estudos para verificar a eficiência deste método de seleção. Este trabalho teve por objetivo comparar as características seminais de galos selecionados para a reprodução pelo desenvolvimento da crista. Foram utilizados 65 galos matrizes da linhagem AgRoss, selecionados na 20ª semana de idade e divididos em dois grupos: grupo A, animais sem crista desenvolvida (n=33), e grupo B, animais com crista desenvolvida (n=32). Foram realizadas colheitas semanais de sêmen dos galos de 24 a 71 semanas de idade, para avaliar as características seminais. Foram realizados os testes t de Student e de Wilcoxon para comparar os grupos e análises de perfis para verificar efeitos do grupo, idade e interação grupo x idade. Os valores de volume seminal, concentração espermática, motilidade e vigor foram maiores (p < 0,01) para o grupo B no período de 24-31 semanas de idade. A percentagem de defeitos espermáticos para o grupo A foi maior nos períodos de 24-27 (p < 0,01) e de 32-35 semanas de idade (p < 0,05). O peso corporal foi maior (p < 0,05) para os animais do grupo B no período entre 24-39 semanas de idade e para os galos do grupo A no período de 60-71 semanas de idade. Foram observados efeitos da idade e interação grupo x idade para as características seminais, exceto para vigor. Em conclusão, a observação do desenvolvimento da crista na 20ª semana de idade é um método eficiente na seleção de galos para a reprodução

The effect of n- 3 polyunsaturated fatty acid supplementation on immune and reproductive parameters in dairy cows:: a review

Em rebanhos leiteiros, a suplementação com ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs) é considerada uma ferramenta importante para diminuir o balanço energético negativo de vacas leiteiras durante o periparto e contribuir para a reprodução e sistema imunológico. Os efeitos da suplementação com PUFA sobre estes sistemas têm sido pouco explorados na literatura. Os PUFAs mais comuns na dieta dos ruminantes são Ômega-3 (n-3 PUFA) como ácido linolênico e Ômega-6 (n-6 PUFA) como ácido linoleico. Esta revisão abordará os aspectos gerais do n-3 PUFA, seus efeitos mais relevantes no sistema imune, principalmente seus efeitos nas células imunes, bem como seus efeitos na parte reprodutiva, tanto in vivo como in vitro, enfatizando a ação do n-3 PUFA através de mecanismos moleculares. A incorporação de n-3 PUFAs na dieta de vacas leiteiras exerce efeitos positivos na fertilidade e imunidade. Mais estudos a fim de explorar a função do n-3 PUFA na modulação do sistema imune e parâmetros reprodutivos, desde a investigação da biologia básica até a aplicação a campo de modo clínico e preventivo, devem ser requeridos.In dairy cattle, supplementation with polyunsaturated fatty acids (PUFAs) is considered to be an important tool to decrease the negative energy balance of periparturient dairy cows and improve the reproductive and immune systems. The most common PUFAs added to ruminant diets are omega 3 (n-3 PUFA) as linolenic acid and omega 6 (n-6 PUFA) as linoleic acid. This paper aims to review the potential effects of n-3 PUFA. We consider the effects of n-3 PUFA on the bovine immune system, especially on immune cells, and on in vivo and in vitro reproductive parameters, emphasizing how n-3 PUFAs act as modulators through one or more molecular mechanisms. The incorporation of n-3 PUFA in the dairy cow diet has positive effects on animal fertility and immunity. Future research on n-3 PUFA should be more explored concerning reproduction and immune function, starting from the investigation of basic biology to their potential for application in the clinical and preventive medicine fields

Avaliação simultânea das membranas plasmática, acrossomal e mitocondrial de espermatozoides de carneiros por sondas fluorescentes

Neste experimento, foi definida uma combinação de sondas fluorescentes: iodeto de propídio (PI), aglutinina de Pisum sativum conjugada ao isotiocionato de fluoresceína (FITC-PSA) e JC-1. Para esta proposta, quatro ejaculados de três carneiros (n=12), que apresentavam motilidade >80% e alterações morfológicas <10%, foram diluídos em meio TALP e divididos em duas alíquotas. Uma alíquota foi submetida a três ciclos de flash frozen e descongelação, para induzir danos nas membranas celulares e distúrbios na função mitocondrial. Três tratamentos foram preparados com as seguintes proporções preestabelecidas de sêmen fresco: sêmen submetido a flash frozen: 0:100 (T0), 50:50 (T50) e 100:0 (T100). As amostras foram coradas no protocolo proposto e avaliadas por microscopia de epifluorescência. Para integridade de membrana plasmática, detectada pela sonda PI, foi obtida a equação: v=1,09+0,86X (R2=0,98). O acrossomo intacto, verificado pela sonda FITC-PSA, produziu a equação: v=2,76+0,92X (R2=0,98). O alto potencial de membrana mitocondrial, marcada em vermelho-alaranjado pelo JC-1, foi estimado pela equação: v=1,90+0,90X (R2=0,98). As equações lineares resultantes demonstraram que a técnica é eficiente e prática para avaliação simultânea das membranas plasmática, acrossomal e mitocondrial em espermatozoides de carneirosIn this experiment, it was defined a protocol of fluorescent probes combination: propidium iodide (PI), fluorescein isothiocyanate-conjugated Pisum sativum agglutinin (FITC-PSA), and JC-1. For this purpose, four ejaculates from three different rams (n=12), all showing motility 80% and abnormal morphology 10%, were diluted in TALP medium and split into two aliquots. One of the aliquots was flash frozen and thawed in three continuous cycles, to induce damage in cellular membranes and to disturb mitochondrial function. Three treatments were prepared with the following fixed ratios of fresh semen:flash frozen semen: 0:100 (T0), 50:50 (T50), and 100:0 (T100). Samples were stained in the proposal protocol and evaluated by epifluorescence microscopy. For plasmatic membrane integrity, detected by PI probe, it was obtained the equation: Ŷ=1.09+0.86X (R2=0.98). The intact acrosome, verified by the FITC-PSA probe, produced the equation: Ŷ=2.76+0.92X (R2=0.98). The high mitochondrial membrane potential, marked in red-orange by JC-1, was estimated by the equation: Ŷ=1.90+0.90X (R2=0.98). The resulting linear equations demonstrate that this technique is efficient and practical for the simultaneous evaluations of the plasmatic, acrosomal, and mitochondrial membranes in ram spermatozoa.FAPESP 00/14653-6 e 01/13940-

Influência do garanhão e da técnica de inseminação sobre os índices de recuperação embrionária e de gestação em um programa de transferência de embriões em eqüinos da raça Mangalarga

Many factors can affect pregnancy rates after equine embryo transfer. This study had the objective of evaluating the influence of stallion and of three different insemination techniques (natural breed, artificial insemination with fresh or cold semen), on pregnancy and on embryos recovery rates. In the first year, differences were observed (p &lt; 0.05) in embryo recovery rates among the five stallions studied (28.6, 65.0, 62.9, 66.7 and 84.2%), but no statistical differences (p &gt;; 0.05) were detected in pregnancy rates (50.0, 80.7, 70.6, 70.0 and 62.5%). In the second year, it was observed a tendency to statistical significance (p = 0.057) in embryos recovery rates between the stallions (44.4, 56.2, 71.4 and 73.7%), and no statistical differences (p &gt;; 0.05) were detected in pregnancy rates (75.0, 55.6, 86.7 and 71.4%). There were no statistical difference (p &gt;; 0.05) in the number of embryos transferred and in pregnancy rates comparing natural breed (50.0 and 87.5%) and artificial insemination with fresh (60.6 and 73.7%) or cold semen (63.8 and 80.3%).Muitos fatores podem afetar as taxas de gestação após a transferência de embriões em eqüinos. Este estudo teve como objetivo avaliar, em eqüinos da raça Mangalarga e em duas estações reprodutivas, a influência do garanhão e de três diferentes técnicas de inseminação (monta natural, inseminação artificial com sêmen diluído fresco ou resfriado) sobre os índices de recuperação de embriões e de prenhez. No primeiro ano, foram encontradas diferenças significativas (p &lt; 0,05) na recuperação de embriões entre cinco garanhões estudados (28,6; 65,0; 62,9; 66,7 e 84,2%), mas não foram encontradas diferenças significativas (p &gt;; 0,05) nos índices de prenhez (50,0; 80,7; 70,6; 70,0 e 62,5%). No segundo ano, verificou-se uma tendência à significância (p = 0,057), na recuperação de embriões entre quatro garanhões estudados (44,4; 56,2; 71,4 e 73,7%) e não houve diferença significativa (p &gt;; 0,05) nos índices de prenhez (75,0; 55,6; 86,7 e 71,4%). Não houve diferença significativa (p &gt;; 0,05) nos índices de embriões recuperados e de prenhez comparando-se a monta natural (50,0 e 87,5%) e a inseminação artificial com sêmen fresco (60,6 e 73,7%) ou refrigerado (63,8 e 80,3%)

The in vitro effects of n-3 fatty acids on immune response regulation of bovine ex vivo endometrial explants

Os ácidos graxos são considerados intermediários metabólicos, embora novos fatos indiquem que eles também atuem como moléculas sinalizadoras com diferentes papéis na resposta imune. Dessa forma, este estudo investigou os efeitos antiinflamatórios de ácidos graxos poliinsaturados n-3 (PUFAs) como ácido eicosapentaenóico (EPA), ácido docosahexaenóico (DHA) e ácido α-linolênico (LNA) em explantes endometriais ex vivo de bovinos. Para tal, o experimento foi divido em dois grupos: (1) Desafiado-LPS e (2) Controle, para que então pudesse avaliar o acúmulo de citocinas pró inflamatórias como interleucina 1β (IL1B) e interleucina 6 (IL6). Foram selecionados tratos reprodutivos de fêmeas bovinas de novilhas Angus não prenhes sem evidência de doenças reprodutivas. Explantes endometriais foram processados e tratados por 24h com EPA, DHA e LNA em cinco concentrações diferentes (0μM, 50μM, 100 μM, 200μM e 400 μM) e, em seguida, desafiados com LPS por mais 24h. Os sobrenadantes foram colhidos para avaliar a concentração de IL1B e IL6 pelo teste de ELISA. Os explantes tratados com EPA dos grupos de controle reduziram as concentrações de ILB (200 µM) e IL6 (400 µM) e no grupo desafiado com LPS houve redução das concentrações de IL6 (50 µM; 100 µM). Nos explantes do grupo desafiado com LPS, o DHA diminuiu o acúmulo de IL1B e IL6 nas concentrações de 200 µM, e no grupo controle reduziu IL6 nas concentrações de 200 µM, enquanto os explantes tratados com LNA reduziram apenas o acúmulo de IL1B a 400 µM (de ambos os grupos). Em conclusão, o ácido EPA provou ser a melhor opção anti inflamatória para diminuir a concentração de ambas as citocinas pró-inflamatórias (IL1B e IL6) de grupos desafiados com LPS e controle em explantes endometriais bovinos; enquanto o LNA evidencia ser a opção menos viável para promover uma resposta anti-inflamatória.Fatty acids are considered metabolic intermediaries, although new facts indicate they also work as signaling molecules with different roles in the immune response. Based on that, in this study, we investigated the anti-inflammatory effects of n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFAs) as eicosapentaenoic acid (EPA), docosahexaenoic acid (DHA), and α-linolenic acid (LNA) in ex vivo bovine endometrial explants. For this, two groups were formed: (1) LPS-challenged and (2) control, both to evaluate the accumulation of proinflammatory cytokines as interleukin 1β (IL1B) and interleukin 6 (IL6). To develop the study, bovine female reproductive tracts from non-pregnant Angus heifers without evidence of reproductive diseases were selected. Endometrial explants were processed and treated for 24 h with EPA, DHA, and LNA in five different concentrations (0μM, 50μM, 100 μM, 200μM and 400 μM) and then, challenged with LPS for 24 h. Supernatants were collected to evaluate the concentration of IL1B and IL6 by ELISA. Explants treated with EPA from control groups reduced the concentrations of ILB (200µM) and IL6 (400 µM), and IL6 (50 µM; 100 µM) from the LPS-challenged group. DHA decreased the accumulation of IL1B and IL6 at 200 µM on explants from the LPS-challenged group, and 200 µM reduced IL6 from the control group. In contrast, explants treated with LNA only reduced the accumulation of IL1B to 400μM (from both groups). In conclusion, the EPA acid is the best anti inflammatory option to decrease the concentration of both pro-inflammatory cytokines (IL1B and IL6) from LPS-challenged and control groups in bovine endometrial explants; while LNA evidence to be the last option to promote an anti-inflammatory response.

Eficiência in vitro de três diluidores para sêmen de coelho

Foi o objetivo deste trabalho comparar in vitro a eficiência de três diluidores para sêmen de coelhos: solução de Ringer com lactato de sódio, um meio à base de citrato de sódio e gema de ovo e um meio à base de leite desnatado sobre a manutenção da motilidade progressiva e do vigor espermático. Para tanto, foram utilizados 5 coelhos realizando-se 10 colheitas de sêmen de cada (n = 50). O sêmen foi colhido com vagina artificial, e avaliado quanto ao volume, motilidade, vigor e concentração. O sêmen foi diluído (20x106 espermatozóides/mL) em microtubos pré-aquecidos a 37ºC nos três diluidores, e então incubados em banho-maria a 37ºC por 120 minutos, realizando-se avaliações a cada 30 minutos. Imediatamente após a diluição (tempo 0) a motilidade espermática não diferiu (P&gt;;0,05) entre os diluidores, todavia, reduziu (P&lt;0,05) no diluído com Ringer quando comparado ao sêmen in natura. Já o vigor no tempo 0 diminuiu (P&lt;0,05) nos três meios. A motilidade espermática foi melhor preservada (P&lt;0,05) durante a incubação de 30 até 120 minutos para o sêmen diluído nos diluidores citrato-gema e à base de leite do que para aquele diluído em Ringer. A preservação do vigor variou entre os diluidores durante o tempo de incubação in vitro, contudo, foi semelhante entre os três diluidores após 120 minutos de incubação. Com estes resultados, pode-se inferir que os diluidores testados proporcionam um meio que permite manter a viabilidade espermática para que possa ser realizada a inseminação artificial em coelhas até duas horas pós-diluiçãoThe objective of this experiment was to compare in vitro efficiency of three rabbit semen extenders: sodium lactate Ringer solution, sodium citrate and yolk-egg medium, and skim milk-based medium, on maintenance of sperm vigour and motility. To that end 5 rabbits were utilized; ten semen collections were taken from each (n = 50). The semen was collected by artificial vagina, and evaluated for volume, motility, vigour, and concentration. The semen was diluted (20x10(6) spermatozoa/mL) in pre-warmed micro tube at 37ºC in the three extenders, and then it was incubated in water bath at 37ºC during 120 minutes, performing evaluation every 30 minutes. Immediately after the dilution (time 0) the sperm motility was not different among extenders (P&gt;;0.05), however, decreased (P&lt;0.05) in Ringer extender when compared to in natura semen. The vigor in time 0 decreased (P&lt;0.05) in the three extenders. The sperm motility was better preserved (P&lt;0.05) during the incubation from 30 to 120 minutes for the semen diluted in yolk egg-citrate and skim milk-based extenders than for the Ringer extender. The vigour preservation varied among the extenders during the in vitro incubation; however, it was similar among the three extenders after 120 minutes of incubation. Based on these results, it can be deduced that the tested extenders promote a medium that allows the maintenance of sperm viability so that artificial insemination can take place within two hours of post-dilutio

Erratum: The in vitro effects of n-3 fatty acids on immune response regulation of bovine ex vivo endometrial explants

Os ácidos graxos são considerados intermediários metabólicos, embora novos fatos indiquem que eles também atuem como moléculas sinalizadoras com diferentes papéis na resposta imune. Dessa forma, este estudo investigou os efeitos anti-inflamatórios de ácidos graxos poliinsaturados n-3 (PUFAs) como ácido eicosapentaenóico (EPA), ácido docosahexaenóico (DHA) e ácido α-linolênico (LNA) em explantes endometriais ex vivo de bovinos. Para tal, o experimento foi divido em dois grupos: (1) Desafiado-LPS e (2) Controle, para que então pudesse avaliar o acúmulo de citocinas pró-inflamatórias como interleucina 1β (IL1B) e interleucina 6 (IL6). Foram selecionados tratos reprodutivos de fêmeas bovinas de novilhas Angus não prenhes sem evidência de doenças reprodutivas. Explantes endometriais foram processados e tratados por 24h com EPA, DHA e LNA em cinco concentrações diferentes (0μM, 50μM, 100 μM, 200μM e 400 μM) e, em seguida, desafiados com LPS por mais 24h. Os sobrenadantes foram colhidos para avaliar a concentração de IL1B e IL6 pelo teste de ELISA. Os explantes tratados com EPA dos grupos de controle reduziram as concentrações de ILB (200 μM) e IL6 (400 μM) e no grupo desafiado com LPS houve redução das concentrações de IL6 (50 μM; 100 μM). Nos explantes do grupo desafiado com LPS, o DHA diminuiu o acúmulo de IL1B e IL6 nas concentrações de 200 μM, e no grupo controle reduziu IL6 nas concentrações de 200 μM, enquanto os explantes tratados com LNA reduziram apenas o acúmulo de IL1B a 400 μM (de ambos os grupos). Em conclusão, o ácido EPA provou ser a melhor opção anti-inflamatória para diminuir a concentração de ambas as citocinas pró-inflamatórias (IL1B e IL6) de grupos desafiados com LPS e controle em explantes endometriais bovinos; enquanto o LNA evidencia ser a opção menos viável para promover uma resposta anti-inflamatória.Fatty acids are considered metabolic intermediaries, although new facts indicate they also work as signaling molecules with different roles in the immune response. Based on that, in this study, we investigated the anti-inflammatory effects of n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFAs) as eicosapentaenoic acid (EPA), docosahexaenoic acid (DHA), and α-linolenic acid (LNA) in ex vivo bovine endometrial explants. For this, two groups were formed: (1) LPS-challenged and (2) control, both to evaluate the accumulation of proinflammatory cytokines as interleukin 1β (IL1B) and interleukin 6 (IL6). To develop the study, bovine female reproductive tracts from non-pregnant Angus heifers without evidence of reproductive diseases were selected. Endometrial explants were processed and treated for 24 h with EPA, DHA, and LNA in five different concentrations (0μM, 50μM, 100 μM, 200μM and 400 μM) and then, challenged with LPS for 24 h. Supernatants were collected to evaluate the concentration of IL1B and IL6 by ELISA. Explants treated with EPA from control groups reduced the concentrations of ILB (200μM) and IL6 (400 μM), and IL6 (50 μM; 100 μM) from the LPS-challenged group. DHA decreased the accumulation of IL1B and IL6 at 200 μM on explants from the LPS-challenged group, and 200 μM reduced IL6 from the control group. In contrast, explants treated with LNA only reduced the accumulation of IL1B to 400μM (from both groups). In conclusion, the EPA acid is the best anti-inflammatory option to decrease the concentration of both pro-inflammatory cytokines (IL1B and IL6) from LPS-challenged and control groups in bovine endometrial explants; while LNA evidence to be the last option to promote an anti-inflammatory response

Correlações entre a hemodinâmica testicular e as características espermáticas em carneiros

A artéria testicular é responsável pelo fluxo de sangue que chega aos testículos e tem grande importância na termorregulação. Mudanças vasculares nos testículos podem levar à queda da produção espermática, refletindo na motilidade e morfologia. O objetivo deste trabalho foi avaliar as correlações entre a vascularização testicular e as características espermáticas. Foram utilizados oito carneiros adultos Santa Inês com diferentes status reprodutivos. A vascularização testicular e as características seminais foram avaliadas por um período de 90 dias. A ultrassonografia Doppler colorida foi utilizada para avaliar a hemodinâmica testicular. Foram calculados os índices de resistência (RI) e os índices de pulsatilidade (PI) com o modo espectral do Doppler. O modo colorido do Doppler foi utilizado para analisar o fluxo sanguíneo do plexo pampiniforme e do parênquima testicular. As características seminais avaliadas foram o volume, concentração, motilidade e morfologia. Os dados foram submetidos ao teste de correlação linear de Person (P &lt; 0.05 foi considerado significativo). Não foram encontradas relações entre motilidade e a hemodinâmica testicular. A porcentagem de defeitos totais correlacionou-se positivamente com o escore de vascularização dos parênquimas direito e esquerdo, e com o RI e PI esquerdos. Também o escore de vascularização dos plexos se correlacionou positivamente com a média de pixels e negativamente com o RI e PI, de ambos os lados. Este trabalho mostrou que o aumento de defeitos espermáticos pode estar correlacionado com o aumento do fluxo sanguíneo nos testículos; contudo, mais estudos são necessários.The testicular artery is responsible for the blood supply that reaches the testis and has great importance in heat radiation. Vascular changes in the testis may lead to damage in sperm production, reflected in sperm motility and morphology. The aim of the present study was to evaluate correlations between testicular vascularity and sperm characteristic. Eight adult Santa Ines rams showing different reproductive status were used. The testicular vascularity and sperm characteristics were evaluated fortnightly during 90 days. Color Doppler ultrasonography was used to evaluate the testicular hemodynamic. Resistance index (RI) and pulsatility index (PI) of the testicular artery were evaluated by spectral-Doppler mode. The color-Doppler mode was used to evaluate the blood flow of the pampiniform plexus and testicular parenchyma. The semen analyses assessed were volume, concentration, motility, and morphology. The data were submitted to Pearson´s linear correlations test (p &lt; 0.05 was considered significant). No correlations were found between motility and testicular hemodynamic. The percentage of total sperm defects was positively correlated to left and right parenchymal score and to left RI and PI. On the other hand, the pampiniform plexus score was positively correlated to the number of colored pixels and negatively correlated to the RI and PI, for both sides. This study showed that the increase of sperm defect can be related to increase of testicular blood flow; however, more studies are need