Effect of the essential oil of Minthostachys verticillata (Griseb.) epling and limonene on biofilm production in pathogens causing bovine mastitis

Bovine mastitis causes large annual economic losses around the world. Different microorganisms are associated with the disease. The capacity of pathogens to adhere to bovine mammary epithelial cells is associated with biofilm production which leads to antibiotic resistance. Research is now leading to search alternative control methods and medicinal plants constitute a natural, safe, effective and inexpensive option. Minthostachys verticillata is an autochthonous medicinal plant of Argentina with multiple ethnobotanical properties. In a previous study, we demonstrated that the essential oil (EO) of this species and limonene, one of its compounds, inhibited the growth of mastitis pathogens. The objective of the present work was to determine the inhibitory effect of the essential oil of M. verticillata and limonene, on biofilm formation and on mature biofilm produced by pathogens isolated from bovine mastitis. Time kill assay and bacterial lysis were also determined. Furthermore, RAPD-PCR assays were performed to determine changes in bacterial DNA after EO and limonene exposition. Bacterial isolates were identified as Escherichia coli (EC3 and EC9), Bacillus pumilus (BP5, BP6, and BP7) and Enterococcus faecium (EF1) by rRNA 16S sequencing and MALDI-TOF MS. All the strains were able to form biofilm. Addition of both lactose and sucrose did not affect biofilm production. MIC values for EO were 3.6 mg/ml for E. faecium; 0.9 mg/ml for E. coli (EC3), 14.5 mg/ml for E. coli (EC9), 1.8 mg/ml for B. pumilus (BP7), 3.63 mg/ml for B. pumilus (BP6) and 29.0 mg/ml for B. pumilus (BP7). MIC values for limonene were 6.6 mg/ml for B. pumilus (BP6) and 105 mg/ml for B. pumilus (BP5). These results demonstrated that EO was more effective than limonene, showing also bactericidal action against E. faecium (minimal inhibitory concentration (MBC) = 29.0 mg/ml). This result was corroborated by time of death assay, observing a cell decrease after at 6 h, and then by bacterial lysis assay. Both EO and limonene affected mature biofilm of isolated strains. The results contribute to the study of EO and limonene which may serve as a therapy against bovine mastitis pathogens inhibiting the development of pathogenic bacteria.Fil: Cerioli, Maria Florencia. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Moliva, Melina Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto; ArgentinaFil: Cariddi, Laura Noelia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto; ArgentinaFil: Reinoso, Elina Beatríz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentin

First approaches in the study of cytotoxic and mutagenic damage induced by cold aqueous extract of Baccharis articulata on normal cells

Species of Genus Baccharis (Asteraceae) possess various bioactivities in vitro. The aim was to determine the cytogenotoxic activity of the cold aqueous extract (CAE) of Baccharis articulata. Peripheral blood lymphocytes from healthy individuals were in vitro faced to CAE (40, 78, 156, 313, 625 and 1250 ug/mL) for 18-24 h. Toxicity was evaluated by staining of trypan blue exclusion and MTT reduction. The genotoxicity was evaluated by the Micronucleus Test. Balb/c mice were injected with CAE (1800, 900 and 450 mg/kg), saline solution and cyclophosphamide as negative and positive controls respectively. Animals were sacrificed at 6 h post-injection. Bone marrow samples were fixed and stained with May- Grünwald and Giemsa. Two thousand polychromatic erythrocytes (PCE) were counted to determine number of micronuclei (MN) and normochromatic erythrocytes (NCE)/250 PCE to calculate toxicity index (TI). CAE toxicity on human lymphocytes was dose-dependent (Cytotoxic concentration 50% = 150 ug/mL). The number of MNPCE for negative control was: 5 (+1), positive control: 372 (+23) and CAE in three doses: 26 (+8), 16 (+5) and 8 (+3). TI for negative control: 1.38 (+0.35) positive control: 3.1 (+1.06) and CAE in three doses: 0.78 (+0.05), 0.82 (+0.08) and 1.21 (+0.2). CAE treatment showed no statistical difference respect to negative control. CAE of B articulata was not cytogenotoxic.Fil: Cariddi, Laura Noelia. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Escobar, Franco Matias. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sabini, Maria Carola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Torres, Cristina Vanesa. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Zygadlo, Julio Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; ArgentinaFil: Sabini, Liliana Ines. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

Efecto del aceite esencial de Minthostachys verticillata sobre la respuesta inmune de pacientes alérgicos a ácaros del polvo

El aceite esencial de hojas de M. verticillata fue obtenido por destilación en corriente de vapor y analizado por cromatografía gaseosa. Células mononucleares de sangre periférica de pacientes alérgicos, fueron estimuladas con aceite esencial. La proliferación fue ensayada mediante método colorimétrico del MTT o 3,(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide. Se cuantificaron células CD4 + , CD8 + y B en cultivos de linfocitos y en sobrenadantes, IFN- γ e IL-13. Se determinó la liberación de la enzima β -hexosaminidasa de basófilos adicionados de aceite esencial, y desafiados con el alergeno. Los efectos del aceite esencial fueron comparados con los de drogas antialérgicas. Los principales constituyentes identificados fueron pulegona, mentona y limoneno. Aceite esencial incrementó los valores de células CD4 + , CD8 + y B (p<0.002), estimuló la síntesis de IFN- γ y redujo los niveles de IL-13. El aceite esencial disminuyó la liberación de β -hexosaminidasa de basófilos (p<0.0001) con mayores efectos que los de las drogas ensayadas. Aceite esencial estimuló la desviación Th1 y redujo la liberación de la enzima β -hexosaminidasa de basófilos de pacientes alérgicos.The essential oil from leaves of Minthostachys verticillata was obtained by steam distillation and analyzed by gas chromatography. Peripheral blood mononuclear cells from allergic patients were stimulated with essential oil. By application of MTT or 3,(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide colorimetric test the proliferation was assayed. In lymphocyte cultures CD4+, CD8+ and B cells were quantified, and in supernatants, IFN-γ and IL-13. The liberation of β-hexosaminidase enzyme was determined for basophils with essential oil added and challenged with allergen and its effects were compared with those of anti-allergic drugs. The main constituents identified were pulegone, menthone and limonene. Essential oil increased absolute values of CD4+, CD8+ and B cells (p<0.002), stimulated IFN-γ synthesis and reduced IL-13 levels. Essential oil diminished β-hexosaminidase liberation by basophils (p<0.0001), with effects majors to those of the drugs tested. Essential oil stimulated the Th1 deviation and reduced β-hexosaminidase enzyme liberation by basophils from allergic patientsFil: Cariddi, Laura Noelia. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Moser, Marina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Andrada, Melisa. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Demo, Mirta Susana. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Zygadlo, Julio Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; ArgentinaFil: Sabini, Liliana Ines. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Maldonado, Ana Maria. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

Characterization of an Enterococcus faecium strain in a murine mastitis model

The aim of the study was to characterize phenotypically and genotypically Enterococcus faecium strains collected from bovine mastitis milk and to evaluate one of them for its virulence in a murine mastitis model. Methods and Results: A total of five E. faecium isolates were collected from cows with subclinical mastitis. EF-7A showed resistance to antibiotics tested, it presented alpha haemolysin and did not present gelatinase activity. It yielded cyA, efafm and gelE1 genes and it could be characterized as a moderate biofilm producer. It was able to internalize in MAC-T cells and 1×108 colony forming unit ml-1 was able to establish an intramammary infection in mice. The strain could be recovered from liver, kidney and blood samples. RAPD profiles showed different bands with respect to the inoculated strain. Histopathology analyses showed different grades of polymorphonuclear neutrophils infiltration in mammary glands. Conclusion: This is the first report that studied E. faecium strain in a lactating mouse model of mastitis and showed that the experimental inoculation was able to stimulate an inflammatory response resulting in mastitis. Results contribute to a better understanding of intramammary infections caused by E. faecium. Significance and Impact of the Study: This investigation shows that mice represent a valuable model for the study of the mastitis pathogenesis caused by E. faecium considering the high costs of using cows for mastitis research.Fil: Montironi, Ivana Dalila. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Moliva, Melina Vanesa. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; ArgentinaFil: Campra, Noelia Anahí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Raviolo, Jose Maria. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Agronomía y Veterinaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bagnis, Guillermo. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Agronomía y Veterinaria; ArgentinaFil: Cariddi, Laura Noelia. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; ArgentinaFil: Reinoso, Elina Beatríz. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; Argentin

Nanoemulsion of Minthostachys verticillata essential oil. In-vitro evaluation of its antibacterial activity

Infectious diseases constitute a problem of great importance for animal and human health, as well as the increasing bacterial resistance to antibiotics. In this context, medicinal plants emerge as an effective alternative to replace the use antibiotics. The essential oil (EO) of Minthostachys verticillata (Griseb.) Epling (Lamiaceae) has demonstrated a strong antimicrobial activity. However, its instability and hydrophobicity under normal storage conditions are limitations to its use. Nanoemulsion technology is an excellent way to solubilize, microencapsulate, and protect this compound. This study aimed to obtain a nanoemulsion based on M. verticillata EO and evaluate its antibacterial activity against Staphylococcus aureus. The EO was obtained by steam distillation. Identification and quantification of their components were determined by GC-MS revealing that the dominated chemical group was oxygenated monoterpenes. Nanoemulsions (NE) were characterized by measuring pH, transmittance, separation percentage, release profile, and morphology. The effect of NE on the growth of S. aureus and cyto-compatibility was also evaluated. The results showed that NE containing a higher percentage of tween 20 exhibited higher stability with an approximated droplet size of 10 nm. The effect of encapsulation process was evaluated by GC-MS revealing that the volatile components in EO were no affected. After 24 h, 74.24 ± 0.75% of EO was released from NE and the antibacterial activity of EO was enhanced considerably by its encapsulation. The incubation of S. aureus with the NE and pure EO, show a bacterial growth inhibition of 58.87% ± 0.99 and 46.72% ± 3.32 (p < 0.05), respectively. In addition, nanoemulsión did not cause toxicity to porcine and equine red blood cells. The results obtained showed that NE could be a potential vehicle for M. verticillata EO with promissory properties to emerge as a tool for developing advanced therapies to control and combat infections.EEA Marcos JuárezFil: Cecchini, María Eugenia. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Físico-Químicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología. Laboratorio de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud. Universidad Nacional de Río Cuarto. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud; ArgentinaFil: Paoloni, C. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Agronomía y Veterinaria. Departamento de Anatomía Animal. Laboratorio de Biotecnología Animal; ArgentinaFil: Campra, Noelia. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Físico-Químicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología. Laboratorio de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud. Universidad Nacional de Río Cuarto. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud; ArgentinaFil: Picco, Natalia. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Agronomía y Veterinaria. Departamento de Anatomía Animal. Laboratorio de Biotecnología Animal; ArgentinaFil: Grosso, M. Carolina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Agronomía y Veterinaria. Departamento de Anatomía Animal. Laboratorio de Biotecnología Animal; ArgentinaFil: Soriano Perez, María Laura. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; ArgentinaFil: Alustiza, Fabrisio Eduardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; ArgentinaFil: Cariddi, Noelia. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Físico-Químicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología. Laboratorio de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud. Universidad Nacional de Río Cuarto. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud; ArgentinaFil: Bellingeri, Romina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Agronomía y Veterinaria. Departamento de Anatomía Animal. Laboratorio de Biotecnología Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Tecnologías Energéticas y Materiales Avanzados. Universidad Nacional de Río Cuarto. Instituto de Investigaciones en Tecnologías Energéticas y Materiales Avanzados; Argentin

Protective role of chlorogenic acid on DNA damage caused by ochratoxin A exposure

Chlorogenic acid (ChlA) has shown short-term protective effects against the cytogenotoxiceffects of ochratoxin A (OTA). The present study evaluated the effect of oraladministration of ChlA in male Wistar rats exposed to OTA. OTA (0.4 mg/kg bw/day), ChlA (5 mg/kg bw/day), or the combination of both, were administered orally toanimals during 28 days. No deaths, decrease in feed consumption or change in the bodyweight of animals were observed in any group. In the OTA-treated group a decrease inlocomotion as well as increased DNA damage in blood, kidney and bone marrow cellswere observed. ChlA alone was not genotoxic for animals. The combination of OTA+ChlA decreased the DNA damage by 37% in blood cells, by 55% in kidney cells andby 80% in bone marrow cells compared to OTA-treated group. In conclusion, oraltreatment with ChlA showed a good protective effect on genotoxicity produced byOTA in rats during 28 days exposure.El ácido clorogé nico (ChlA) mostró efectos protectores a corto plazo contra los efectos citogenotóxicos de ocratoxina A (OTA). En el presente estudio se evaluó si este polifenol mantiene su efecto protector mediante la administración oral en ratas Wistar machos expuestas a OTA. OTA (0,4 mg/kg/día), ChlA (5 mg/kg/día), o la combinación de ambos, fueron administrados a los animales por vía oral durante 28 días. No se observaron muertes, ni disminución en el consumo de alimento, ni cambios en el peso corporal en ningún grupo de animales. En el grupo tratado con OTA se observó disminución en la locomoción, así como daño en el ADN en las cé lulas de sangre, riñó n y mé dula ósea. En los animales que solo recibieron ChlA no se observaron efectos genotóxicos. La combinación de OTA + ChlA disminuyó el daño del ADN en un 37%en las cé lulas sanguíneas, en un 55% en las cé lulas renales y en un 80% en las cé lulas de la mé dula ósea con respecto al grupo tratado con OTA. En conclusión, el tratamiento oral con ChlA mostró buen efecto protector sobre la genotoxicidad producida por OTA en ratas durante 28 días de exposición.Fil: Campra, Noelia Anahí. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud; ArgentinaFil: Cariddi, Laura Noelia. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud; ArgentinaFil: Escobar, Franco Matias. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Sabini, Maria Carola. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud; ArgentinaFil: Freire de lima, Celio Geraldo. Universidade Federal do Rio de Janeiro; BrasilFil: Decote Ricardo, Debora. Universidade Federal do Rio de Janeiro; BrasilFil: Roma, Dardo Andrés. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Mañas, Fernando Javier. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Dalcero, Ana Maria. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentin

Action of extracts obtained with organic solvents from Minthostachys verticillata(Griseb.) Epling on viability of Herpes simplex Type 1 virus (HSV-1)

It has demonstrated “in vitro” antimicrobial activity exerted by extracts from Minthostachys verticillata (peperina). Objective: Investigate antiviral action of organic extracts of peperina against Herpes simplex virus. Experimental: Vero cells and Herpes simplex virus type 1 strain KOS were used. Aerial vegetal parts of plant were submitted to sequential extraction with n-hexane, chloroform and methanol for 48 h at room temperature. Extracts n-hexanic (N-HE), chloroformic (CE) and methanolic (ME) were obtained. They were added on cell monolayers, and incubated for 48 h at 37°C. Cell viability was determinated by Neutral Red uptake (NRU) after treatment of cells with different concentrations of extracts (10-1000 μg/ml). The same method was performed to evaluate antiviral action exerted by N-HE (100-250 μg/ml), CE (100-500 μg/ml) and ME (range 80-200 μg/ml). Results and discussion: The three extracts showed dose-dependent cytotoxic activity on Vero cells with CC50 values: 502 μg/ml for CE, 244 μg/ml for N-HE and 192 μg/ml for ME. The replication of Herpes simplex virus type 1 “in vitro” was inhibited by each extract at non cytotoxic concentrations. The extracts showed selectivity of action because all concentrations tested inhibited more than 60% of viral production. The results are promising for future natural therapy antiherpetic.Fil: Sabini, Maria Carola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Cariddi, Laura Noelia. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; ArgentinaFil: Escobar, Franco Matias. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Aguilar, Juan Javier. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; ArgentinaFil: Tonn, Carlos Eugenio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Investigaciones en Tecnología Química. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Investigaciones en Tecnología Química; ArgentinaFil: Contigiani de Minio, Marta Silvia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; ArgentinaFil: Sabini, Liliana Ines. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

Minthostachys verticillata essentials oil and its major components: antiherpetic selective action in HEp-2 cells

The medicinal herb Minthostachys verticillata was studied in various fields of natural medicine. Numerous studies were made to evaluate its antimicrobial properties. This work emphasizes in the analysis of the antiviral capacity of its Essential Oil (EO). The aim of this study was to determine the Therapeutic Index (TI) of the EO and its main chemical components. Suid herpesvirus type 1 or Pseudorabies virus (Prv) was proliferated in HEp-2 cells in presence of non-toxic concentrations of the oily samples. Antiviral action was quantified by reducing the number of plaques of lysis. Previously, the cytotoxicity of the samples was evaluated and 50% Cytotoxic Concentration values (CC50) were determined. The TI was calculated by relating the cytotoxic concentrations of each sample vs. those concentrations active against the virus. The results showed that the major components of the EO were pulegone, menthone and limonene, with CC50 of 352, 835 and 1155 μg/mL respectively vs. the CC50 of EO: 613 μg/mL. The antiviral action was exerted by pulegone and the EO at concentrations 20 to 30 times lowers than the toxic concentrations. These IT values show the possible applicability of these compounds because they exert selective antiviral action.Fil: Vogt, Maria Veronica. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Biología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Sutil, Sonia Beatriz. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Escobar, Franco Matias. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Sabini, Maria Carola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Cariddi, Laura Noelia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Torres, Cristina Vanesa. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Zanon, Silvia Matilde. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Sabini, Liliana Ines. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

Lack of cytotoxic and genotoxic effects of Minthostachys verticillata essential oil: Studies in vitro and in vivo

Minthostachys verticillata (peperina) is an aromatic and medicinal plant with several uses and ethnobotanical properties. Numerous studies have demonstrated that its essential oil (Mv-EO) presents antimicrobial capacity and shows immunomodulating and anti-allergic properties in human cell lines. Thus, the goal of this study was to investigate the main chemical composition, analyzed by GC?FID, and the cyto-genotoxic effects of Mv-EO, using Vero cells, human PBMCs and mice bone marrow cells. The Mv-EO was rich in pulegone 60.5% and menthone 18.2%. Our results clearly show that Mv-EO is not cyto-genotoxic in vitro nor in vivo. It not induced cytotoxic effects, as indicated by trypan blue dye exclusion and NRU assays both in Vero cells and human PBMCs. In addition, Mv-EO (100?1000 μg/mL) not induced apoptotic effects on human PBMCs, as indicated by Hoechst staining and DNA fragmentation analysis by agarose gel electrophoresis. The in vivo assay showed that Mv-EO (25?500 mg/kg) not increased the frequency of micronucleus in bone marrow cells of mice. Further, the ratio of polychromatic/normochromatic erythrocytes was not modified. These findings suggest that Mv-EO appears to be safe as a therapeutic agent.Fil: Escobar, Franco Matias. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto; ArgentinaFil: Cariddi, Laura Noelia. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Sabini, Maria Carola. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Reinoso, Elina Beatríz. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Sutil, Sonia Beatriz. Universidad Nacional de Río Cuarto; ArgentinaFil: Torres, Cristina Vanesa. Universidad Nacional de Río Cuarto; ArgentinaFil: Zanon, Silvia Matilde. Universidad Nacional de Río Cuarto; ArgentinaFil: Sabini, Liliana Inés. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentin

Development and biological evaluation of pNIPAM-based nanogels as vaccine carriers

“Smart” nanogels are an attractive tool for the development of new strategies of immunization in veterinary medicine. Here, we reported the synthesis and physicochemical characterization of thermoresponsive nanogels based on poly(N-isopropylacrylamide) (pNIPAM) and their in vitro, ex vivo and in vivo (mice model) performance. Smart nanogels of ca. 250 nm, with a transition temperature of 32 °C were obtained by precipitation polymerization. Assays to evaluate pNIPAM nanogels cytotoxicity were performed in different cell lines showing high biocompatibility (>70 %). The efficient internalization of the system was studied by confocal microscopy as well as flow cytometry. The ability to protect and deliver antigens was analyzed using the outer membrane lipoprotein A (OmlA), an important virulence factor of Actinobacillus pleuropneumoniae (App) cause of porcine pleuropneumonia. This lipoprotein was synthesized by recombinant technology and its technique was also described. The biodistribution of pNIPAM nanogels administered intranasally was performed in vivo and ex vivo through Pearl Imaging System, which showed that nanogels were kept mostly in the lungs during the evaluated time. Besides, the efficacy of the proposal nanogel-based vaccine was studied in vivo by measuring the antibody titers of BALB/c mice inoculated with OmlA encapsulated into pNIPAM nanogels compared to OmlA plus aluminum hydroxide adjuvant. The results proved the ability of nanogels to stimulate a humoral immune response. Therefore, we have demonstrated that pNIPAM nanogels can be used as an efficient platform for vaccine nanocarriers.Fil: Soriano Pérez, María Laura. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Córdoba. Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Funes, Javier Alejandro. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Córdoba. Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Flores Bracamonte, María Carolina. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Agronomia y Veterinaria. Instituto de Ciencias Veterinarias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Ciencias Veterinarias.; ArgentinaFil: Ibarra, Luis Exequiel. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud; ArgentinaFil: Forrellad, Marina Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Taboga, Oscar Alberto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Cariddi, Laura Noelia. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud; ArgentinaFil: Salinas, Facundo José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Ortega, Hugo Hector. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Alustiza, Fabrisio Eduardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Córdoba. Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Molina, María Alejandra. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones en Tecnologías Energéticas y Materiales Avanzados. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Tecnologías Energéticas y Materiales Avanzados; Argentin