Estudio citogenético de tumores de glándula mamaria en hembras de <i>Canis familiaris</i> (Mammalia, Canidae)

Una detallada investigación citogenética de los tumores caninos puede revelar la identidad de los cambios recurrentes que sean de importancia diagnóstica y/o pronóstica. Muchos tumores se caracterizan por presentar cromosomas marcadores muy anormales los cuales son, en general, resultado de fracturas múltiples fáciles de analizar. Los sitios frágiles son sitios cromosómicos específicos y heredables, susceptibles a presentar gaps o fracturas y estarían indicando regiones del genoma de mayor inestabilidad. Son usualmente hallados en genes envueltos en la tumorigénesis y mapean con más de la mitad de todos los sitios de quiebre y translocaciones recurrentes y específicos del cáncer. En este trabajo se realizó un estudio citogenético de la especie Canis familiaris, presentándose el cariotipo del perro doméstico el cual está constituido por un número diploide igual a 2n=78 (76AA+XX), siendo 38 pares de autosomas (acrocéntricos) y un par de cromosomas sexuales XX (metacéntricos). Las NORs se localizaron en la región terminal de los brazos largos de cromosomas acrocéntricos, observándose hasta 8 cromosomas portadores de las NORs en una misma metafase. En algunos autosomas y en el par sexual se observaron bloques de heterocromatina constitutiva en posición pericentromérica. Sobre tumores de glándula mamaria canina se llevó a cabo el análisis citogenético, para considerar las posibilidades diagnósticas del mismo, a través de la ocurrencia de aberraciones cromosómicas y la determinación de correlaciones entre los tipos de alteraciones cromosómicas encontradas y los tipos tumorales. El material analizado se obtuvo a partir de tumores mamarios de pacientes caninas hembras, destinándose parte de la muestra a la evaluación diagnóstica y tipificación tumoral; y la otra parte al análisis citogenético mediante técnicas de citogenética convencional: con Giemsa, Bandeo NOR y Bandeo C. Se estudiaron 11 pacientes, siendo un total de 14 los tumores analizados, de los cuales 5 presentaron alteraciones cromosómicas a modo de quiebres y/o gaps afectando autosomas y cromosomas sexuales. El porcentaje de metafases que presentaron cromosomas con quiebres fue de 60,81%, el número promedio de cromosomas afectados por metafase de 1,45 y la media de quiebres y/o gaps por metafases fue de 1,7. Estas alteraciones se encontraron asociadas a neoplasias malignas de los tipos Carcinoma Complejo y Carcinoma Simple. Quiebres de ADN inadecuadamente reparados caracterizan a las neoplasias agresivas, por lo que los quiebres y gaps encontrados, serían indicadores de una mayor malignidad tumoral, por lo tanto de mal pronóstico para el paciente.Facultad de Ciencias Exactas, Naturales y Agrimensur

Quiebres y gaps cromosómicos en carcinomas mamarios de hembras caninas

A cytogenetic study of canine breast carcinomas was performed in order to identify the occurrence of chromosomal abnormalities. Samples of spontaneous canine mammary tumors were submitted for histopathological evaluation and for cytogenetic analysis. Hematoxylin and eosin staining was used for the former and conventional Giemsa staining and NOR banding were performed for the latter. Chromosomal breaks and/or gaps affecting autosomes and sex chromosomes were seen in 5 of a total of 14 cases. The percentage of metaphases with abnormal chromosomes was 61%, the average number of metaphase`s chromosomes affected was 1.26, while a media of 1.47 breaks and/or gaps was seen per metaphase. These alterations were observed in complex and simple carcinomas. We propose to include this type of cytogenetic study in addition to routine techniques in order to improve the diagnosis and prognosis prediction.Se realizó un estudio citogenético de carcinomas de mama en hembras caninas con el fin de identificar la ocurrencia de anomalías cromosómicas. Las muestras se obtuvieron de neoplasias mamarias espontáneas y fueron sometidas a evaluación histopatológica y análisis citogenético. Para el primero se utilizó la tinción de hematoxilina y eosina y para el segundo la coloración convencional de Giemsa y bandeo NOR. En 5 oportunidades, de un total de 14 casos estudiados, se observaron quiebres y/o gaps afectando autosomas y cromosomas sexuales. La proporción de metafases verificada en cromosomas anormales fue de 61%, el número promedio de cromosomas afectados por metafase fue de 1,26, mientras que la media de quiebres y/o gaps por metafases fue de 1,47. Estas alteraciones se observaron en carcinomas complejos y simples. Se propone incorporar este tipo de estudio citogenético a las técnicas de rutina con el fin de complementar el diagnóstico y pronóstico de la afección.Centro de Investigaciones Inmunológicas Básicas y Aplicada

Genómica y bioinformática como pilares de la medicina de precisión en oncología

The battle against cancer has advanced tremendously in the last thirty years and the survival rate has doubled. However, it is still difficult to achieve a generalized cure. The challenge is that cancer is not a unique disease; it is about dozens of different manifestations, even within the same tumor location. For systems biology, each solid tumor is a unique system characterized by its cellular heterogeneity, its interaction with the microenvironment in which it grows and develops, and its ability to adapt and modify it. Recent advances in understanding the molecular mechanisms that underlie cancer are transforming the diagnosis and treatment of the disease. In this sense, a growing set of treatments capable of attacking a specific tumor with higher efficiency has been developed, defining a new paradigm: the precision medicine in oncology. Genomics and bioinformatics are two fundamental pillars in this applied field. These technologies generate massive data (big data) that require analytical tools and trained personnel for the analysis, integration and transfer of the information to physicians. This presentation describes the concepts of personalized medicine, Big Data, the main advances in genomics and bioinformatics as well as their future perspectives and challenges.La batalla contra el cáncer ha avanzado enormemente en los últimos treinta años y la tasa de supervivencia se ha duplicado, sin embargo aún es difícil alcanzar una cura generalizada. El desafío reside en que el cáncer no es una enfermedad única, se trata de decenas de manifestaciones diferentes incluso dentro de una misma localización tumoral. Para la biología de sistemas, cada tumor sólido es un sistema único caracterizado por su heterogeneidad celular, su interacción con el microambiente en el que crece y se desarrolla, y su capacidad de adaptarse y modificarlo. Los avances recientes en la comprensión de los mecanismos moleculares que subyacen al cáncer están transformando el diagnóstico y el tratamiento de la enfermedad. En este sentido, se ha desarrollado un conjunto creciente de tratamientos capaces de atacar con mayor eficiencia a un tumor específico dando paso a nuevo paradigma: el de la medicina de precisión. La genómica y la bioinformática son dos ejes fundamentales en el desarrollo y aplicación de la medicina personalizada. Estas tecnologías generan datos masivos (Big Data) que requieren de herramientas analíticas y personal capacitado para su análisis, integración y transferencia de la información hacia los médicos especialistas. En esta presentación se describen los principales avances en genómica y bioinformática aplicados a la medicina de precisión así como sus perspectivas futuras, desafíos y problemáticas.Fil: Canzoneri, Romina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Centro de Investigaciones Inmunológicas Básicas y Aplicadas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Lacunza, Ezequiel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Centro de Investigaciones Inmunológicas Básicas y Aplicadas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Abba, Martín Carlos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Centro de Investigaciones Inmunológicas Básicas y Aplicadas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentin

Linc00885 a novel oncogenic long non-coding rna associated with early stage breast cancer progression

Long intergenic non-protein coding RNA 885 (LINC00885) was identified as significantly upregulated in breast ductal carcinoma in situ (DCIS). The aim of this study was to characterize the phenotypic effects and signaling pathways modulated by LINC00885 in non-invasive and invasive breast cancer models. We determined that LINC00885 induces premalignant phenotypic changes by increasing cell proliferation, motility, migration and altering 3D growth in normal and DCIS breast cell lines. Transcriptomic studies (RNA-seq) identified the main signaling pathways modulated by LINC00885, which include bioprocesses related to TP53 signaling pathway and proliferative signatures such as activation of EREG, EGFR and FOXM1 pathways. LINC00885 silencing in breast cancer lines overexpressing this lncRNA leads to downregulation of proliferation related transcripts such as EREG, CMYC, CCND1 and to significant decrease in cell migration and motility. TCGA-BRCA data analyses show an association between high LINC00885 expression and worse overall survival in patients with primary invasive breast carcinomas (p = 0.024), suggesting that the pro-tumorigenic effects of LINC00885 overexpression persist post-invasion. We conclude that LINC00885 behaves as a positive regulator of cell growth both in normal and DCIS breast cells possibly operating as a ceRNA and representing a novel oncogenic lncRNA associated with early stage breast cancer progression.Fil: Abba, Martín Carlos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Canzoneri, Romina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Gurruchaga, Agustina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Lee, Jaeho. University of Texas; Estados UnidosFil: Tatineni, Pradeep. University of Texas; Estados UnidosFil: Kil, Hyunsuk. University of Texas; Estados UnidosFil: Lacunza, Ezequiel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Aldaz, Claudio Marcelo. University of Texas; Estados Unido

Estudio de la respuesta inmunomoduladora en el cáncer de mama

El cáncer de mama es considerado una entidad heterogénea que presenta diferencias moleculares que se relacionan con el pronóstico de las pacientes. El cáncer de mama se clasifica según la expresión de los receptores de estrógeno (RE), receptor de progesterona (RP), Her2-neu, citoqueratinas, entre otros marcadores; la mutación de p53 y el porcentaje de expresión ki67 se consideran también indicadores de pronóstico. Por otra parte, la capacidad de invasión y metástasis tumoral depende de las características propias del tumor así como de la respuesta inmune de cada paciente. Uno de los mecanismos de evasión tumoral involucra a la Indolamino-2,3- dioxigenasa (IDO), una enzima de 42-45 kD que cataliza el paso limitante de la degradación del triptofano en la vía de la quinureína. Hay evidencias que sugieren que IDO tiene un rol en la supervivencia de los tumores ya que restringe la vigilancia inmunológica del hospedador. Este efecto estaría mediado por la inhibición de las células T activadas para ejercer su efecto citotóxico sobre las células tumorales. Asimismo, IDO actúa incrementando la actividad supresora de los linfocitos T regulatorios CD4+ CD25+ Foxp3+ (Treg) ya que está implicada en su inducción.Facultad de Ciencias Médica

Caracterización funcional del ARN largo no codificante en la LINC885 progresión del cáncer de mama

El objetivo del trabajo es determinar el rol del LINC885 sobre la proliferación celular, en modelos celulares mamarios humanos tipo normal y tumorales invasivo y no invasivo. Caracterizar al LINC885 como un biomarcador de progresión del cáncer de mama e identificar las posibles vías de señalización en que se encuentra involucrado.Facultad de Ciencias Médica

Estudio de la respuesta inmunomoduladora en el cáncer de mama

El cáncer de mama es considerado una entidad heterogénea que presenta diferencias moleculares que se relacionan con el pronóstico de las pacientes. El cáncer de mama se clasifica según la expresión de los receptores de estrógeno (RE), receptor de progesterona (RP), Her2-neu, citoqueratinas, entre otros marcadores; la mutación de p53 y el porcentaje de expresión ki67 se consideran también indicadores de pronóstico. Por otra parte, la capacidad de invasión y metástasis tumoral depende de las características propias del tumor así como de la respuesta inmune de cada paciente. Uno de los mecanismos de evasión tumoral involucra a la Indolamino-2,3- dioxigenasa (IDO), una enzima de 42-45 kD que cataliza el paso limitante de la degradación del triptofano en la vía de la quinureína. Hay evidencias que sugieren que IDO tiene un rol en la supervivencia de los tumores ya que restringe la vigilancia inmunológica del hospedador. Este efecto estaría mediado por la inhibición de las células T activadas para ejercer su efecto citotóxico sobre las células tumorales. Asimismo, IDO actúa incrementando la actividad supresora de los linfocitos T regulatorios CD4+ CD25+ Foxp3+ (Treg) ya que está implicada en su inducción.Facultad de Ciencias Médica

Análisis de la expresión de los genes de la familia Romboide en el desarrollo del cáncer de mama

La familia Romboide comprende a un grupo de proteínas conservadas evolutivamente pero diversificadas funcionalmente, sus miembros so proteínas transmembrana proteolíticamente activas e inactivas, implicadas en la modulación de varios procesos biológicos como la vía de señalización del EGFR, la degradación de proteínas asociada a RE, la muerte y la proliferación celular. Recientemente, varios genes romboide humanos se han asociado al desarrollo de cáncer pituitario, leucemia mieloide crónica, cáncer colorrectal, de ovario y de mama. En este trabajo se estudiaron los perfiles de expresión de ARNm y proteínas de los un conjunto de genes romboide en líneas celulares de cáncer de mama, muestras de tejido y de tumores de mama humanos.Facultad de Ciencias Médica

Análisis de la expresión de los genes de la familia Romboide en el desarrollo del cáncer de mama

La familia Romboide comprende a un grupo de proteínas conservadas evolutivamente pero diversificadas funcionalmente, sus miembros so proteínas transmembrana proteolíticamente activas e inactivas, implicadas en la modulación de varios procesos biológicos como la vía de señalización del EGFR, la degradación de proteínas asociada a RE, la muerte y la proliferación celular. Recientemente, varios genes romboide humanos se han asociado al desarrollo de cáncer pituitario, leucemia mieloide crónica, cáncer colorrectal, de ovario y de mama. En este trabajo se estudiaron los perfiles de expresión de ARNm y proteínas de los un conjunto de genes romboide en líneas celulares de cáncer de mama, muestras de tejido y de tumores de mama humanos.Facultad de Ciencias Médica

Identification of signaling pathways modulated by RHBDD2 in breast cancer cells: a link to the unfolded protein response

Rhomboid domain containing 2 (RHBDD2) was previously observed overexpressed and amplified in breast cancer samples. In order to identify biological pathways modulated by RHBDD2, gene expression profiles of RHBDD2 silenced breast cancer cells were analyzed using whole genome human microarray. Among the statistically significant overrepresented biological processes, we found protein metabolism—with the associated ontological terms folding , ubiquitination, and proteosomal degradation—cell death, cell cycle, and oxidative phosphorylation. In addition, we performed an in silico analysis searching for RHBDD2 co-expressed genes in several human tissues. Interestingly, the functional analysis of these genes showed similar results to those obtained with the microarray data, with negative regulation of protein metabolism and oxidative phosphorylation as the most enriched gene ontology terms. These data led us to hypothesize that RHBDD2 might be involved in endoplasmic reticulum (ER) stress response. Thus, we specifically analyzed the unfolding protein response (UPR) of the ER stress process. We used a lentivirus-based approach for stable silencing of RHBDD2 mRNA in the T47D breast cancer cell line, and we examined the transcriptional consequences on UPR genes as well as the phenotypic effects on migration and proliferation processes. By employing dithiothreitol as an UPR inducer, we observed that cells with silenced RHBDD2 showed increased expression of ATF6, IRE1, PERK, CRT, BiP, ATF4, and CHOP (p < 0.01). We also observed that RHBDD2 silencing inhibited colony formation and decreased cell migration. Based on these studies, we hypothesize that RHBDD2 overexpression in breast cancer could represent an adaptive phenotype to the stressful tumor microenvironment by modulating the ER stress response.Facultad de Ciencias MédicasCentro de Investigaciones Inmunológicas Básicas y AplicadasInstituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plat