Extracellular vesicles from pluripotent stem cell-derived mesenchymal stem cells acquire a stromal modulatory proteomic pattern during differentiation

Mesenchymal stem/stromal cells (MSCs) obtained from pluripotent stem cells (PSCs) constitute an interesting alternative to classical MSCs in regenerative medicine. Among their many mechanisms of action, MSC extracellular vesicles (EVs) are a potential suitable substitute for MSCs in future cell-free-based therapeutic approaches. Unlike cells, EVs do not elicit acute immune rejection, and they can be produced in large quantities and stored until ready to use. Although the therapeutic potential of MSC EVs has already been proven, a thorough characterization of MSC EVs is lacking. In this work, we used a label-free liquid chromatography tandem mass spectrometry proteomic approach to identify the most abundant proteins in EVs that are secreted from MSCs derived from PSCs (PD-MSCs) and from their parental induced PSCs (iPSCs). Next, we compared both datasets and found that while iPSC EVs enclose proteins that modulate RNA and microRNA stability and protein sorting, PD-MSC EVs are rich in proteins that organize extracellular matrix, regulate locomotion, and influence cell–substrate adhesion. Moreover, compared to their respective cells, iPSCs and iPSC EVs share a greater proportion of proteins, while the PD-MSC proteome appears to be more specific. Correlation and principal component analysis consistently aggregate iPSCs and iPSC EVs but segregate PD-MSC and their EVs. Altogether, these findings suggest that during differentiation, compared with their parental iPSC EVs, PD-MSC EVs acquire a more specific set of proteins; arguably, this difference might confer their therapeutic properties.Fil: la Greca, Alejandro Damián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Solari, Claudia María. Ministerio de Ciencia. Tecnología e Innovación Productiva. Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Furmento, Verónica Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lombardi, Antonella. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Biani, María Celeste. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Aban, Cyntia Estefania. Ministerio de Ciencia. Tecnología e Innovación Productiva. Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica; ArgentinaFil: Moro, Lucía Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: García, Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Guberman, Alejandra Sonia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Sevlever, Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Miriuka, Santiago Gabriel. Universidad Nacional de La Plata; ArgentinaFil: Luzzani, Carlos Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Mesenchymal Stem Cell Graft Improves Recovery after Spinal Cord Injury in Adult Rats through Neurotrophic and Pro-Angiogenic Actions

Numerous strategies have been managed to improve functional recovery after spinal cord injury (SCI) but an optimal strategy doesn't exist yet. Actually, it is the complexity of the injured spinal cord pathophysiology that begets the multifactorial approaches assessed to favour tissue protection, axonal regrowth and functional recovery. In this context, it appears that mesenchymal stem cells (MSCs) could take an interesting part. The aim of this study is to graft MSCs after a spinal cord compression injury in adult rat to assess their effect on functional recovery and to highlight their mechanisms of action. We found that in intravenously grafted animals, MSCs induce, as early as 1 week after the graft, an improvement of their open field and grid navigation scores compared to control animals. At the histological analysis of their dissected spinal cord, no MSCs were found within the host despite their BrdU labelling performed before the graft, whatever the delay observed: 7, 14 or 21 days. However, a cytokine array performed on spinal cord extracts 3 days after MSC graft reveals a significant increase of NGF expression in the injured tissue. Also, a significant tissue sparing effect of MSC graft was observed. Finally, we also show that MSCs promote vascularisation, as the density of blood vessels within the lesioned area was higher in grafted rats. In conclusion, we bring here some new evidences that MSCs most likely act throughout their secretions and not via their own integration/differentiation within the host tissue

Desferrioxamine improves neutrophil phagocytosis in thalassemia major

The aims of the present study are: first, to assess the toxic role of serum from thalassemic patients in phagocytosis of PMN from healthy controls, and second, to seek to determine whether serum and cellular disturbances of polymorphonuclear neutrophils (PMN) phagocytosis, observed in thalassemic patients, can be prevented and/or corrected by use of desferrioxamine (DFX). Two kinds of in vitro incubations--without or with DFX--were performed. PMN or serum from thalassemic patients or from healthy controls was used. First, a phagocytosis defect of 3 different bacteria species was induced in PMN from healthy controls by incubation in thalassemic serum. Second, DFX could prevent, already at 1 microM, the phagocytic defect induced in normal PMN by the incubation with thalassemic serum, with disappearance of the toxic role of thalassemic serum at higher concentrations. Third, improvement of the phagocytosis defect of PMN from thalassemic patients was also observed at 1 microM of DFX for the 3 bacteria species. Normalization was obtained at higher concentrations for gram-negative bacteria. In vivo studies revealed, after a 3 hr subcutaneous infusion of DFX into 3 thalassemic patients, an improvement of the phagocytosis results and a decrease of the Prussian Blue reactivity of the PMN. It is concluded first that an iron-mediated defect in phagocytosis can be induced in normal neutrophils by incubation in serum from thalassemic patients, and second that a precautious and intensive chelation therapy seems to be advantageous for increasing PMN defense against infectious agents. Special care must nevertheless be taken in order to detect rapidly opportunistic (such as Yersinia) infections.Journal ArticleFLWNAinfo:eu-repo/semantics/publishe

Mécanismes et implications cliniques des altérations fonctionnelles des polynucléaires neutrophiles dans les états de surcharge en fer

Doctorat en sciences médicalesinfo:eu-repo/semantics/nonPublishe

L'information et l'expérience des adolescents en matière d'éducation familiale

The inquiry made about a secondary school adolescent population (in Mons-Borinage, Belgium) brings out an important shortcoming in the preparation of the youth for their future : the majority of them are not informed and have no experience in family education and know nothing about their future parental function. In general, the young object to this situation but do not take any initiatives, make no efforts to remedy this problem. If we consider the different aspects of the subject, it can be said that training youth aiming at their future parental role seems to be more necessary in the mind of the adolescents who are already informed and are experienced so far as educational matters are concerned.L'enquête réalisée sur un échantillon d'adolescents de l'enseignement secondaire de la région Mons-Borinage (Belgique francophone) met en évidence une carence importante dans la préparation des jeunes à leur avenir : la majorité d'entre eux ne possèdent ni information ni expérience en matière d'éducation familiale et ignorent tout de leur futur rôle parental. De manière générale, les jeunes condamnent cette situation mais consentent peu d'initiatives ou d'efforts pour remédier à ce problème. Toute proportion gardée, le besoin d'une préparation au futur rôle parental apparaît plus affirmé chez les adolescents déjà nantis d'information et/ou d'expérience dans le domaine éducatif.Cantinieaux Maryse. L'information et l'expérience des adolescents en matière d'éducation familiale. In: Enfance, tome 37, n°3-4, 1984. pp. 333-351

Les problèmes éducatifs et leurs solutions. Perspectives évoquées par les futurs parents

Cantinieaux Maryse. Les problèmes éducatifs et leurs solutions. Perspectives évoquées par les futurs parents. In: Bulletin de psychologie, tome 37 n°364, 1984. pp. 371-375

Le milieu conditionné de cellules souches mésenchymateuses: une alternative prometteuse à la transplantation de cellules souches mésenchymateuses après lésion de la moelle épinière

Les lésions de la moelle épinière engendrent des pertes de fonctions motrices et sensorielles plus ou moins importantes selon le niveau médullaire atteint et la gravité de la lésion. On estime à 2,5 millions le nombre de personnes atteintes de lésions de la moelle épinière dans le monde. Ces patients, souvent lourdement handicapés, sont généralement jeunes. La problématique principale du traumatisme médullaire est qu'il évolue défavorablement au cours du temps. Les lésions qui en résultent appelées « lésions secondaires » sont caractérisées par divers phénomènes tels qu'une inflammation, le développement d'une cicatrice astrogliale dense et la formation de cavités kystiques correspondant à du tissu nécrosé. Ces processus dégénératifs mènent à l'établissement d'un environnement lésionnel inhibiteur pour la régénération axonale et pour la récupération fonctionnelle.De nombreuses stratégies expérimentales visant à réparer les tissus médullaires endommagés ont été étudiées. Parmi elles, l'utilisation de cellules souches mésenchymateuses dérivées de la moelle osseuse constitue une solution prometteuse. En effet, ces cellules possèdent d'intéressantes propriétés permettant de moduler l'environnement lésionnel et ainsi favoriser la régénération des axones et la récupération fonctionnelle. Malheureusement, la survie de ces cellules et leur différenciation une fois transplantées dans le tissu hôte sont médiocres. De plus, il a été démontré, dans d'autres contextes pathologiques, que ces cellules pouvaient induire des effets néfastes une fois greffées. Cependant, les cellules souches mésenchymateuses sont connues pour sécréter une grande quantité de facteurs divers et il a été proposé que l'action paracrine de ces cellules puisse être à l'origine des effets bénéfiques observés après leur transplantation au sein du tissu médullaire lésé. Nous avons donc décidé d'administrer les facteurs sécrétés par ces cellules à des rats ayant subi une lésion de la moelle épinière par contusion et d'étudier, en parallèle, leurs propriétés in vitro. Nous montrons, in vivo, que le milieu conditionné par les cellules souches mésenchymateuses (MC-CSM) contenant les facteurs sécrétés par ces dernières, administré au niveau de la lésion, favorise la récupération locomotrice des animaux. Les analyses histologiques révèlent une action pro-angiogénique du MC-CSM ainsi qu'un effet de protection tissulaire. Le traitement n'a par contre pas d'effet sur la repousse axonale, l'inflammation et le développement de la cicatrice astrogliale. In vitro, le MC-CSM permet de protéger les neurones contre l'apoptose, active les macrophages et favorise l'angiogenèse. Finalement, la caractérisation du MC-CSM par détection protéique multiple et ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) a permis d'identifier divers facteurs trophiques ainsi que des cytokines probablement impliqués dans les effets observés. En conclusion, nos résultats confirment le mode d'action paracrine des cellules souches mésenchymateuses et les effets bénéfiques de ces facteurs dans le contexte des lésions médullaires. Ceci ouvre la porte à la possibilité de développer une approche thérapeutique basée sur l'utilisation d'un milieu acellulaire permettant d'éviter les éventuelles conséquences néfastes décrites dans d'autres modèles après greffe de cellules

Ferritin-associated iron induces neutrophil dysfunction in hemosiderosis

Neutrophils (PMNs) from patients with secondary iron overload have an increased iron and ferritin content as well as a phagocytosis defect. Several serum components might be incriminated in the cellular iron accumulation. We therefore compared the effects on the PMN phagocytosis of total serum as well as the ferritin and transferrin fractions of serum derived from patients with thalassemia major and healthy control subjects. An incubation system of PMNs was developed. PMN phagocytosis was measured before and after incubation. Total serum from patients with thalassemia induced a defect that was prevented by co-incubation with deferoxamine (DFO). Gel-filtration chromatography was performed to separate the serum fraction containing transferrin and albumin from that containing ferritin. The transferrin-albumin fraction had no effect on PMN phagocytosis. On the contrary, the ferritin fraction of normal serum was deleterious to PMN phagocytosis, and the same fraction from thalassemic serum decreased PMN phagocytosis even more. Co-incubation with DFO or catalase improves this defect. Moreover, a cellular increase in the L-type subunit of ferritin was observed after the incubation of PMNs with the ferritin-containing fraction from thalassemic serum. In conclusion, serum from patients with thalassemia is toxic to PMNs, and this toxicity is due to ferritin-associated iron.SCOPUS: ar.jinfo:eu-repo/semantics/publishe

Applications of the monoclonal antibody PC10 assessment of proliferative grade in cell smears

SCOPUS: ar.jinfo:eu-repo/semantics/publishe

Accurate flow cytometric measurement of bacteria concentrations

SCOPUS: ar.jinfo:eu-repo/semantics/publishe