Preservation of anti-SARS-CoV-2 neutralising antibodies in convalescent plasma after pathogen reduction with methylene blue and visible light

Background - COVID-19 convalescent plasma (CCP) is an experimental treatment against SARS-CoV-2. Although there has so far been no evidence of transmission through transfusion, pathogen reduction technologies (PRT) have been applied to CCP to mitigate risk of infectious disease. This study aims to assess the impact of methylene blue (MB) plus visible light PRT on the virus-neutralising activity of the specific antibodies against SARS-CoV-2. Material and methods - Thirty-five plasma doses collected by plasmapheresis from COVID-19 convalescent donors were subjected to MB plus visible light PRT. Anti-SARS-CoV-2 RBD S1 epitope IgGs antibodies were quantified by ELISA. Titres of SARS-CoV-2 neutralising antibodies (NtAbs) were measured before and after the PRT process. A Spearman's correlation was run to determine the relationship between antibody neutralisation ability and SARS-CoV-2 IgG ELISA ratio. Pre- and post-inactivation neutralising antibody titres were evaluated using a Wilcoxon test. Results - The plasma pathogen reduction procedure did not diminish NtAbS titres and so did not cause a change in the viral neutralisation capacity of CCP. There was a strong correlation between pre-and post-PRT NtAbs and anti-SARS-CoV-2 IgGs titres. Discussion - Our results showed PRT with MB did not impair the CCP passive immunity preserving its potential therapeutic potency. Therefore, PRT of CCP should be recommended to mitigate the risk for transmission of transfusionassociated infectious disease. There is a good correlation between SARS-CoV-2 IgG titres determined by ELISA and the neutralising capacity. This allows blood centres to select CCP donors based on IgG ELISA titres avoiding the much more labour-intensive laboratory processes for determining neutralising antibodies.Peer reviewe

Resistencia multiple a drogas. Estudio in vitro del efecto modulador de PSC 833 y tamoxifen en un modelo experimental

La resistencia múltiple a drogas (MDR) es un importante mecanismo involucradoen el fracaso de la quimioterapia en neoplasias humanas. MDR está asociada a laexpresión del gen mdr1 y la glicoproteína P-gp 170 que codifica. Esta glicoproteína actúacomo una bomba expulsora de fármacos que reduce su acción citotóxica intracelular. Laposible aplicación clínica de fármacos con acción moduladora de la bomba pero conaceptables efectos secundarios, abriría una vía terapéutica muy importante en pacientescon neoplasias resistentes que expresen el fenotipo MDR ya que se podría conseguir laresensibilización de las células tumorales a la quimioterapia. La existencia de formasalternativas de MDR, no P-gp 170 dependientes, dificulta el estudio específico de P-gp 170y de su modulación en ensayos clínicos o muestras procedentes de enfermos conneoplasias quimiorresistentes.El objetivo de este trabajo es desarrollar un método que permita el estudio delfenómeno MDR atribuïble específicamente a la acción de P-gp 170 y su modulación encondiciones experimentales de laboratorio y comprobar la supuesta acción moduladora dePSC 833, tamoxifeno y combinaciones de ambos.Hemos puesto a punto un modelo experimental basado en líneas celularessensibles y resistentes (células NIH-3T3 salvajes y transfectadas con el gen mdr1),sustancias fluorescentes substratos de la bomba (daunorrubicina) y lectura por citometríade flujo, que permite valorar específicamente el fenómeno MDR-P-gp 170 de una formafuncional. En experimentos de incorporación y expulsión, se ha validado el modelo y se haestudiado la acción moduladora de PSC 833, tamoxifeno y combinaciones de ambos encomparación con un"reconocido modulador de P-gp 170 como es verapamilo.Los resultados del estudio demuestran que PSC 833 a dosis de 0.5 pM es capazde modular de forma completa la acción de P-gp 170 en experimentos de incorporación.Sin embargo, con tamoxifeno o combinaciones de tamoxifeno y PSC 833 a dosis de 0.1 uMsolo se consigue una modulación parcial de la bomba