Diseño y construcción de un péptido con potencial inmunogénico a partir del dominio de unión a supresor de hairless de la proteína hairless de Drosophila melanogaster

Signal transduction pathways regulate the functions of different types of cells that constitute a multicellular organism, with the final goal of to regulate of target genes. The Notch signaling pathway is mainly involved in early and late embryo development, and recently has been described its participation in the adult organism proper function. Hairless, a protein member of the Notch signaling pathway modulates negatively this signal transduction pathway. Despite efforts to detect Hairless in higher animals, it has not been able to identify a homolog protein. The identification of a Hairless homolog protein is essential for the understanding of the regulatory processes during embryo development and other pathological processes where Notch pathway is involved. The Hairless counterparts described in insects have at least three highly conserved domains, where the Suppressor of Hairless binding domain is the most conserved. Using analysis in silico and molecular biology techniques was identified and delimited a peptide with immunogenic potential from the Suppressor of Hairless binding domain from Drosophila melanogaster Hairless protein. This peptide was used as antigen to generate polyclonal antibodies in hens. Sera were tested against total protein extract from fruit fly embryos.Las funciones de los diferentes tipos de células que constituyen un organismo multicelular, son reguladas mediante vías de transducción de señales, cuyo objetivo final es la regulación de genes blanco. La vía de señalización Notch participa principalmente en el desarrollo temprano y tardío del embrión, y en menor grado en el funcionamiento correcto del individuo. Hairless es una proteína involucrada en la vía de señalización Notch y su papel es modular negativamente la vía. A pesar de los esfuerzos realizados para detectar a hairless en animales superiores, no se ha logrado identificar un homólogo de la misma. Su identificación es fundamental para entender mejor los procesos de regulación de la vía, del desarrollo embrionario y de otros procesos patológicos que involucran a Notch. Los homólogos de Hairless en insectos poseen al menos tres dominios altamente conservados, de los cuales el dominio de unión a Supresor de hairless, una proteína propia de la vía, es el más conservado. Mediante análisis in silico y técnicas de biología molecular se identificó y delimitó un péptido con potencial inmunogénico del dominio de unión a Supresor de hairless de la proteína hairless de Drosophila melanogaster. Este péptido se usó como antígeno en gallinas, para generar anticuerpos policlonales. Los sueros se probaron contra extracto total de proteína de embriones de la mosca de la fruta

Células madre y células troncoembrionarias: diferencias biológicas

Las células madre o progenitoras se han clasifi cado según su lecho natural de derivación, su aptitud y su función diferencial, en tres tipos: totipotenciales, pluripotenciales y multipotenciales; las primeras, llamadas células madre embrionarias, derivadas del cigoto en estadio de mórula; las segundas, provenientes de la masa celular interna (MCI) del blastocisto; las terceras, denominadas células madre somáticas, se encuentran en algunos tejidos adultos. La diferencia biológica radica en su capacidad para producir diversos linajes celulares; las totipotentes están biológicamente aptas para dar origen a un organismo completo; las pluripotentes pueden generar todos los tipos celulares, incluida la línea germinal; y las multipotentes pueden derivar en linajes específi cos. Las células troncales tienen la capacidad de autorrenovación y de originar células hijas comprometidas con determinadas rutas del desarrollo; se caracterizan porque se dividen indefi nidamente y además se diferencian de manera morfológica y funcional. Cuando las células troncoembrionarias y algunos tipos de células progenitoras se extraen de su entorno natural y se cultivan in vitro, en medios adecuados, pueden ser transfectadas y se mantienen indiferenciadas, sin perder su potencial; así, al reintroducirse a blastocistos receptores continúan su desarrollo. El estudio y la compilación de información acerca de estas cualidades biológicas de función diferencial, así como su utilidad para aprovechar la recombinación homóloga y para producir modelos animales que generen proteínas recombinantes, aplicables en medicina preventiva-regenerativa y tratamiento de enfermedades, constituyen el objetivo de este trabajo