Transformación vía Agrobacterium tumefaciens para inducir tolerancia a la podredumbre blanca del aguacate

Comunicación presentada en el VII World Avocado Congress, celebrado en Cairns (Australia) del 5 al 9 de septiembre de 2011.[EN] One of the most important limiting factors for avocado production in Spain is the disease caused by the fungus Rosellinia necatrix . Genetic manipulation could be useful for the introduction of fungal resistance traits into this crop. A n efficient Agrobacterium - mediated transformation protocol for avocado using AGL1 Agrobacterium strain and somatic embryos as the target material has been established by our group, although embryo conversion rate into plants needs to be improved. For that reason, we are using the strawberry, another Rosellinia necatrix ́s host, as model species to test the effect of several transgenes (two of fungal origin, chit 42 chitinase and β - 1,3 - glucanase from Trichoderma harzianum , and one of plant origin, At NPR1), on inducing tolerance to this fungus. Strawberry transformation with the β - 1,3 - glucanase gene has allowed the selection of two lines, β6 and β10, with enhanced tolerance to R. necatrix while no positive results were obtained following transformation with the chit - 42 gene. In relation to the At NPR1 gene more than 30 independent transgenic lines have been obtained whose tolerance to R. necatrix is currently under evaluation. Concerning avocado transformation, more than 10 independent transgenic lines (derive d from an embryogenic line of an immature Duke7 zygotic embryo) have been obtained with At NPR1 gene. Plants have been recovered from one line and efforts are underway to recover plants from other lines following micrografting of the transgenic sprouted sho ots onto in vitro germinated seedlings.[ES] Uno de los factores limitantes de la producción de aguacate en España es la enfermedad causada por el hongo R. necatrix. La manipulación genética podría ser de utilidad para introducir caracteres de resistencia en este cultivo. Se ha establecido un sistema eficiente de transformación en aguacate usando la cepa de Agrobacterium AGL1 y células embriogénicas como diana, sin embargo, la conversión en plantas de los embriones transgénicos necesita ser mejorada. Por esta razón, estamos utilizando la fresa, otro huésped de R. necatrix, como especie modelo para testar el efecto de varios transgenes (2 de origen fúngico, la quitinasa chit-42 y la β-1,3-glucanasa de Trichoderma harzianum, y uno derivado de plantas, AtNPR1), en la inducción de tolerancia a este patógeno tras la transformación de esta especie. La transformación de fresa con el gen de β -1,3-glucanasa ha permitido la selección de dos líneas, β6 y β10, con mayor tolerancia a R. necatrix, mientras que no se han obtenido resultados positivos con el gen chit-42. En relación con el gen AtNPR1, se han obtenido más de 30 líneas transgénicas independientes, cuya tolerancia frente a R. necatrix se está evaluando en la actualidad. En relación con la transformación de aguacate, más de 10 líneas transgénicas independientes (derivadas de una línea embriogénica obtenida a partir de un embrión zigótico inmaduro del cv. Duke 7) se han obtenido con el gen AtNPR1. Se han recuperado plantas de una línea y actualmente se está intentando recuperar plantas de otras líneas mediante microinjerto de los embriones transgénicos germinados.Este trabajo se ha realizado en el marco del proyecto AGL2008 - 05453 - C02 - 01/AGR.Peer Reviewe

Credit Supply: Identifying Balance-Sheet Channels with Loan Applications and Granted Loans

To identify credit availability we analyze the extensive and intensive margins of lending with loan applications and all loans granted in Spain. We find that during the period analyzed both worse economic and tighter monetary conditions reduce loan granting, especially to firms or from banks with lower capital or liquidity ratios. Moreover, responding to applications for the same loan, weak banks are less likely to grant the loan. Our results suggest that firms cannot offset the resultant credit restriction by turning to other banks. Importantly the bank-lending channel is notably stronger when we account for unobserved time-varying firm heterogeneity in loan demand and quality

The Impact of the Basel III Liquidity Coverage Ratio on Macroeconomic Stability: An Agent-Based Approach

Commercial banks across the world have been implementing the Basel III accord, which is the most important international response to the 2007-2008 financial crisis. Particularly, the liquidity coverage ratio (LCR) introduced by the Basel III accord is the first global standard for banking liquidity management. Does this requirement work? And what macroeconomic effects does it produce? In order to address such crucial issues, the author develops a stock-flow consistent (SFC)/agent-based computational economic (ACE) model. As he knows, there is a real danger that the requirement restricts the availability of bank credit and hence reducing economic activity. However, in comparison to the prior works, the author finds that the externality is presented as a positive self-reinforcing feedback process, which causes the macroeconomic conditions to spiral downwards. This dynamic feedback process that hardly can be revealed by the current macroeconomic models based on equilibrium analyses. The results also shed some light on the fact that credit creation substantially affects economic activity and macroeconomic stability, as the fundamental reason leading to the results. Therefore, the bank as the driver of credit creation is crucial in an economy, and meanwhile bank regulations have great potential impacts on entire economy rather than only in the bank sector itself

Transformación vía Agrobacterium tumefaciens para inducir tolerancia a la podredumbre blanca del aguacate

Trabajo presentado en el VII World Avocado Congress, celebrado en Cairns (Australia) del 5 al 9 de septiembre de 2011.[ES] Uno de los factores limitantes de la producción de aguacate en España es la enfermedad causada por el hongo R. necatrix. La manipulación genética podría ser de utilidad para introducir caracteres de resistencia en este cultivo. Se ha establecido un sistema eficiente de transformación en aguacate usando la cepa de Agrobacterium AGL1 y células embriogénicas como diana, sin embargo, la conversión en plantas de los embriones transgénicos necesita ser mejorada. Por esta razón, estamos utilizando la fresa, otro huésped de R. necatrix, como especie modelo para testar el efecto de varios transgenes (2 de origen fúngico, la quitinasa chit-42 y la β-1,3-glucanasa de Trichoderma harzianum, y uno derivado de plantas, AtNPR1), en la inducción de tolerancia a este patógeno tras la transformación de esta especie. La transformación de fresa con el gen de β-1,3-glucanasa ha permitido la selección de dos líneas, β6 y β10, con mayor tolerancia a R. necatrix, mientras que no se han obtenido resultados positivos con el gen chit-42. En relación con el gen AtNPR1, se han obtenido más de 30 líneas transgénicas independientes, cuya tolerancia frente a R. necatrix se está evaluando en la actualidad. En relación con la transformación de aguacate, más de 10 líneas transgénicas independientes (derivadas de una línea embriogénica obtenida a partir de un embrión zigótico inmaduro del cv. Duke 7) se han obtenido con el gen AtNPR1. Se han recuperado plantas de una línea y actualmente se está intentando recuperar plantas de otras líneas mediante microinjerto de los embriones transgénicos germinados.[EN] One of the most important limiting factors for avocado production in Spain is the disease caused by the fungus Rosellinia necatrix. Genetic manipulation could be useful for the introduction of fungal resistance traits into this crop. An efficient Agrobacterium-mediated transformation protocol for avocado using AGL1 Agrobacterium strain and somatic embryos as the target material has been established by our group, although embryo conversion rate into plants needs to be improved. For that reason, we are using the strawberry, another Rosellinia necatrix´s host, as model species to test the effect of several transgenes (two of fungal origin, chit 42 chitinase and β-1,3-glucanase from Trichoderma harzianum, and one of plant origin, AtNPR1), on inducing tolerance to this fungus. Strawberry transformation with the β-1,3-glucanase gene has allowed the selection of two lines, β6 and β10, with enhanced tolerance to R. necatrix while no positive results were obtained following transformation with the chit-42 gene. In relation to the AtNPR1 gene more than 30 independent transgenic lines have been obtained whose tolerance to R. necatrix is currently under evaluation. Concerning avocado transformation, more than 10 independent transgenic lines (derived from an embryogenic line of an immature Duke7 zygotic embryo) have been obtained with AtNPR1 gene. Plants have been recovered from one line and efforts are underway to recover plants from other lines following micrografting of the transgenic sprouted shoots onto in vitro germinated seedlings.Financial support: Grant AGL2008-05453-C02-01/AGR.Peer reviewe

Estudio de resistencia a Rosellinia necatix de plantas de fresa transformadas con genes de Trichoderma

Póster presentado en el XV Congreso de la Sociedad Española de Fitopatología, celebrado en Vitoria del 27 de septiembre al 1 de octubre de 2010.Trichoderma es un hongo usado como agente de biocontrol en condiciones de campo. Su capacidad de biocontrol parece estar basada en la expresión de enzimas hidrolíticas, quitinasas y glucanasas, que afectan a la degradación de las paredes de hongos patógenos. En este trabajo se utilizaron plantas de fresa transformadas con genes de Trichoderma. En un primer experimento se determinó la dosis de inóculo de Rosellinia necatrix y una escala de síntomas adecuada para observar el progreso de la podredumbre blanca causada por este hongo en plantas del cv. Camarosa. Para ello se inocularon plantas de 4 meses de edad, crecidas en maceta, y aclimatadas posteriormente a condiciones de ambiente controlado. Las dosis estudiadas fueron 0,25-0,50-1,00-1,50 gr. de trigo colonizado por el patógeno, aplicadas al suelo de cada maceta. La dosis seleccionada fue 0,5 gr., ya que permitía observar el progreso de la enfermedad en las plantas, muriendo todas ellas en un intervalo de 28-33 días, desde la inoculación. En base a la aparición de síntomas se elaboró una escala de 1 a 5. 1: Planta sana; 2: Aparición de manchas rojizas y enrojecimiento de pecíolos; 3: Comienzo de amarilleo de hojas, pecíolos rojos y decaimiento de la planta; 4: Marchitez total, comienzo de aparición de necrosis foliar; 5: Planta muerta. Se realizó un segundo experimento con 0,25-0,50 gr. para confirmar la dosis seleccionada y la escala de síntomas. Con esta dosis de inóculo y la escala de síntomas elaborada, se realizaron un tercer y cuarto experimento, en los que se evaluaron 9 líneas independientes transformadas con el gen β,1,3-glucanasa y 6 líneas independientes transformadas con el gen de quitinasa chi-42 (ROSA), respectivamente. En el tercer experimento, el mayor grado de tolerancia lo mostró la línea β10 mientras que β6 y β15, presentaron una tolerancia media. En el cuarto experimento, las líneas ROSA 15 y ROSA 25 pueden considerarse ligeramente más tolerantes que el resto. En la actualidad se están realizando experimentos adicionales que confirmen los resultados obtenidos.Peer Reviewe

FANPR3.1 gene silencing of strawberry (Fragaria x ananassa) creates fruit resistance to Colletotrichum acutatum infection and suggests a role in defense like to the ATNPR3/ATNPR4 in arabidopsis

Trabajo presentado en el XXXIX Congreso Nacional de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular (SEBBM), celebrado en Salamanca del 5 al 8 de septiembre de 2016.Higuera-Sobrino, J. J. et al.N

Resistencia frente a Colletotrichum acutatum en frutos de fresa: prueba de función de genes mediante ensayos de expresión transitoria

Trabajo presentado en el XVIII Congreso de la Sociedad Española de Fitopatología (SEF), celebrado en Palencia del 20 al 23 de septiembre de 2016.La fresa (Fragaria ananassa) es fuente de vitaminas, antioxidantes y metabolitos de múltiples beneficios para la salud. Su producción anual en España (tercer productor mundial) supera 200.000 toneladas (>300 millones euros) y sufre la acción de gran variedad de organismos fitopatógenos que causan importantes pérdidas. En general, las plantas han desarrollado mecanismos de defensa naturales frente al ataque de patógenos. En plantas modelo, existe gran evidencia de que miembros de las familias génicas NPR, WRKY o E3-Ubiquitin ligasas, entre otras, son clave para la activación de rutas moleculares que conducen a la defensa. En fresa, hemos identificados genes homólogos a miembros de dichas familias. Para conocer la verdadera función de dichos genes hemos obtenido construcciones plasmídicas, mediante sistema Gateway, para sobreexpresión/silenciamiento de los mismos en la fresa y hemos desarrollado un sistema de ensayo fitopatológico tras su expresión transitoria en fruto. Así, a frutos de fresa se inyectó (a una mitad del fruto) una suspensión de Agrobacterium tumefaciens portadora de la construcción de interés. A las 48h estos frutos se inocularon con Colletotrichum acutatum en ambas mitades, mediante filtros-disco (5 mm) estériles previamente sumergidos en suspensión de 104conidias/mL. Tras 5 días se realizaron cortes longitudinales desde los puntos de inoculación, evaluándose la penetración fúngica según escala 1-3 (1 fruto sano, 2 penetración moderada y 3 penetración profunda) en cada una de las 2 caras (agroinyectada/no agroinyectada), obteniéndose de esta forma un ratio (valor zona-agroinyectada/valor zona-no agroinyectada) para cada fruto. Análisis preliminares muestran diferencias entre frutos control (no agroinyectados y agroinyectados medio Murashige-Skoog) y frutos agroinyectados con construcciones de genes tipo NPR y WRKY, que permiten implicarlos de forma inequívoca en defensa. Según estos resultados actualmente poseemos un sistema fiable de ensayo de susceptibilidad a C. acutatum, lo que permitirá evaluar la implicación de genes en defensa a este patógeno.Peer Reviewe

Transient silencing of the FaWRKY1 strawberry gene (Fragaria x ananassa) in fruit induces resistance to Colletotrichum acutatum infection

Trabajo presentado en el 15th Congress of the Mediterranean Phytopathological Union (Plant health sistaining Mediterranean ecosystems), celebrado en Córdoba (España) del 20 al 23 de junio de 2017.Anthracnose, caused by Colletotrichum acutatum, is responsible for significant yield losses in commercial strawberry production worldwide. For this reason, it is of interest to uncover the molecular basis underlying this strawberry/pathogen interaction. Previously, FaWRKY1 was identified as an important element mediating defence responses.This research was supported by the Project P12-AGR-2174 (Junta de Andalucía, Spain).Peer reviewe

Recessions after Systemic Banking Crises: Does it Matter How Governments Intervene?

Systemic banking crises often continue into recessions with large output losses (Reinhart & Rogoff 2009a). In this paper we ask whether the way Governments intervene in the financial sector has an impact on the economy's subsequent performance. Our theoretical analysis focuses on bank incentives to manage bad loans. We show that interventions involving bank restructuring provide banks with incentives to restructure bad loans and free up resources for new economic activity. Other interventions lead banks to roll over bad loans, tying up resources in distressed firms. Our analysis suggests that zombie banks are a drag on economic recovery. We then analyze 65 systemic banking crises from the period 1980-2012, of which 25 are part of the recent global financial crisis, to answer the question: how effective are intervention measures from the macro perspective, in particular how do they affect recession duration? We find that bank restructuring, which includes bank recapitalizations, significantly reduces recession duration. The effect of liquidity support on the probability of recovery is positive but smaller. Blanket guarantees on bank liabilities and monetary policy do not have a significant effect