Localización y actividad de los genes RNA ribosómico 18s+28s en el cerdo, el Babirusa y el Pécari de hocico blanco

En el presente estudio, la hibridación fluorescente in situ ha sido empleada para mapear los clusters - regiones organizadoras del nucleolo o NORs- de genes RNA ribosómico 18S+28S en babirusa, Babyrousa babyrussa (familia Suidae) y el pécari de hocico blanco, Tayassu pecar¡ (familia Dicotylidae). Además, se empleó la tinción selectiva con plata para identificar los genes rRNA que transcriben activamente (Ag-NORs). Los resultados son comparados con los obtenidos previamente para el cerdo doméstico (Sus scrofa) (Bosma et al., 1991; Mellink et al., 1992 y 1994). Los cromosomas metafásicos fueron preparados a partir de linfocitos sanguíneos de un babirusa macho y de un pécari macho siguiendo los procedimientos estándar. Los cromosomas fueron GTG bandeados y fotografiados antes de la hibridación con una sonda rDNA 18S+28S humana biotinilada. La tinción con plata de las NORs fue realizada según la descripción de Mellink et al. (1992), Los números de Ag-NORs fueron determinados en, al menos, 30 células. La numeración de los cromosomas de babirusa se realiza de acuerdo con Bosma y de Haan (1981) y la numeración de los cromosomas de pécari se basa en la de Hufty et al. (1973). En el cerdo, los genes rRNA 18S+28S, se localizan en las constricciones secundarias de los cromosomas 8,10 y 16y las Ag-NORs están presentes en los cromosomas 8 y 10. Las NORs de los cromosomas 8 varían en la propiedad de tinción con plata, mientras que las NORs de ambos homólogos del par 10, son consistentemente Ag-positivas. En el babirusa, hemos mapeado los genes rRNA 18S+28S en los cromosomas 6,8 y 10. Los últimos cromosomas corresponden a loscromosomas 8 y 10 del cerdo doméstico, y mostraron respuestas a la tinción con plata similares a las observadas en el cerdo. Los cromosomas 6 fueron Ag-negativos. En el pécari, hemos localizado los genes rRNA 18S+28S en los lugares de las constricciones secundarias de los cromosomas 4 y 8. La tinción con plata, indica que los genes en esos cuatro dusters son transcripcionalmente activos. Así, en esas tres especies, se ha encontrado que, un máximo de cuatro clusters de genes rRNA, contribuye ala producción de rRNA, aun si hay más clusters presentes

Localización y actividad de los genes RNA ribosómico 18s+28s en el cerdo, el Babirusa y el Pécari de hocico blanco

En el presente estudio, la hibridación fluorescente in situ ha sido empleada para mapear los clusters - regiones organizadoras del nucleolo o NORs- de genes RNA ribosómico 18S+28S en babirusa, Babyrousa babyrussa (familia Suidae) y el pécari de hocico blanco, Tayassu pecar¡ (familia Dicotylidae). Además, se empleó la tinción selectiva con plata para identificar los genes rRNA que transcriben activamente (Ag-NORs). Los resultados son comparados con los obtenidos previamente para el cerdo doméstico (Sus scrofa) (Bosma et al., 1991; Mellink et al., 1992 y 1994). Los cromosomas metafásicos fueron preparados a partir de linfocitos sanguíneos de un babirusa macho y de un pécari macho siguiendo los procedimientos estándar. Los cromosomas fueron GTG bandeados y fotografiados antes de la hibridación con una sonda rDNA 18S+28S humana biotinilada. La tinción con plata de las NORs fue realizada según la descripción de Mellink et al. (1992), Los números de Ag-NORs fueron determinados en, al menos, 30 células. La numeración de los cromosomas de babirusa se realiza de acuerdo con Bosma y de Haan (1981) y la numeración de los cromosomas de pécari se basa en la de Hufty et al. (1973). En el cerdo, los genes rRNA 18S+28S, se localizan en las constricciones secundarias de los cromosomas 8,10 y 16y las Ag-NORs están presentes en los cromosomas 8 y 10. Las NORs de los cromosomas 8 varían en la propiedad de tinción con plata, mientras que las NORs de ambos homólogos del par 10, son consistentemente Ag-positivas. En el babirusa, hemos mapeado los genes rRNA 18S+28S en los cromosomas 6,8 y 10. Los últimos cromosomas corresponden a loscromosomas 8 y 10 del cerdo doméstico, y mostraron respuestas a la tinción con plata similares a las observadas en el cerdo. Los cromosomas 6 fueron Ag-negativos. En el pécari, hemos localizado los genes rRNA 18S+28S en los lugares de las constricciones secundarias de los cromosomas 4 y 8. La tinción con plata, indica que los genes en esos cuatro dusters son transcripcionalmente activos. Así, en esas tres especies, se ha encontrado que, un máximo de cuatro clusters de genes rRNA, contribuye ala producción de rRNA, aun si hay más clusters presentes

Localización del 5S RDNA en el cerdo, el babirusa y el pécari de hocico blanco mediante hibridacion fluorescente "in situ"

En los eucariotas superiores, los genes para el RNA ribosómico (rDNA) están organizados en dos clases distintas, representadas por familias de genes altamente repetidas. Un a clase de rDNA, comprende los genes que codifican el RNA ribosómico 18S, 5.85 y 28S, la otra clase comprende los genes que codifican el RNA ribosómico 5S. En el presente estudio, hemos localizado el 55 rDNA, en el cerdo dornéstico Sus scrofa, 2n=38) y sus relacionados salvajes el babirusa (Babyrousa babyrussa, 2n=38) y el pécari de hocico blanco (Tayassu pecan, 2n=26). El cerdo y el babirusa pertenecen, los dos, a la familia Suidae, mientras que el pécari, se encuadra en una familia distinta: Dicotylidae. Los cromosomas metafásicos fueron preparados a partir de linfocitos sanguíneos, siguiendo los procedimientos estándar, y los cromosomas fueron GTG-bandeados antes de la hibridación. La hibridación fluorescente in situ fue llevada a cabo usando una sonda de ratón, que incluía el gen 121 bp5S rRNA. La numeración de los cromosomas del babirusa y el pécari se atiene a lo indicado por Bosma y de Haan (1981) y Hufty o tal. (1973) respectivamente

Homología cromosómica entre el cerdo, el babirusa y el pécari de hocico blanco, estudiada mediante coloración e hibridación "in situ"

Dentro del grupo de los cerdos y especies similares, el cerdo doméstico (Sus scrofa), el babirusa (Babyrousa babyrussa) y el pécari de hocico blanco (Tayassu pecan) son animales distantemente relacionados. Las dos primeras especies pertenecen a la familia euroasiática Suidae, la tercera especie a la familia americana Dicotylidae. Estudios citogenéticos comparativos empleando técnicas de bandeo han demostrado que quince de los dieciocho autosomas del cerdo (2n= 38) corresponden directamente a trece de los dieciocho autosomas del babirusa (2n= 38), mientras que esas dos especies y el pécari de hocico blanco (2n= 26), no muestran homologías cromosómicas obvias. Hemos sometido cromosomas del babirusa y pécari de hocico blanco a hibridación y coloración in situ con sondas especificas para los cromosomas porcinos (cerdo doméstico) 1, 3 y 6, que no tienen un equivalente directamente reconocible en el cariotipo del babirusa. Nuestros resultados revelan homologías entre: 1) cromosoma 1 del cerdo, cromosoma 15 completo del babirusa y partes de los cromosomas 3 y 7 del pécari, 2) cromosoma 3 del cerdo, cromosomas 12 y 17 completos del babirusa y partes de los cromosomas 3 y 4 del pecarí y 3) cromosoma 6 del cerdo, cromosomas 6 y 14 completos del babirusa y partes de los cromosomas 1 y 4 del pécari. La numeración de los cromosomas del babirusa se realiza de acuerdo con Bosma y de Haan (1981) y la numeración de los del pecari de hocico blanco con Hufty et al. (1973). Con los resultados de este estudio, la homología cromosómica entre el cerdo doméstico (Sus scrofa) y Babyrousa babyrussa, ha sido aclarada completamente. Además cuando se compara el cerdo doméstico y el pécari de hocico blanco, las relaciones entre los cromosomas investigados parecen ser más complejas que en el caso del cerdo doméstico y el babirusa. Esta observación esta de acuerdo con las hipotéticas distancias filogenéticas entre las tres especies: Sus scrofa y Babyrousa babyrussa están mútuamente más relacionadas entre sí que ambas con Tayassu pecar