Lyme disease in the state of Tocantins, Brazil: report of the first cases

AbstractLyme disease is an underdiagnosed zoonosis in Brazil. There are no cases registered in the state of Tocantins, the newest Brazilian state. The cases of three patients in contact with rural areas in three Tocantins’ districts are herein described, and the Brazilian literature is reviewed

Genus-specific kinetoplast-DNA PCR and parasite culture for the diagnosis of localised cutaneous leishmaniasis: applications for clinical trials under field conditions in Brazil

The positivities of two methods for the diagnosis of localised cutaneous leishmaniasis (CL) were estimated in 280 patients enrolled in a clinical trial. The trial was conducted in an endemic area of Leishmania (Viannia) braziliensis and trial participants were patients with skin ulcers and positive leishmanin skin tests. Patients underwent aspirative skin punctures of the ulcerated lesions and lymph nodes for in vitro cultures, which were processed under field conditions at the local health centre. Skin lesion biopsies were tested at a reference laboratory using kinetoplastid DNA (kDNA)-PCR to detect DNA. The median time required to obtain a positive culture from the skin samples was seven days and the contamination rate of the samples was 1.8%. The positivities of the cultures from skin lesions, kDNA-PCR and the combination of the two methods were 78.2% (95% CI: 73-82.6%), 89.3% (95% CI: 85.1-92.4%) and 97.1% (95% CI: 94.5-98.5%). We conclude that parasite culture is a feasible method for the detection of Leishmania in field conditions and that the combination of culture and PCR has a potential role for the diagnosis of CL in candidates for clinical trials

Effect of a hydrophilic formulation of topical paromomycin on cutaneous leishmaniasis among patients with contraindications for treatment with pentavalent antimonials

Descrevem-se o efeito terapêutico e os eventos adversos associados com o uso tópico de paromomicina 10% em gel na leishmaniose cutânea. Quinze pacientes com leishmaniose cutânea cumpriram os critérios de inclusão descritos a seguir: contra-indicação para o uso de antimoniato de meglumina, intradermorreação de Montenegro positiva e até quatro lesões ulceradas. A fórmula foi prescrita duas vezes ao dia por 20 dias. Quatorze pacientes estiveram disponíveis para a avaliação do desfecho terapêutico e a proporção de cura foi de 21,4% (3/14), 50% melhoraram até a epitelização completa e a proporção de falha foi de 28,6%. Nove pacientes que não apresentaram cura inicialmente foram re-tratados. Oito receberam uma nova série de paromomicina tópica e um foi tratado com antimoniato de meglumina. Dois pacientes não receberam novo tratamento e tiveram melhora lenta e contínua. Cinco de oito pacientes retratados com paromomicina tópica alcançaram a cura clínica, e três apresentaram falha, incluindo um paciente que tinha apresentado melhora com o primeiro tratamento. Os eventos adversos foram leves e locais em 53,3% dos pacientes e nunca levaram à suspensão do tratamento.The therapeutic effect of and adverse events associated with topical use of 10% paromomycin gel on cutaneous leishmaniasis are described. Fifteen patients with cutaneous leishmaniasis fulfilled the following inclusion criteria: contraindication for the use of meglumine antimoniate, positive Montenegro skin test and up to four ulcerated lesions. The formula was prescribed twice a day for 20 days. Fourteen patients were available for the therapeutic outcome evaluation. The cure rate was 21.4% (3/14); 50% improved as far as complete epithelialization; and the failure rate was 28.6%. Nine patients who did not initially present cure were retreated. Eight received a new series of topical paromomycin and one was treated with meglumine antimoniate. Two patients did not receive any new treatment and had continuous slow improvement. Five out of the eight patients retreated with topical paromomycin achieved clinical cure, and three presented failure, including one patient who had shown any improvement with the first treatment. For 53.3% of the patients, the adverse events were mild and local and never led to treatment suspension

Investigações clínicas para o SUS, o Sistema Único de Saúde brasileiro

CONTEXTO E OBJETIVO: O desenvolvimento científico e tecnológico é crucial para avançar o Sistema Único de Saúde e promover qualidade de vida. Analisou-se como o Ministério da Saúde (MS) apoiou a pesquisa clínica para proporcionar autonomia, auto-suficiência, competitividade e inovação no complexo industrial produtivo da saúde, segundo a Política Nacional de Ciência, Tecnologia e Inovação em Saúde. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo descritivo baseado em dados secundários, realizado no Departamento de Ciência e Tecnologia, Ministério da Saúde. MÉTODOS: O banco de dados gerencial de pesquisas do MS, PesquisaSaúde, foi analisado de 2002 a 2009, empregando a palavra chave "pesquisa clínica" nos campos "sub-agenda principal" ou "sub-agenda secundária". Foram encontrados 368 projetos, classificados em seis categorias: pesquisa biomédica básica, estudos pré-clínicos, pesquisa clínica expandida, ensaios clínicos, infraestrutura e avaliação de tecnologias em saúde. A partir da revisão estruturada sobre "financiamento da pesquisa clínica", resultados de países selecionados são apresentados e discutidos. RESULTADOS: O total investido foi R$140 milhões. A maioria dos projetos apoiou "pesquisa biomédica básica" e os maiores investimentos foram em "ensaios clínicos" e projetos de "infra-estrutura". O Sudeste deteve a maior proporção de projetos e recursos financeiros. Em alguns aspectos, o Brasil está à frente de outros países do BRICS (Rússia, Índia, China e África do Sul), sobretudo no estabelecimento da Rede Nacional de Pesquisa Clínica. CONCLUSÃO: O MS assegurou investimentos para incentivar a pesquisa clínica no Brasil, contribuindo para promover a coesão entre os investigadores, as políticas de saúde e o complexo industrial da saúde.CONTEXT AND OBJECTIVE: Scientific and technological development is crucial for advancing the Brazilian health system and for promoting quality of life. The way in which the Brazilian Ministry of Health has supported clinical research to provide autonomy, self-sufficiency, competitiveness and innovation for the healthcare industrial production complex, in accordance with the National Policy on Science, Technology and Innovation in Healthcare, was analyzed. DESIGN AND SETTING: Descriptive investigation, based on secondary data, conducted at the Department of Science and Technology, Ministry of Health. METHODS: The Ministry of Health's research management database, PesquisaSaúde, was analyzed from 2002 to 2009, using the key word "clinical research" in the fields "primary sub-agenda" or "secondary sub-agenda". The 368 projects retrieved were sorted into six categories: basic biomedical research, preclinical studies, expanded clinical research, clinical trials, infrastructure support and health technology assessment. From a structured review on "clinical research funding", results from selected countries are presented and discussed. RESULTS: The amount invested was R$ 140 million. The largest number of projects supported "basic biomedical research", while the highest amounts invested were in "clinical trials" and "infrastructure support". The southeastern region had the greatest proportion of projects and financial resources. In some respects, Brazil is ahead of other BRICS countries (Russia, India, China and South Africa), especially with regard to establishing a National Clinical Research Network. CONCLUSION: The Ministry of Health ensured investments to encourage clinical research in Brazil and contributed towards promoting cohesion between investigators, health policies and the healthcare industrial production complex

Caracterização e acompanhamento geo-referenciado do primeiro foco de transmissão de leishmaniose visceral humana em Brasília, Distrito Federal.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2010.Foi desenvolvido um estudo transversal baseado na prova de intradermorreação de Montenegro (IDRM) para avaliar a infecção por Leishmania nas comunidades da Fercal, área rural da região de Sobradinho, Brasília - Distrito Federal entre 2007 e 2009. A pesquisa envolveu duas avaliações com intervalo de um ano entre uma e outra. Os indivíduos foram selecionados de forma aleatória, avaliando-se uma criança ou adolescente entre 2 e 14 anos em cada casa selecionada. No período inicial foram incluídas 700 pessoas, divididos de forma estratificada segundo o número de residências em cada comunidade. Além da IDRM foram realizados testes moleculares (PCR) e um teste imunocromatográfico (Kalazar detect™) para avaliar o estado de infecção por Leishmania. Foram colhidos dados pessoais e domiciliares visando a avaliação de fatores associados com a infecção por Leishmania. Na primeira avaliação obtivemos prevalência de 33,28% (IC95% 29,87 – 36,84) segundo a IDRM. A PCR foi positiva em quatro indivíduos nesta avaliação. A positividade da prova imunocromatográfica foi de zero em ambas as avaliações. A segunda avaliação - realizada na coorte de 396 suscetíveis segundo o primeiro inquérito - mostrou incidência da infecção de 23,2% (IC95% 19,27 – 27,58) segundo a IDRM, enquanto a PCR foi positiva em nove casos. A regressão logística multivariada tipo one step mostrou que as características associadas com a positividade à IDRM foram ter mais de sete anos de idade (OR=3,04; IC95% 1,86 - 4,99; p<0,01) e a presença de gambás no peridomicílio (OR=1,46; IC95% 1,02 - 2,10; p=0,04). Esta última característica mostrou-se também associada com a incidência de infecção por Leishmania (OR=3,22; IC95% 1,35 - 7,68; p=0,01). Uma abordagem diferente dos testes de regressão logística (stepwise forward) mostrou que além das características encontradas previamente, na primeira avaliação houve associações adicionais, como gênero masculino (OR=1,95; IC95% 1,19 - 3,17; p=0,01) e criação de aves domésticas diferentes de galinhas (OR=2,23; IC95% 1,19 - 4,18; p=0,01). Na segunda avaliação observaram-se associação da positividade à IDRM com convivência com cães suspeitos de leishmaniose visceral canina (OR=2,28; IC95% 1,02 - 5,10; p=0,04) e criação de aves domésticas (OR=2,94; IC95% 1,08 - 8,02; p=0,04). A análise espacial mostrou que a medida que as comunidades se afastam da área urbana de Sobradinho a intensidade de infecção aumenta. Concluiu-se que em áreas periurbanas de introdução recente de espécies viscerotrópicas de Leishmania existem algumas características associadas ao estado de infecção diferentes às descritas em áreas de colonização antiga por este parasito.A survey was developed based on the leishmanin test (IDRM) to evaluate the infection for Leishmania in the communities of Fercal, rural area of Sobradinho, Brasília - Federal District between 2007 and 2009. The research involved two evaluations with interval of one year between each one. The individuals were selected in a random way, being evaluated a child or adolescent between 2 and 14 years in each selected house. In the initial period 700 people were included, stratified according to the number of houses in each community. Besides leishmanin tests they were accomplished a immunocromatographic test (Kalazar detect™) and a molecular test (PCR) to evaluate the infection state for Leishmania. There were registered personal and home data seeking the evaluation of factors associated with the infection for Leishmania. In the first evaluation we obtained prevalence of 33,28% (95%CI 29,87 - 36,84) according to IDRM. PCR was positive in four individuals in this evaluation. The positivity of the immunocromatographic test was zero in both evaluations. The second evaluation - just accomplished with the 396 susceptible people according to the first survey - showed incidence of 23,2% (95%CI 19,27 - 27,58) according to IDRM, while PCR was positive in nine cases. The multivariate logistic regression type one step showed that characteristics associated with the positivity to IDRM were to be more than seven years old (OR=3,04; 95%CI 1,86 - 4,99; p < 0,01) and the presence of skunks in the neighborhood (OR=1,46; 95%CI 1,02 - 2,10; p=0,04). This last characteristic was also associated with the incidence of infection by Leishmania (OR=3,22; 95%CI 1,35 - 7,68; p=0,01). A different approach of the multivariate logistic regression tests (stepwise forward) showed that besides the characteristics previously cited, in the first evaluation there were additional associations, as masculine gender (OR=1,95; 95%CI 1,19 - 3,17; p=0,01) and creation of domestic birds different to chickens (OR=2,23; 95%CI 1,19 - 4,18; p=0,01). In the second evaluation they were observed association of the positivity to IDRM with presence of dogs suspicious of visceral canine leishmaniasis (OR=2,28; 95%CI 1,02 - 5,10; p=0,04) and creation of domestic birds (OR=2,94; 95%CI 1,08 - 8,02; p=0,04). The spatial analysis showed that in the measure that the communities stand back of the urban area of Sobradinho the infection intensity increases. It is concluded that in periurban areas of recent introduction of viscerotropic species of Leishmania there are some different characteristics associated to the infection state to described in areas of old colonization for this parasite

Avaliação da co-infecção por Leishmania em pessoas vivendo com HIV/Aids acompanhadas no Hospital Universitário de Brasília : estudo transversal com ênfase na leishmaniose visceral

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2006.Foi realizado um estudo descritivo transversal com o objetivo de estimar a magnitude da co-infecção Leishmania/HIV em pessoas vivendo com HIV/aids atendidos no Ambulatório de Doenças Infecciosas e Parasitárias do Hospital Universitário de Brasília. Foram incluídos no estudo 163 indivíduos, dos quais, sete apresentavam a síndrome clínica sugestiva de leishmaniose visceral e 156 eram assintomáticos em relação a essa síndrome. Após aceitação e assinatura do termo de consentimento, os pacientes foram submetidos à entrevista, exame clínico e coleta de sangue periférico para detecção da infecção por Leishmania spp. Os pacientes com a síndrome sugestiva de leishmaniose visceral foram submetidos também ao aspirado de medula óssea. O sangue coletado foi avaliado por meio das técnicas de imunofluorescência indireta (RIFI), ELISA com antígeno bruto de L. chagasi (ELISA), ELISA com antígeno rK39 (rK39) e reação em cadeia pela polimerase (PCR) com alvo de amplificação de 120 pares de bases da região conservada do k-DNA. Os espécimes de medula óssea foram submetidos ao exame direto em lâminas coradas pelo Giemsa, cultura para Leishmania e PCR. Vinte e seis pacientes (16%) apresentaram resultado positivo nas provas sorológicas. A positividade foi de 2,4% pela RIFI; 12,3% pelo ELISA; e 4,9% pelo rK39. A PCR do sangue periférico foi positiva em 1,8% dos pacientes. Nenhum dos pacientes sintomáticos teve resultados positivos no material obtido da medula óssea. A exploração de prováveis fatores associados com a positividade dos testes aplicados não revelou associação com: gênero, exposição prévia a área endêmica de leishmaniose, história de casos de leishmaniose visceral no grupo familiar ou na vizinhança e uso de drogas injetáveis. Observou-se associação estatisticamente significativa entre ter pelo menos um teste positivo e ser mais jovem (33 versus 39 anos; p=0,005); ter sorologia positiva para doença de Chagas (p=0,029); não ter evoluído para aids (p=0,004); não estar em uso de tratamento antiretroviral (p<0,001); e apresentar uma intercorrência infecciosa no momento da coleta do sangue para a avaliação sorológica. O estudo mostrou a importância da co-infecção Leishmania/HIV na amostra avaliada, em uma região que não era considerada até o ano de 2005 como área endêmica de leishmaniose visceral e que apresenta unicamente casos esporádicos de leishmaniose tegumentar. Provavelmente o teste de ELISA com antígeno bruto de Leishmania chagasi seja o que apresente maior potencial como teste de triagem para a detecção sensível de indivíduos co-infectados, no entanto, a especificidade do ensaio principalmente em pacientes com co-infecção por Trypanosoma cruzi e outras doenças causadas por micobactérias possa estar comprometida. A complexidade da técnica de PCR e sua baixa positividade nos casos assintomáticos ou subclínicos de co-infecção Leishmania/HIV limitam o seu uso como teste de triagem para a detecção sensível desta condição. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACTIn order to estimate the magnitude of Leishmania/HIV co-infection, it was conducted a transversal study in people living with HIV/AIDS assisted at the outpatient Infectious and Parasitic Diseases Clinic of the Brasilia University Hospital. One hundred sixty-three patients were enrolled, seven of whom presented the clinical syndrome suggestive of visceral leishmaniasis and 156 were asymptomatic. After acceptance and signature of the informed consent, patients were submitted to a structured interview, clinical examination and collection of venous peripheral blood to detect the infection by Leishmania spp. Patients with suspicion of visceral leishmaniasis were submitted to bone marrow aspiration. The collected blood was evaluated by means of Indirect immunofluorescence test (IFAT), ELISA using soluble antigen of Leishmania chagasi (ELISA), ELISA with rK39 antigen (rK39) and polimerase chain reaction (PCR) targeted to a k-DNA conserved region of 120 bp. Bone marrow aspirate was submitted to direct examination in smears stained by Giemsa, culture for Leishmania and PCR. Twenty-six patients (16%) had positive serologic tests. The positivity was 2.4% by IFAT; 12.3% by ELISA; and 4,9% by rK39. PCR in blood was positive in three patients (1.8%). None of the symptomatic patients had positive results in bone marrow. The exploration of probable factors associated with the positivity of the applied tests did not revealed associations with: gender, previous exposition to visceral leishmaniasis endemic area, history of relatives or neighbors with visceral leishmaniasis, neither history of intravenous drug abuse. Significant statistical association was observed among positive tests and younger age (33 vs 39 years old; p=0,005); positive serologic test for Chagas disease (p=0,029); non-AIDS disease stage (p=0,004); non-use of antiretroviral therapy (p<0,001); and the presence of an infectious intercurrence at the moment of blood collection. The study demonstrated the importance of Leishmania/HIV co-infection in the assessed sample, in a region that was not considered as endemic area for visceral leishmaniasis until 2005, and only sporadic cases of cutaneous leishmaniasis in the last decades. The ELISA performed with soluble antigen of L.chagasi seems to be the method with the greater potential for the sensitive screening in order to detect Leishmania/HIV co-infected individuals. However, the specificity could be jeopardized in patients co-infected with Trypanosoma cruzi and other diseases caused by mycobacteria. The complexity and low positivity of PCR in the asymptomatic cases of Leishmania/HIV co-infection limit its use as screening of this condition. _______________________________________________________________________________________ RESUMENFue realizado un estudio descriptivo transversal con el objetivo de estimar la magnitud de la co-infección Leishmania/HIV en personas viviendo com HIV/SIDA atendidas en el Consultório de Enfermedades Infecciosas y Parasitárias del Hospital Universitário de Brasília. Fueron incluidos 163 indivíduos, de los cuales siete presentaban el síndrome clínico sugestivo de leishmaniasis visceral y 156 eran asintomáticos en relação al sindrome. Luego de la aceptación y firma del término de consentimiento, los pacientes fueron sometidos a entrevista, examen clínico y colecta de sangre periférica para detección de la infección por Leishmania spp. Los pacientes com el síndrome sugestivo de leishmaniasis visceral fueron sometidos también a aspirado de médula ósea. La sangre colectada fue evaluada por médio de las técnicas de imunofluorescencia indirecta (RIFI), ELISA con antígeno bruto de L. chagasi (ELISA), ELISA con antígeno rK39 (rK39) y reacción em cadena de polimerasa (PCR) dirigida a amplificar 120 pares de bases de la región conservada del k-DNA. Las muestras de médula ósea fueron sometidas a examen directo em láminas teñidas con Giemsa, cultivo para Leishmania y PCR. Veintiseis pacientes (16%) presentaron resultado positivo en las pruebas serológicas. La positividad fue de 2,4% para RIFI; 12,3% para ELISA; y 4,9% para rK39. La PCR en sangre periférica fue positiva en 1,8% de los pacientes. Ningún paciente sintomático tuvo resultados positivos en médula ósea. La exploración de probables factores asociados com la positividad de las pruebas aplicados no reveló asociación com gênero, exposición previa a área endêmica de leishmaniasis visceral, historia de casos de leishmaniasis visceral en el grupo familiar o en la vecindad y uso de drogas inyectables. Se observó asociación estadísticamente significativa entre tener por lo menos una prueba positiva y ser más joven(33 vs 39 años; p=0,005); tener serología positiva para enfermedad de Chagas (p=0,029); no haber desarrollado SIDA (p=0,004); no estar en uso de tratamiento antiretroviral (p<0,001); y presentar una intercurrencia infecciosa concomitante a la obtención de sangre venosa para la evaluación. El estudio mostró la importancia de la co-infección Leishmania/HIV en la muestra evaluada, en una región que no era considerada hasta el año 2005 como área endémica de leishmaniasis visceral y que presenta únicamente casos esporádicos de leishmaniasis cutánea. Probablemente, la prueba de ELISA con antígeno bruto de L. chagasi sea la que presente el mayor potencial como método de tamizaje para la detección sensible de indivíduos co-infectados, sin embargo, la especificidade de la prueba principalmente en pacientes con co-infeción por Trypanosoma cruzi y otras enfermedades causadas por micobacterias puede estar comprometida. La complejidad de la técnica de PCR y su baja positividad em los casos asintomáticos de co-infección Leishmania/HIV limitan su uso como método de tamizaje para la detección sensible de esta condición

Are opossums a relevant factor associated with asymptomatic Leishmania infection in the outskirts of the largest Brazilian cities?

AbstractA population survey was conducted to explore the prevalence and factors associated with Leishmania infection in the Fercal region of the Federal District. The Fercal region is a group of neighborhoods in Brasília in which the first cases of visceral leishmaniasis were described. Leishmania infection was established by a positive leishmanin test. Although other tests were performed in the study (an immunochromatographic assay (Kalazar detect®) and a molecular assay), only the leishmanin skin test provided sufficient results for the measurement of the disease prevalence. Data on the epidemiological, clinical and environmental characteristics of individuals were collected along with the diagnostic tests. After sampling and enrollment, seven hundred people from 2 to 14 years of age were included in the study. The prevalence of Leishmania infection was 33.28% (95% CI 29.87–36.84). The factors associated with Leishmania infection according to the multivariate analysis were age of more than seven years and the presence of opossums near the home. Age is a known factor associated with Leishmania infection; however, the presence of wild animals, as described, is an understudied factor. The presence of opossums, which are known reservoirs of Leishmania, in peri-urban areas could be the link between the rural and urban occurrence of visceral leishmaniasis in the outskirts of largest Brazilian cities, as suggested by previous studies