Etude de l’effet d’un régime riche en huile de palme sur l’expression génétique des facteurs myogéniques

Un niveau élevé d'acides gras saturés (AGS) dans le sang a un effet délétère sur les muscles squelettiques en inhibant à la fois la régénération des fibres musculaires et la synthèse des protéines musculaires. Du fait de sa richesse en AGS, l’huile de palme est controversée. Cette étude avait pour objectif d’étudier l’effet d’un régime riche en huile de palme (brute et raffinée) sur l’expression des facteurs myogéniques dans le muscle de rats sédentaires et le comparer avec un régime riche en huile d’olive et en Lard. Quarante rats mâles Wistar ont été répartis en 5 groupes de 8 rats chacun : 1 groupe témoin et 4 groupes nourris par des régimes riches en graisse (HFD) contenant respectivement de l’huile de palme brute, de l’huile de palme raffinée, de l’huile d’olive et du lard. Après 12 semaines de régime, les rats ont été sacrifiés et les tissus prélevés L'expression de Pax7, Myf5, MyoD et MyoG a été évaluée par RT-qPCR dans les muscles gastrocnémiens. Aucune différence significative n’a été observée entre régime témoin et HFD concernant les expressions de Pax7, Myf5 et MyoG. L’expression de MyoD s’est avérée significativement plus élevée dans les animaux HFD (p=0,0004) par rapport au témoin ; en particulier dans le régime riche en huile d’olive par rapport aux autres régimes HFD (p=0,05). Aucune altération significative de l’expression des gènes des facteurs de régulation myogénique n’a été observée avec l’huile de palme sous ses 2 formes, brute et raffinée. En conclusion, l’huile de palme, malgré sa richesse en AGS, n’a pas d’effet délétère sur la régénération du muscle squelettique.Mots clés : Régime riche graisses, muscle squelettique, Pax7, Myf5, MyoD, MyoG

Biomarqueurs prédictifs de la réponse au traitement par radiothérapie et chimiothérapie dans les cancers des VADS : résultats préliminaires de l’étude ancillaire CHEMRAD

National audienceIntroduction : Malgré la combinaison de stratégies thérapeutiques comme la chirurgie, la chimio- et radio-thérapie, la survie à 5ans des patients atteints de cancer des VADS reste inférieure à 30% en raison de l’apparition de récidives locorégionales et/ou de métastases. L’étude ancillaire ChemRad a pour but d’identifier des marqueurs biologiques de la réponse tumorale à la radio-chimiothérapie afin d’orienter précocement les patients vers la meilleure stratégie thérapeutique.Méthodes : Trois prélèvement biopsiques tumoraux et deux sanguins sont réalisés, avant traitement, pendant (chimiothérapie d’induction +/- radiothérapie ou RT seule), et en cas de récidive, sur une cohorte de 60 patients. Un des échantillons biopsiques est maintenu en culture ex vivo afin de tester la réponse à la RT, un autre est destiné à l’établissement d’une lignée primaire et le dernier permet le typage HPV et différentes analyses moléculaires. Les prélèvements sanguins sont destinés à l’isolement et l’analyse des cellules tumorales circulantes (CTCs), marqueur d’agressivité et de progression tumorale.Résultats : Les différentes étapes permettant le maintien en survie des biopsies ex-vivo ont été mises au point ainsi que le protocole d’irradiation et de suivi de la réparation des cassures double-brin de l’ADN. Le protocole d’isolement et de comptage des CTCs a été développé en parallèle ainsi que leur caractérisation immuno-histochimique, en particulier par des marqueurs de cellules souches cancéreuses et de la transition épithélio-mésenchymateuse. Une corrélation sera établie entre les résultats obtenus à partir de la biopsie, de la lignée primaire et des CTCs et la réponse au traitement des patients.Conclusion : Ce travail permettra à terme une meilleure compréhension du mécanisme d’échappement tumoral et l’identification de marqueurs prédictifs de la résistance aux traitements

Circulating tumor cells in the future of personalized radio(chimio)therapy for HNSCC patients

International audienceThe majority of Head and Neck Squamous Cell Carcinoma (HNSCC) patients have a locally advanced stage at diagnosis and unresectable tumors are treated by a combination of radio- and chemo-therapy. Locoregional recurrences and distant metastases appear in most patients, leading to a 5-year overall survival less than 50%. Metastases occur as the result of a cascade of events that begins with transition of cells from an epithelial to a mesenchymal phenotype (EMT), resulting in detachment from the primary tumor site, followed by intravasation of cells into the blood. The surviving cells, known as circulating tumor cells (CTCs), can extravasate into distant tissues where they form metastases. The presence of CTCs has been associated in different types of cancers (breast, lung) to a poor prognosis. In addition, CTCs may be partly cancer stem cells (CSCs). Early determination of the molecular profile of CTCs, which may be considered as a liquid biopsy, could therefore predict the response of HNSCC patients to radio(chemo)therapy and tumor escape.Our work focuses on the counting and molecular characterization of CTCs in a cohort of 20 patients with HNSCC recruited between May 2016 and March 2018 (NCT02714920). The 24-month follow-up is still ongoing. Blood samples and biopsies were taken at inclusion of patients and other blood samples were collected during treatment (radiochemotherapy). During the follow-up period, blood samples are taken in case of local relapse (with additional biopsy) or metastases.CTCs were isolated for each sample, counted, and their phenotype (epithelial, mesenchymal or CSC) characterized after immunohistochemical staining of specific proteins. The gene expression profile of CTCs and initial biopsies, focused on tumor progression and DNA repair pathways (Nanostring® technology), is being analyzed.Based on CTC counts and molecular signatures, we hope to rank patients as "good" and "bad" responders to treatment at an early stage of the disease and predict its progression. In the longer term, the collection of all these data will allow a better understanding of the tumor escape mechanisms to treatments and should lead to personalized and early treatment adaptation in addition to clinical data and imaging.Supported by Cancéropôle CLARA, Conseil Régional et Général du Rhône, LabEx PRIMES (ANR11LABX0063

Cellules Tumorales Circulantes : biomarqueurs prédictifs de l’échappement tumoral à la radio(chimio)thérapie dans les cancers des VADS ?

International audienceMalgré la combinaison de stratégies thérapeutiques comme la chirurgie, la chimio- et la radio-thérapie, la survie à 5 ans des patients atteints d’un cancer des VADS reste inférieure à 30% en raison de l’apparition de récidives locorégionales et/ou de métastases. Le phénomène métastatique est gouverné par une série complexe d’évènements incluant la migration, l’invasion et l’intravasation de cellules tumorales dans la circulation sanguine. Ces cellules dites cellules tumorales circulantes (CTCs), précurseurs de métastases, reflètent l’agressivité tumorale et son potentiel métastatique. Elles sont bien plus faciles d’accès que la tumeur d’origine et peuvent être considérées comme une « biopsie liquide » permettant d’avoir des informations en temps réel sur l’évolution du statut tumoral du patient. Les CTCs pourraient ainsi constituer un marqueur prédictif de la réponse tumorale et/ou de la rechute, indispensable aux cliniciens pour une adaptation thérapeutique individuelle. Notre étude se focalise sur leur comptage et leur caractérisation au cours du traitement par radio(chimio)thérapie et de la progression tumorale chez des patients atteints de cancers des VADS.Un prélèvement biopsique tumoral est réalisé à l’inclusion des patients atteints de cancer de l’oropharynx et de la cavité buccale et un prélèvement sanguin est fait à l’inclusion, à différents temps du traitement (chimiothérapie d’induction +/- radiothérapie ou RT seule), et en cas de récidive. Les CTCs sont isolées puis caractérisées par immuno-histochimie, avec des marqueurs de cellules souches cancéreuses et de la transition épithélio-mésenchymateuse. Leur profil d’expression génique est comparé à celui de la biopsie initiale.Les résultats préliminaires confirment que les techniques retenues permettent l’isolement, le comptage et la caractérisation des CTCs. Treize patients ont été inclus à ce jour. L’analyse préliminaire indique une grande hétérogénéité dans le nombre de CTCs comptées par patient. Différents phénotypes ont également été retrouvés au sein de ces CTCs, mésenchymateux pour certains patients, épithélial pour d’autres. L’analyse du profil d’expression génique est en cours sur notre plateforme Nanostring.Au terme du recrutement, les résultats de cette étude permettront de conclure si les résultats de l’analyse des CTCs sont prédictifs de la réponse individuelle à la radio(chimio)thérapie et/ou de l’échappement tumoral dans les cancers des VADS

Transcriptomic profile of HNSCC cancer : from the original site to the circulating tumoral cells

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Comparaison du profil d’expression génique de biopsies et de cellules tumorales circulantes dans le suivi thérapeutique des cancers des VADS

International audienceIntroduction : La survie à 5 ans des patients ayant un cancer des VADS n’excède pas 40% en raison d’un taux élevé de récidives loco-régionales et à distance. Le phénomène métastatique est gouverné par une série complexe d’évènements incluant la migration des cellules tumorales à partir du site primaire, leur passage dans la circulation sanguine et l’invasion du tissu cible. Les cellules, appelées cellules tumorales circulantes (CTCs), sont le reflet de l’agressivité et de la progression tumorale. Ce travail s’intéresse à la numération et caractérisation des CTCs chez des patients atteints de cancer des VADS en regard de l’analyse de biopsies tumorales.Méthodes : Des prélèvements sanguins et biopsiques sont réalisés avant et pendant le traitement (chimiothérapie/radiothérapie) et en cas de récidive. Les CTCs sont isolées à partir du sang (Rosette et ISET). Un marquage immunohistochimique de protéines spécifiques de cellules souches cancéreuses et de la transition épithélio-mésenchymateuse est ensuite réalisé afin de les compter et les caractériser. L’analyse transcriptomique des voies de progression tumorale et des systèmes de réparation des lésions de l’ADN est réalisée par la technologie Nanostring sur les biopsies tumorales et les CTCs (après amplification).Résultats : Dix-huit patients ont été inclus dans l’étude à ce jour. Les premiers résultats de comptage montrent une grande hétérogénéité au niveau du nombre de CTCs. Différents phénotypes (mésenchymateux ou épithéliaux) de CTCs sont mis en évidence selon les patients. L’analyse transcriptomique des biopsies et CTCs est en cours.Conclusion : La numération et la caractérisation (phénotype et profil transcriptomique) des CTCs et leur comparaison aux données des biopsies devraient permettre de définir des paramètres biologiques prédictifs de la réponse thérapeutique des cancers des VADS.Soutenu par le Cancéropôle CLARA, Grenoble-Alpes Métropole, Conseil Régional Rhône-Alpes, Conseil Général du Rhône et LabEx PRIME

Effect of tamoxifen and fulvestrant long-term treatments on ROS production and (pro/anti)-oxidant enzymes mRNA levels in a MCF-7-derived breast cancer cell line

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Combined Biological and Modeling Approach of Hematopoiesis: From Native to Stressed Erythropoiesis

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Antioxidant properties of 3-deoxyanthocyanidins and polyphenolic extracts from Côte d’Ivoire’s red and white sorghums assessed by ORAC and in vitro LDL oxidisability tests

International audienceRed sorghum is a source of phenolic compounds (PCs), including 3-deoxyanthocyanidins that may protect against oxidative stress related disease such as atherosclerosis. HPLC was used to characterise and quantify PCs extracted from red or white sorghum whole grain flour. Antioxidant activity was measured by an oxygen radical absorbance capacity assay and against LDL-oxidisability, and further compared to that of synthesised 3-deoxyanthocyanidins (i.e., luteolinidin and apigeninidin). Phenolic content of red and white sorghums was evaluated as 3.90 ± 0.01 and 0.07 ± 0.01 mmol gallic acid equivalents L- 1, respectively. Luteolinidin and apigeninidin were mainly found in red sorghum. Red sorghum had almost 3 and 10 times greater specific antioxidant activity compared to luteolinidin and apigeninidin, respectively. Red sorghum PCs and the two 3-deoxyanthocyanidins were also effective at preventing LDL vitamin E depletion and conjugated diene production. Red sorghum flour exhibits antioxidant capacity suggesting that it may be a valuable health-promoting food

Circulating Tumor Cell Detection during Neoadjuvant Chemotherapy to Predict Early Response in Locally Advanced Oropharyngeal Cancers: A Prospective Pilot Study

Patients with locally advanced oropharyngeal carcinoma treated with neoadjuvant chemotherapy are reassessed both radiologically and clinically to adapt their treatment after the first cycle. However, some responders show early tumor progression after adjuvant radiotherapy. This cohort study evaluated circulating tumor cells (CTCs) from a population of locally advanced oropharyngeal carcinoma patients treated with docetaxel, cisplatin, and 5-fluorouracil (DCF) induction chemotherapy or DCF with a modified dose and fractioned administration. The counts and phenotypes of CTCs were assessed at baseline and at day 21 of treatment, after isolation using the RosetteSepTM technique based on negative enrichment. At baseline, 6 out of 21 patients had CTCs (28.6%). On day 21, 5 out of 11 patients had CTCs (41.6%). There was no significant difference in the overall and progression-free survival between patients with or without CTCs at baseline (p = 0.44 and 0.78) or day 21 (p = 0.88 and 0.5). Out of the 11 patients tested at day 21, 4 had a positive variation of CTCs (33%). Patients with a positive variation of CTCs display a lower overall survival. Our findings suggest that the variation in the number of CTCs would be a better guide to the management of treatment, with possible early changes in treatment strategy