Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography-Electrospray Ionization Mass Spectrometry for Therapeutic Drug Monitoring of Metformin and Rosuvastatin in Human Plasma

In this work a hydrophilic interaction liquid chromatography/positive ion electrospray mass spectrometric assay (HILIC/ESI-MS) has been developed and fully validated for the quantitation of metformin and rosuvastatin in human plasma. Sample preparation involved the use of 100 µL of human plasma, following protein precipitation and filtration. Metformin, rosuvastatin and 4-[2-(propylamino) ethyl] indoline 2 one hydrochloride (internal standard) were separated by using an X-Bridge-HILIC BEH analytical column (150.0 × 2.1 mm i.d., particle size 3.5 µm) with isocratic elution. A mobile phase consisting of 12% (v/v) 15 mM ammonium formate water solution in acetonitrile was used for the separation and pumped at a flow rate of 0.25 mL min−1 . The linear range of the assay was 100 to 5000 ng mL−1 and 2 to 100 ng mL−1 for metformin and rosuvastatin, respectively. The current HILIC-ESI/MS method allows for the accurate and precise quantitation of metformin and rosuvastatin in human plasma with a simple sample preparation and a short a chromatographic run time (less than 15 min). Plasma samples from eight patients were further analysed proving the capability of the proposed method to support a wide range of clinical studies

Ανάπτυξη και αξιολόγηση μεθόδου υγροχρωματογραφίας υδρόφιλης αλληλεπίδρασης - φασματομετρίας μαζών (HILIC-ESI/MS) για τον ποσοτικό προσδιορισμό της ροπινιρόλης σε δισκία και τον έλεγχο των προσμίξεών της

Η ροπινιρόλη έχει εγκριθεί για την καταπολέμηση των συμπτωμάτων της νόσου του Parkinson και ανήκει στην κατηγορία των μη εργολινικών ντοπαμινεργικών αγωνιστών. Οι ντοπαμινεργικοί αγωνιστές διεγείρουν ντοπαμινεργικούς υποδοχείς και μιμούνται τη δράση της ντοπαμίνης στον εγκέφαλο. Η ροπινιρόλη εμφανίζει συγγένεια με την οικογένεια των D2 ντοπαμινεργικών υποδοχέων. Στην παρούσα εργασία αναπτύχθηκε και επικυρώθηκε μέθοδος για τον ποσοτικό προσδιορισμό της ροπινιρόλης και των προσμίξεών της σε δισκία με την τεχνική HILIC-ESI/MS. Η χρήση του φασματομέτρου μαζών προσδίδει στη μέθοδο εξαιρετική ευαισθησία και εκλεκτικότητα, ενώ, ταυτοχρόνως, η υγροχρωματογραφία υδρόφιλης αλληλεπίδρασης (HILIC) δίνει τη δυνατότητα ισοκρατικής έκλουσης των αναλυτών σε σύντομο χρονικό διάστημα. Η χρωματογραφία HILIC αποτελεί ιδανική επιλογή για την εφαρμογή της τεχνικής LC–ESI/MS, καθώς το μεγάλο ποσοστό οργανικού τροποποιητή στην κινητή φάση βελτιώνει την ευαισθησία. Η χρωματογραφική στήλη που χρησιμοποιήθηκε είναι η ZIC®-HILIC. Η κινητή φάση αποτελούταν από 8% ρυθμιστικό διάλυμα μυρμηκικού αμμωνίου 18,8 mM (pH = 6,20) σε ακετονιτρίλιο. Η ταχύτητα ροής της κινητής φάσης ρυθμίστηκε στα 0,25 mL min-1. Η σάρωση των ιόντων επιλέχθηκε να γίνει να γίνει με την τεχνική της παρακολούθησης προεπιλεγμένου ιόντος (SIM). Ο χρόνος της χρωματογραφικής ανάλυσης δεν ξεπερνά τα 15 λεπτά. Η αναπτυχθείσα μέθοδος εφαρμόστηκε με επιτυχία στην ανάλυση δισκίων ροπινιρόλης.Ropinirole is a drug approved for the treatment of Parkinson’s disease symptoms and it belongs to the non-ergot dopaminergic agonists. The dopaminergic agonists activate the dopaminergic receptors in the brain and are thus mimicking the effects of dopamine in the brain. Ropinirole possesses affinity for the family of D2 dopaminergic receptors. In the present work, a method for the quantification of ropinirole and its impurities in tablets was developed and validated, by using a HILIC-ESI/MS approach. The usage of mass spectrometry bestows high sensitivity and selectivity to the method, while simultaneously the hydrophilic interaction chromatography HILIC allows the rapid isocratic elution of the analytes. HILIC chromatography is ideal for performing LC-ESI/MS analysis, since the large percentage of organic modifier in the mobile phase improves the method’s sensitivity. The chromatographic column utilized was ZIC®-HILIC. The mobile phase was composed of 8% ammonium formate buffer 18.8 mM (pH = 6.20) in acetonitrile. The mobile phase flow rate was 0.25 mL min-1. For the ion scanning, the single ion monitoring (SIM) technique was selected. The time of chromatographic analysis does not exceed 15 minutes. The developed method was successfully applied to the analysis of ropinirole tablets