Inmunogenicidad de vacunas inactivadas de Salmonella sp de uso en la industria avícola argentina

Salmonellosis is one of the most widespread infectious diseases worldwide, affecting humans and several animal species, and it has been historically linked to poultry production. Salmonella sp is a food-borne microorganism with impact on public health and also on the global trade of poultry products and by-products. Vaccination is one of the main tools to the pathogen and its effectiveness requires quality controls to measure their immunogenicity. The objective of this work was to determine the immunogenicity of three commercial avian Salmonella sp vaccines used in Argentinean poultry production by immunizing groups of birds and determining specific serum titers. Groups of birds were vaccinated according to a standardized procedure that comprises two vaccinations. Diversity was observed in the agglutination titers against Salmonella enteritidis among the vaccines analyzed, although all of them generated seroconversion in the birds. The vaccine 1 presented the biggest title averages, as much in the first one as in the second vaccination, being continued by the vaccine 3 and the vaccine 2. The final goal of the control of vaccines is to stimulate continuous improvement of their quality to produce safer food for the population.La salmonelosis es una de las enfermedades infecciosas más difundidas a nivel mundial, que afecta tanto a seres humanos como a diferentes especies animales, estando históricamente vinculada a la avicultura. Salmonella sp es un microorganismo que puede transmitirse a través de los alimentos y ello implica su impacto en la salud pública, así como también en el comercio internacional de productos y subproductos avícolas. La vacunación es una de las herramientas fundamentales para la contención de estas bacterias y su efectividad requiere de controles de calidad para medir la inmunogenicidad de las mismas. El objetivo de este trabajo fue determinar la inmunogenicidad de tres vacunas comerciales de Salmonella sp aviares de uso en la producción avícola argentina, mediante la inmunización grupal y la determinación de títulos séricos específicos. Grupos de aves fueron vacunadas según un procedimiento estandarizado que incluyó dos vacunaciones. Se observó diversidad de los títulos-aglutinación de Salmonella enteritidis entre las distintas vacunas analizadas, si bien todas ellas generaron seroconversión en las aves. La vacuna 1 presentó los mayores promedios de título, tanto en la primera como en la segunda vacunación, siendo seguida por la vacuna 3 y la vacuna 2. El control de las vacunas tiene como objetivo final estimular la mejoría continua de su calidad para la producción de alimentos más inocuos para la población

Immunogenicity of inactivated Salmonella sp vaccines used in the poultry industry in Argentina

La salmonelosis es una de las enfermedades infecciosas más difundidas anivel mundial, que afecta tanto a seres humanos como a diferentes especies animales, estandohistóricamente vinculada a la avicultura. Salmonella sp es un microorganismo que puedetransmitirse a través de los alimentos y ello implica su impacto en la salud pública, así comotambién en el comercio internacional de productos y subproductos avícolas. La vacunaciónes una de las herramientas fundamentales para la contención de estas bacterias y su efectividadrequiere de controles de calidad para medir la inmunogenicidad de las mismas. Elobjetivo de este trabajo fue determinar la inmunogenicidad de tres vacunas comerciales deSalmonella sp aviares de uso en la producción avícola argentina, mediante la inmunizacióngrupal y la determinación de títulos séricos específicos. Grupos de aves fueron vacunadassegún un procedimiento estandarizado que incluyó dos vacunaciones. Se observó diversidadde los títulos-aglutinación de Salmonella enteritidis entre las distintas vacunas analizadas,si bien todas ellas generaron seroconversión en las aves. La vacuna 1 presentó los mayorespromedios de título, tanto en la primera como en la segunda vacunación, siendo seguida porla vacuna 3 y la vacuna 2. El control de las vacunas tiene como objetivo final estimular la mejoríacontinua de su calidad para la producción de alimentos más inocuos para la población.Salmonellosis is one of the most widespread infectious diseases worldwide, affecting humans and several animal species, and it has been historically linked to poultry production. Salmonella sp is a food-borne microorganism with impact on public health and also on the global trade of poultry products and by-products. Vaccination is one of the main tools to the pathogen and its effectiveness requires quality controls to measure their immunogenicity. The objective of this work was to determine the immunogenicity of three commercial avian Salmonella sp vaccines used in Argentinean poultry production by immunizing groups of birds and determining specific serum titers. Groups of birds were vaccinated according to a standardized procedure that comprises two vaccinations. Diversity was observed in the agglutination titers against Salmonella enteritidis among the vaccines analyzed, although all of them generated seroconversion in the birds. The vaccine 1 presented the biggest title averages, as much in the first one as in the second vaccination, being continued by the vaccine 3 and the vaccine 2. The final goal of the control of vaccines is to stimulate continuous improvement of their quality to produce safer food for the population.Fil: Chacana, Pablo Anibal. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Leiva, Carlos Leónidas. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Joaquim, Patricia Estefania. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Bombicino, M.. No especifíca;Fil: Terrera, M.V.. No especifíca

Staphylococcus aureus: nuevos y antiguos antimicrobianos Staphylococcus aureus: new and old antimicrobial agents

El objetivo del trabajo fue evaluar la sensibilidad a antiguos y nuevos antimicrobianos de aislamientos de Staphylococcus aureus resistentes a la oxacilina, de origen hospitalario (SAOR-H) y adquiridos en la comunidad (SAOR-AC), y también en aislamientos sensibles a la oxacilina (SAOS). Se estudió en forma prospectiva la concentración inhibitoria mínima a diversos antimicrobianos en 118 aislamientos consecutivos por dilución seriada en agar según las indicaciones del CLSI. En los aislamientos de SAOR sin resistencia acompañante se determinó la presencia de los genes mec A, leucocidina de Panton Valentine (LPV) y γ-hemolisina por PCR, y del cassette SCC mec por PCR múltiple. De los 118 aislamientos estudiados, 44 fueron SAOR-H, 16 SAOR-AC y 58 SAOS. Los aislamientos de SAOR-H presentaron resistencia simultánea a eritromicina, clindamicina, gentamicina, ciprofloxacina, levofloxacina y moxifloxacina, y todos fueron sensibles a tigeciclina (TIG), vancomicina, teicoplanina y linezolid (LZD). Los aislamientos de SAOR-AC fueron resistentes solamente a OXA y sensibles a todos los antimicrobianos ensayados. En todos ellos se detectaron los genes mec A, LPV, γ-hemolisina y el cassette SCC mec IV. En SAOS y en SAOR-AC todos los antimicrobianos no ß-lactámicos ensayados presentaron excelente actividad in vitro, mientras que en SAOR-H sólo los antiguos antimicrobianos como glucopéptidos, doxiciclina, rifampicina y trimetoprima-sulfametoxazol presentaron buena actividad in vitro, al igual que LZD y TIG entre los nuevos antimicrobianos. El fenotipo de SAOR sin resistencia acompañante fue altamente predictivo de SAOR-AC, ya que fue confirmado por presentar el cassette SCC mec IV.The objective of the study was to evaluate the susceptibility to old and new antimicrobial agents against hospital-acquired oxacillin-resistant Staphylococcus aureus (HA-ORSA), community-acquired oxacillin-resistant S. aureus (CA-ORSA), and oxacillin-susceptible S. aureus (OSSA). The minimum inhibitory concentration of different antimicrobial agents against 118 S. aureus consecutive and prospective isolates was studied by the CLSI agar dilution method. In ORSA isolates without accompanying resistance, the mec- A gene, the Panton-Valentine leukocidin gene (PVL), and the γ-hemolysin gene were determined by PCR, and the SCC cassette mec gene by multiplex PCR. Out of the 118 isolates, 44 were HA-ORSA, 16 were CA-ORSA, and 58 corresponded to OSSA. The HA-ORSA isolates presented simultaneous resistance to erythromycin, clindamycin, gentamicin, ciprofloxacin, levofloxacin, and moxifloxacin whereas all of them were susceptible to tigecycline (TIG), vancomycin, teicoplanin and linezolid (LZD). The CA-ORSA isolates were only resistant to OXA and presented susceptibility to all the antimicrobial agents assayed. In all of them, the mec-A gene, the PVL gene, the γ-hemolysin gene and the SCC cassette mec type IV gene were detected. With the OSSA and CA-ORSA isolates, all the non- β- lactam antimicrobial agents assayed exhibited excellent in vitro activity. However, in the HA-ORSA isolates, only the old antimicrobial agents such as glycopeptides, doxyciclin, rifampin, and trimethoprim-sulfamethoxazole and the new antimicrobial agents LZD and TIG, presented good in vitro activity. The ORSA phenotype without accompanying resistance was highly predictive of CA-ORSA as confirmed by a positive SCC cassette mec type IV

Expression of recombinant glutamic acid decarboxylase in insect larvae and its application in an immunoassay for the diagnosis of autoimmune diabetes mellitus

Abstract Autoimmune Diabetes Mellitus (DM) is a chronic disease caused by the selective destruction of insulin producing beta cells in human pancreas. DM is characterized by the presence of autoantibodies that bind a variety of islet-cell antigens. The 65 kDa isoform of glutamate decarboxylase (GAD65) is a major autoantigen recognized by these autoantibodies. Autoantibodies to GAD65 (GADA) are considered predictive markers of the disease when tested in combination with other specific autoantibodies. In order to produce reliable immunochemical tests for large scale screening of autoimmune DM, large amounts of properly folded GAD65 are needed. Herein, we report the production of human GAD65 using the baculovirus expression system in two species of larvae, Rachiplusia nu and Spodoptera frugiperda. GAD65 was identified at the expected molecular weight, properly expressed with high yield and purity in both larvae species and presenting appropriate enzymatic activity. The immunochemical ability of recombinant GAD65 obtained from both larvae to compete with [35S]GAD65 was assessed qualitatively by incubating GADA-positive patients’ sera in the presence of 1 μM of the recombinant enzyme. All sera tested became virtually negative after incubation with antigen excess. Besides, radiometric quantitative competition assays with GADA-positive patients’ sera were performed by adding recombinant GAD65 (0.62 nM–1.4 µM). All dose response curves showed immunochemical identity between proteins. In addition, a bridge-ELISA for the detection of GADA was developed using S. frugiperda-GAD65. This assay proved to have 77.3% sensitivity and 98.2% of specificity. GAD65 could be expressed in insect larvae, being S. frugiperda the best choice due to its high yield and purity. The development of a cost effective immunoassay for the detection of GADA was also afforded