Desarrollo de vacunas de nueva generación contra el virus de influenza

Influenza virus, which causes epidemic infections in man and various species of susceptible\nanimals, continually evolves by exchange of gene segments between different strains, as well as\nincorporation of point mutations. Seasonal influenza vaccines currently in use for prevention are\neffective in neutralizing infection with homologous strains, but their ability to cover heterologous\nstrains is very low or none. This work is aimed to develop, in the first part, new generation\ninfluenza vaccines through the expression of the immunodominant protein hemagglutinin through\nrecombinant DNA technology in a eukaryotic expression system (baculovirus / insect cells). In the\nsecond part of this work, the generation of a "universal" vaccine with broad spectrum of\nprotection is pursued by means of directing the host immune response to more conserved regions\nof the virus. In this sense, it has been sought to achieve a vaccine based on the internal proteins of\nthe virus, particularly in the Matrix 2 protein and the viral Nucleoprotein. We demonstrate that\nexperimental vaccines based on the ectodomain of the M2 protein can induce humoral or cellular\nimmunity capable of protecting mice from challenge with a lethal dose of influenza virus.Fil: Boado, Lorena Analía. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaEl virus de influenza, que causa infecciones epidémicas en el hombre y diversas especies de\nanimales susceptibles, evoluciona continuamente por la acumulación de mutaciones puntuales, así\ncomo por el intercambio de segmentos genómicos entre distintas cepas. Las vacunas antigripales\nestacionales en uso actualmente para la prevención son eficaces para neutralizar una infección\ncon cepas homólogas, pero su capacidad de cobertura heterosubtípica es variable o nula. El\npresente trabajo está orientado a desarrollar, por un lado, vacunas antigripales de nueva\ngeneración, a través de la expresión de la proteína inmunodominante hemaglutinina por\ntecnología de ADN recombinante, en un sistema de expresión eucariota (baculovirus/ células de\ninsectos). Por otro lado, se propone la generación de una vacuna ?universal? de amplio espectro\nde protección a través de dirigir la respuesta inmune del huésped hacia regiones más conservadas\ndel virus. En este sentido, se ha buscado en la segunda parte de este trabajo lograr una vacuna de\nmás amplia cobertura basada en las proteínas internas del virus, en particular en la proteína de\nmatriz M2 y en la nucleoproteína. Se demuestra que las vacunas experimentales basadas en el\nectodominio de M2 pueden inducir inmunidad humoral o celular capaces de proteger animales\nvacunados de una descarga de dosis letal de virus de influenza

Enhancement of Th1 immune responses to recombinant influenza nucleoprotein by Ribi adjuvant

A broad coverage influenza vaccine against multiple viral strains based on the viral nucleoprotein (NP) is a goal pursued by many laboratories. If the goal is to formulate the vaccine with recombinant NP it is essential to count on adjuvants capable of inducing cellular immunity. This work have studied the effect of the monophosphoryl lipid A and trehalose dimycolate, known as the Ribi Adjuvant System (RAS), in the immune response induced in mice immunized with recombinant NP. The NP was formulated with RAS and used to immunize BALB/c mice. Immunizations with NP-RAS increased the humoral and cellular immune responses compared to unadjuvanted NP. The predominant antibody isotype was IgG2a, suggesting the development of a Th1 response. Analysis of the cytokines from mice immunized with NP-RAS showed a significant increase in the production of IFN-gamma and a decreased production of IL-10 and IL-4 compared to controls without RAS. These results are similar to those usually obtained using Freund´s adjuvant, known to induce Th1 and CTL responses when co-administered with purified proteins, and suggest that a similar approach may be possible to enhance the performance of a T-cell vaccine containing NP.Fil: Cargnelutti, Diego Esteban. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico - CONICET - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina;Fil: Sanchez, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico - CONICET - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina;Fil: Alvarez, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología;Fil: Boado, Lorena Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología;Fil: Mattion, Nora Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología;Fil: Scodeller, Eduardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico - CONICET - Mendoza. Instituto de Medicina y Biología Experimental de Cuyo; Argentina

Past and Future Methods for Controlling Echinococcus Granulosus in South America

The various Countries of South America (Peru, Brazil, Chile, Uruguay, Argentina) all haveproblems with Echinococcus granulosus s.l in humans. Control of the disease in dogs and grazinganimals began in Uruguay in 1879, and continues in all countries from various beginnings until2022. Our objective is to describe the new vaccine to prevent grazing animals from acquiringE.granulosus s.l., and to predict the possible high degree of control using the addition of thevaccine to the normal control procedures even when programmes address many practicaldifficulties.The recombinant vaccine was used under field conditions using the same protocol in sheep,goats and llamas older than 2 months and up to 6 years: Two injections, one month apartand annual booster. The baseline and the final evaluation were carried out by necropsy incontrol programmes included in Argentina (Chubut, 2007-2013; Río Negro 2009-2017) and inChile (Alto Biobio, 2016-2020; Aysen 2020-2022).Elimination of echinococcosis have been successful only in insular countries. In consequence, tovalidate a model supporting the One Health approach that might be reproducible successfullyin different regions of South America is required. Including the socio-cultural understandingand the environmental context is mandatory to optimize the use of the vaccine under theseoperational conditions.The EG95 vaccine, made in Argentina, has been tested, and continues to be tested, inArgentina and Chile, and more recently in Peru. Furthermore, the vaccine, now available,is being made in large quantities in Argentina and China, and appears to be an additionalcontrol technology that may allow elimination of E.granulosus s.l. from South America. Thebest control strategies appear to be dog treatments and regular vaccination of sheep andgoats for 10 years until all old sheep have been removed. If dogs or grazing animals enterfrom outside the controlled environment, treatments will need to be continued. The vaccinealso seems to reduce E.granulosus s.l. cysts reaching infectivity for dogs, and has some effectagainst Fasciola hepatica.Fil: Poggio, Thelma Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; ArgentinaFil: Jensen, Oscar. Centro de Investigacion En Zoonosis; ArgentinaFil: Chacon Saravia, Tomas. Ministerio de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimento. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria; ArgentinaFil: Pino Nuñez, Alejandro. No especifíca;Fil: Boado, Lorena Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; ArgentinaFil: Gomez, Jose Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; ArgentinaFil: Heath, David. No especifíca

Tandem repeats of the extracellular domain of Matrix 2 influenza protein exposed in Brucella lumazine synthase decameric carrier molecule induce protection in mice

The antigenic variation of influenza virus represents a major prevention problem. However, the ectodomain of the protein Matrix 2 (M2e) is nearly invariant in all human influenza A strains and has been considered as a promising candidate for a broadly protective vaccine because antibodies to M2e are protective in animal models. In this work we evaluated the possible use of Brucella abortus lumazine synthase protein (BLS), a highly immunogenic decameric protein, as a carrier of the M2e peptide. Chimeric proteins generated by the fusion of one or four in tandem copies of M2e to BLS were efficiently expressed in Escherichia coli and assembled in decameric subunits similarly to the wild type BLS enzyme, as demonstrated by the comparative circular dichroism spectra and size exclusion chromatography and static light scattering analysis. The M2e peptides were stably exposed at the ten N-terminal ends of each BLS molecule. Immunization of mice with purified chimeras carrying only one M2e (BLS-M2e) copy elicited a significant humoral immune response with the addition of different adjuvants. The fusion of four in tandem copies of the M2e peptide (BLS-4M2e) resulted in similar levels of humoral immune response but in the absence of adjuvant. Survival of mice challenged with live influenza virus was 100% after vaccination with BLS-4M2e adjuvanted with Iscomatrix(®) (P<0.001) and 80% when adjuvanted with alum (P<0.01), while the chimera alone protected 60% of the animals (P<0.05). The approach described in this study is intended as a contribution to the generation of universal influenza immunogens, through a simple production and purification process and using safe carriers that might eventually avoid the use of strong adjuvants.Fil: Alvarez, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencias y Tecnología "dr. Cesar Milstein"; ArgentinaFil: Zylberman, Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquimicas de Buenos Aires; Argentina. Inmunova S.a; Argentina. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Ghersi, Giselle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquimicas de Buenos Aires; Argentina. Fundación Instituto Leloir; Argentina. Inmunova S.a; ArgentinaFil: Boado, Lorena Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencias y Tecnología "dr. Cesar Milstein"; ArgentinaFil: Palacios, Carlos Adolfo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencias y Tecnología "dr. Cesar Milstein"; ArgentinaFil: Goldbaum, Fernando Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquimicas de Buenos Aires; Argentina. Inmunova S.a; Argentina. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Mattion, Nora Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencias y Tecnología "dr. Cesar Milstein"; Argentin

First isolation of an H1N1 avian influenza virus from wild terrestrial non-migratory birds in Argentina

A type A avian influenza (AI) virus was isolated from dead or severely ill red-winged tinamous (Rhynchotus rufescens) found in a hunting ground in April 2008 in Argentina. The subtype of A/red-winged tinamou/Argentina/MP1/2008 was determined as H1N1 by sequence analysis. The cleavage site of the viral hemagglutinin corresponded to a low pathogenic influenza virus, although the clinical presentation and pathological studies suggest that the virus was pathogenic for red-winged tinamous. Phylogenetic analysis of the viral genome suggested that while the hemagglutinin and neuraminidase genes were related to AIV from North America, the internal genes were most closely related to other South American isolates. These findings support the postulated South American phylogenetic lineage for AIV PB2, PB1, PA, M and NS genes, and suggest that the evolutionary pathways of HA and NA genes involve exchanges between the Northern and Southern hemispheres.Fil: Alvarez, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; ArgentinaFil: Mattiello, Rosana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Rivailler, Pierre. Centers for Disease Control and Prevention; Estados UnidosFil: Pereda, Ariel Julián. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; ArgentinaFil: Davis, Charles T.. Centers for Disease Control and Prevention; Estados UnidosFil: Boado, Lorena Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; ArgentinaFil: D'Ambrosio, Elisa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Aguirre, Sebastian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; ArgentinaFil: Espinosa, Cora. Ministerio de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimento. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria; ArgentinaFil: la Torre, Jose Leonardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; ArgentinaFil: Donis, Ruben. Centers for Disease Control and Prevention; Estados UnidosFil: Mattion, Nora Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; Argentin