Naturlig transformasjon hos Streptococcus thermophilus :Regulering, autolyse og ComS* kontrollert genekspresjon.

Natural genetic transformation has been extensively studied in Streptococcus pneumoniae for generations, and much has been learned about this important phenomenon since its discovery by Frederick Griffith in 1928. In comparison, natural transformation has been little studied in other streptococcal species. The majority of streptococci have, in fact, never been observed to be naturally transformable. Streptococcus thermophilus has traditionally been considered to be a non-competent species. It is widely used by the dairy industry in the production of a variety of food products, and is consequently of great economic importance. To further improve the properties of S. thermophilus as a dairy starter, a better understanding of its genetics, metabolism and physiology is essential. Progress in this area has been hampered by the lack of efficient genetic tools. Some years ago, Blomqvist and co-workers therefore set out to investigate whether S. thermophilus could be made competent for natural transformation by artificial overexpression of the alternative sigma factor ComX. This strategy proved successful resulting in a new tool that opened up new possibilities with respect to genetic manipulation of the S. thermophilus genome. Furthermore, the discovery sparked the interest of a number of research groups, leading to increased activity in this field. In the current study, an important goal was to better understand how expression of ComX, the master switch of competence induction in streptococci, is regulated in S. thermophilus. Our results show that ClpC, presumably in complex with ClpP, regulates the level of ComX in the bacterial cell post-transcriptionally. ClpC is not part of the quorumsensing-like competence-induction pathway recently identified by Fontaine and colleagues, but seems to be part of a control mechanism that prevents spontaneous competence induction in S. thermophilus under conditions that are sub-optimal or inappropriate for competence development (Paper I). In S. pneumoniae competent cells produce and secrete a murein hydrolase (CbpD-Sp) that kills and lyses non-competent pneumococci and members of related species. Evidence strongly indicates that the biological function of CbpD-Sp is to mediate release of homologous DNA from target cells that can be taken up by competent cells to serve as templates for recombinational DNA repair. In silico screening of the S. thermophilus genome showed that it encodes a CbpD-like protein (CbpD-St) with a unique C-terminal domain. Consequently, it was of interest to determine whether this protein carries out the same function in S. thermophilus as in S. pneumoniae. Our results showed that the properties of CbpD-St and CbpD-Sp are similar in most respects. Both proteins are murein hydrolases that bind to the surface of their respective host cells via their C-terminal domains. Both proteins also have the potential to lyse susceptible cells. However, in contrast to its pneumococcal counterpart, CbpD-St has a positive effect on the transformability of S. thermophilus (paper II). Thus, although our results indicate that CbpD-St and CbpD-Sp probably are functional analogues, it cannot be ruled out that CbpD-St serves a different biological function in S. thermophilus. While the present study was in progress, the sought-after quorum-sensing pathway controlling competence induction in S. thermophilus was identified by Fontaine et al. The pathway turned out to be completely unrelated to the corresponding quorum-sensing pathway in S. pneumoniae. This made us realize that the S. thermophilus pathway, in principle, could be developed into a peptide-regulated gene depletion system for use in S. pneumoniae. The pathway consists of a signalling peptide (ComS*), which is imported into the cytoplasm by the Ami oligopeptide transporter, and an intracellular transcriptional activator termed ComR. According to the model proposed by Fontaine et al., ComR becomes activated upon binding to ComS*. In the active state ComR induces expression of ComX by binding to the comX promoter. By introducing the comR gene and comX promoter fused to the gene of interest into the genome of S. pneumoniae we were able to show that the gene depletion system functioned as intended. The essential licD1gene, which is required for the synthesis of wall and lipoteichoic acids in S. pneumoniae, was used as a test case. Our results showed that depletion of the licD1 gene gives rise to oversized, elongated and misshapen cells, indicating that pneumococcal cells with low levels of teichoic acids struggle to divide. In sum, the ComRS-based gene depletion system described in paper III has excellent properties that should make it a very useful tool for the study of essential genes in S. pneumoniae and other Gram-positive bacteria.Mens det foreliggende studiet pågikk ble den ovenfor nevnte ”quorum-sensing”- lignende signaloverføringsveien som induserer kompetanse hos S. thermophilus identifisert av Fontaine et al.. Det viste seg at denne signaloverføringsveien er totalt ubeslektet med den tidligere identifiserte signaloverføringsveien som benyttes til kompetanseinduksjon hos S. pneumoniae. Dette gav oss ideen til å forsøke å konstruere et titrerbart peptid-kontrollert genekspresjonssystem til studier av essensielle gener hos pneumokokker. Med et slikt system ville vi kunne uttrykke essensielle gener ektopisk, dvs. via det peptid-kontrollerte genekspresjonssystemet fra S. thermophilus. Etter delesjon av det native målgenet vil så den ektopiske transkripsjonen kunne senkes gradvis til fenotypiske trekk som gir informasjon om funksjonen til det essensielle genet manifesterer seg. Signaloverføringsveien som ble identifisert av Fontaine et al. består av et signalpeptid (ComS*), som transporteres inn i cytoplasmaet av en oligopeptidtransporter kalt Ami, pluss en intracellulær transkripsjonsaktivator kalt ComR. Ifølge den foreslåtte modellen aktiveres ComR når denne aktivatoren binder til ComS*. I aktiv tilstand induserer ComR ekspresjonen av ComX ved å binde til comX promoteren. Ved å integrere comR genet og comX promoteren fusjonert til målgenet i genomet til S. pneumoniae ble vi i stand til å vise at systemet vårt fungerte etter hensikten. Vi brukte det essensielle licD1 genet, som er nødvendig for syntesen av teikoinsyre hos pneumokokker, til å prøve ut systemet vårt på et reelt biologisk problem. Resultatene viste at en gradvis reduksjon i mengden av LicD1 gav opphav til celler som var mye større og lengre enn normalt, noe som indikerer at pneumokokker med for lite teikoinsyre får problemer med å dele seg. Dette vellykkede resultatet viser at det titrerbare ekspresjonssystemet vi utviklet i artikkel III fungerer utmerket, og at det følgelig burde kunne bli et nyttig verktøy for studier av essensielle gener i pneumokokker og andre Gram-positive bakterier.Norges Forskningsrå

Innovation in action : the development of a simulator and a group

Motivated by the challenge of combining psychological theories and methods with high-tech gaming and simulating technology, a project was carried out to develop a simulator that could train people in the skill of negotiation. An analysis of the existing theory, interviews with experienced negotiators and observations of negotiation in action formed the basis for a User Centred Design process. Through the application of Contextual Design methods, traditional qualitative methods, and a Usability test, this process has currently resulted in the overall design of a training program and an early design prototype. This work is described in the following document. As well as this a review of central existing theories on group development was carried out. This review concluded with a suggestion to pair Systematising Person-Group Relations (SPGR) with Action Research methods for further research. Finally, a study was carried out using these methods, showing that SPGR and Action Research provide rich and valuable data on group development

Kravet til forsvarlig egenkapital og likviditet i aksjeloven § 3-4 - Bestemmelsens innhold og betydning etter lovendringen i 2013

Oppgaven omhandler de krav aksjeloven § 3-4 stiller til selskapets egenkapital og likviditet, og hvilke plikter selskapsledelsen har til å vurdere dette fortløpende. Også bestemmelsens betydning som vilkår for utbytte drøftes. Oppgaven omhandler primært styrets ansvar, men også plikter og ansvar for daglig leder og generalforsamlingen. Videre drøftes gjennomgående hvorvidt rettstilstanden er endret etter aksjelovsrevisjonen, og om endringene har medført en forenkling for selskapet. Oppgaven inneholder en drøftelse om rettens adgang til å overprøve styrets skjønn

Health information on the Internet : the case of BarniMagen.com : http://www.supplement_or_substitute

Throughout history features have been assigned to stretches of time in order to distinguish them from one another. These features have pointed to several different parts of life, although a lot of focus has been centred on the work life of the human. From pointing to the materials available to work with for humans, like iron or bronze, to structures of work, Fordism and Industrialism, theories have abounded. On many of these distinctions academics disagree, and there are vast numbers of theories and literature on why a period of time should be termed after one or another aspect of it. One of the theories receiving a lot of support and criticism that focuses on the present time is that we are in an Information Society, or an Information Age. Within those who agree on this term, there are different methods in which they attempt to show that society can indeed be shown to distinguish itself from what has come before it through information's place within it. Although there are numerous aspects of these theories that are disagreed upon, few critics, be they academics or otherwise, will disagree with the statement that the access to large quantities of information and services has increased in the years since the Internet surfaced. Particularly in the last 3-4 years the use of the Internet has spread, and through this use the access to information has increased for many people. Academics enter into dialogues to ascertain what this means for society, and at other levels policies are discussed for the same reasons. The information and services to be accessed on the Internet lie within various areas, illegal and legal, but one of the areas with a lot of growth is the area of health. Both health information and services are showing constant increases and the implications of this are not yet fully clear. Specifically what are people using the health information from the Internet for, which services do they use and why? How is this use affecting their relationships with their health care professionals? These and many others are questions academics as well as policy-makers must consider. This dissertation will attempt to look at the present debates on the role of information in the present society, both at an academic and a policy level, as well as the more specific debates on health information and its affects on the relationships between health care professionals and patients. As well as this, a case study of a midwifery website will be done to illustrate the last question: Whether the health information online is considered by users to be a substitute or a supplement to regular consultative services with health care professionals

Decrepitation of Comilog, Assmang and UMK manganese ores during prereduction

Produksjon av manganlegeringer er en industri som forbruker mye elektrisk energi og karbonmaterialer. Prereduksjon av manganmalm er ønsket for å senke forbruket av elektrisk energi og karbonmaterialer. For at dette skal være mulig må man vite hvordan manganmalmen reagerer når den blir varmet opp i forskjellige gassatmosfærer. Assmang, UMK og Comilog vil bli undersøkt etter å ha blitt varmet opp til 400°C, 600°C og 800°C i syntetisk luft og 70/30% CO/CO2. Først ble Assmang varmet opp i CO/CO2 som resulterte i at alle manganoksidene ble redusert til MnO ved 800°C. Assmang malmen dekrepiterte mer enn UMK, men mindre enn Comilog som har blitt undersøkt i tidligere arbeid. Så ble alle malmene varmet i syntetisk luft. Malmene ble tumbletestet, trykkkraft-testet og undersøkt i SEM, i tillegg til porøsitetsmålinger og kjemisk analyse som ble gjort av Sintef. Manganoksidene ble kun redusert til Mn2O3 (MnOx = 1,5) da de ble varmet i syntetisk luft, som førte til en økning i oksygeninnholdet for Assmang (MnOx = 1,45) og UMK (MnOx = 1,43). Comilog (MnOx = 1,94) fikk en reduksjon av oksygeninnholdet på grunn av dekomponering av MnO2. Alle malmene dekrepiterte mindre i luft enn i CO/CO2, hvor UMK og Comilog hadde minst dekrepitering. Assmang dekrepiterte mest i luftatmosfære, men den var bare ~6% høyere enn de andre malmene ved 800°C. Trykktesting viste at styrken til malmene synker når temperaturen stiger. Comilog var den svakeste malmen, mens UMK og Assmang har liknende styrke. Dette er mest sannsynlig på grunn av forskjellen i porøsitet. Porøsiteten til Comilog ble målt opp til 36,9% ved 800°C. Assmang og UMK hadde maks 21,8% porøsitet ved 800°C, og betydelig mindre ved lavere temperaturer. Forskjellen i porøsitet ble videre sett i SEM undersøkelse av tverrsnittet til malmen. Manganmalm varmet i CO/CO2 har en høyre grad av prereduksjon, men dekrepiterer også mer enn malm varmet i luft. Dette betyr at mer fines blir produsert under prereduksjon i CO/CO2. Derimot er det ikke mulig å redusere manganmalm lavere enn Mn2O3 i luft ved temperaturene undersøkt i denne studien. En atmosfære av CO/CO2 er nødvendig for å redusere manganmalm til MnO

Vurdering av plusskunder sine rammebetingelser i framtidens distribusjonsnett (SmartGrid) - med fokus på AMS og produksjonsteknologi

Det har i denne oppgaven blitt vist at inntektsgrunnlaget for plusskunder iNorge er forholdsvis lavt. Dette til tross for at Norges Vassdrags- og Energidirektorat(NVE) har foretatt flere dispensasjoner, samt kommet med forslag tiltariffering for å gjøre plusskundeordningen mer lønnsom og attraktiv. Blantbarrierene for plusskunder kan det nevnes; få leverandører av aktuell produksjonsteknologi,forholdsvis liten erfaring om plusshus blant norske byggefirmaog den mest dominerende barrieren, den økonomiske. Produksjonsteknologienesom er mest aktuelle for plusskunder, vind- og solkraft, har foreløpig forhøy kostnad per kWh til at ordningen er lønnsom.Det har i oppgaven blitt vist til studier utført av SINTEF og NVE somkonkluderer med en kostnad per kWh for kraftproduksjon fra solceller påmellom 3,33 NOK og 5 NOK. To småskala vindturbiner, i utgangspunktetgodt egnet til bygningsmontering grunnet rotordiameter under 2 meter,viste seg i et pilotprosjekt i Nederland å ha en produksjonskostnad på 22,91NOK/kWh og 14,48 NOK/kWh. Den største turbinen, med en rotordiameterpå 5 meter, kom best ut i testen med en produksjonskostnad på 2,03NOK/kWh. Et liknende prosjekt i Storbritannia konkluderte med at i 16av 26 testtilfeller var den målte ytelsen på bygningsmonterte vindturbiner40% lavere enn det som var oppgitt fra produsent. Dette avviket skyldes ihovedsak at virkningsgraden synker drastisk i urbane områder som følge avustabile vindforhold forårsaket av bygninger.NVEs forelåtte tariffering av plusskunder medfører at inntekter og besparelsertil en plusskunde i BKKs nett er estimert til å utgjøre 3352 NOKårlig. Med en oppgitt investeringskostnad på 200 000 NOK er det blitt vistat innvesteringen, gitt en forventet levetid på anlegget på 25 år, ikke vil blilønnsom med dagens kraftpriser og tariffsystem.I oppgaven har det blitt vist til tariffsystemene Erneuerbare-Energien Gesetz (EEG) og Feed in Tariff Scheme (FITs), henholdsvis i Tyskland ogStorbritannia. Det tyske tariffsystemet har bidratt sterkt til at Tyskland vedslutten av 2011 hadde 25 GW installert effekt fra solceller. I Storbritanniakan en plusskunde med et solcelleanlegg på 2,9 kWp forvente inntekter ogbesparelser opp mot 11 000 NOK årlig. I løpet av anleggets levetid kan detteutgjøre opp mot 280 000 NOK. Denne summen står i sterk kontrast til hva en norsk plusskunde per i dag kan forvente, som i løpet av levetiden til anleggeter estimert til å utgjøre om lag 87 000 NOK.Det har også i oppgaven blitt trukket frem at distribuert fornybar kraftproduksjonkan gi utfordringer knyttet til leveringskvalitet, spenningsstabilitetog personsikkerhet. Blant annet er vekselrettere, som er nødvendig for å omformelikespenning til vekselspenning, en kilde til harmoniske i kraftnettet.Et høyt innslag av vekselrettere i kraftnettet innebærer at anleggene for eksempelmå installerer filtre for å unngå at harmoniske sprer seg ut i nettet.Uønsket øydrift av distribuert kraftproduksjon kan i tillegg være en fare fornettselskapets ansatte ved vedlikehold i kraftnettet. Dette stiller også kravtil anleggets evne til å detektere øydrift og koble ut plusskunden. Det internasjonaleenergibyrået (IEA) har i en rapport konkludert med at risiko forpersonskade som følge av øydrift av solcelleanlegg hos plusskunde er 10^-9 årlig.Det har blitt diskutert at varierende innstråling på solcelleanlegg og ustabilevindforhold byr på utfordringer med spenningsregulering. Det har blitt trukketfrem at transient skydekke kan gi ramper i kraftproduksjonen opp mot15% i sekundet. Grunnet det høye innslaget av kraftproduksjon fra solcellerhar tyske myndigheter innført et nytt regulativ for vekselrettere. Regulativetsetter blant annet krav til en vekselretters effektfaktor, samt at en vekselretterskal ha støtte for frekvensbasert effektreduksjon ved frekvenser over 50,2 Hz.Det har blitt vist at et kundedisplay i kombinasjon med avanserte måle- ogstyringssystem (AMS) kan være en sentral kilde til informasjon for plusskunden.Displayet kan presentere forbruk og produksjonsdata i tillegg tilinformasjon om feilsituasjoner i kraftnettet eller plusskundens produksjonsanlegg.Det har i oppgaven blitt presentert et system for hjemmeautomasjon ikombinasjon med et kundedisplay levert av selskapet Control41. Dette systemetstøtter individuell laststyring i husholdningen og innebærer at plusskundensenergiforbruk i større grad kan tilpasses tidspunkt for kraftproduksjon.Eksempelvis kan en vaskemaskin settes til å starte på tidspunkter der plusskundenproduserer egen kraft. Dette innebærer at det aktuelle apparatetdrives med særdeles kortreist og klimavennlig kraft