Facteurs de risque et de protection des cancers dans l'étude épidémiologique COSA (Cancers de l'Ovaire et du Sein en Auvergne) (étude des polymorphismes génétiques et des interactions gènes-environnement)

Les taux d'incidence des cancers du sein et de l'ovaire sont en constante augmentation dans le monde. L'étiologie de ces cancers s'expliquerait en grande partie par la présence de polymorphismes génétiques à l'intérieur de gènes impliqués dans les voies biologiques majeures, gènes qui auraient également la capacité d'interagir avec les facteurs environnementaux et le mode de vie des individus. Ainsi l'identification de ces variants et de leurs interactions avec des facteurs de risque devrait conduire à la mise en place d'une prévention efficace et à la réduction du nombre de ces cancers. Ce travail de thèse a consisté à mener une étude épidémiologique cas-témoins dans une population de la région Auvergne constituée de 934 femmes ayant développé un cancer du sein, 54 femmes ayant développé un cancer des ovaires et de 1000 femmes témoins, dans le but de rechercher les facteurs de risque et de protection génétiques et environnementaux de ces pathologies. Le génotypage de l'ensemble de la population a été effectué pour 11 polymorphismes dans 7 gènes de faible pénétrance, impliqués dans les métabolismes des xénobiotiques et des œstrogènes (CYP1A1, CYP1B1, NAT2, GSTP1, COMT, ESR, PGR). L'analyse des facteurs de risque environnementaux a montré que la prise de contraceptifs, l'âge à la 1ère contraception et l'allaitement influenceraient l'apparition plus ou moins précoce des cancers du sein. Un rôle majeur de l'adiposité abdominale comme facteur de risque des cancers de l'ovaire a été observé dans notre population. L'étude des polymorphismes grâce à l'utilisation d'un modèle multigénique a révélé le rôle du gène COMT dans la cancérogenèse mammaire. COMT semble interagir avec les gènes CYP1B1, ESR, GSTP1 et NAT2 en modifiant le risque ainsi qu'avec le facteur tour de taille/tour de hanche. La présence de polymorphismes dans ces gènes va modifier l'élimination et par conséquent l'exposition de l'organisme aux carcinogènes exogènes en endogènes et boulverser la susceptibilité de chaque individu face au cancer mammaire. Un rôle plus limité des gènes étudiés a été observé dans l'étude des facteurs de rique des cancers de l'ovaire. La détermination des interactions gène-gène et gène-environnement pourra permettre la mise en place d'une prévention individualisée en identifiant les individus à plus haut risque de cancer.Breast and ovarian cancer incidence is increasing around the world. The great proportion of these cancers could be explained by polymorphisms in low penetrance genes involved in major biological pathways. These genes could also interact with environmental and lifestyle factors. Thus an efficient prevention and a reduction in cancer would be conceivable with the identification of these variants. We performed a case-control study in the Auvergne region consisted of 934 women who developed breast cancer, 54 women who developed ovarian cancer and 1000 healthy women. The aim of the study was to evaluate genetic and environmental risk and protective factors for these pathologies. We genotyped the whole population for eleven polymorphisms in seven low penetrance genes involved in xenobiotic and estrogen metabolisms (CYP1A1, CYP1B1, NAT2, GSTP1, COMT, ESR, PGR). Oral contraceptive (OC) use, age at first OC use and breastfeeding were risk factors for early age at breast cancer onset. We observed a major role of central adiposity in ovarian cancer risk. We investigated the roles of polymorphisms in a multigenic model and found that COMT played an important role in breast cancer. This gene seemed to interact with other genes such as CYP1B1, ESR, GSTP1, NAT2 and with waist-to-hip ratio factor by modifying the risk. Polymorphisms in the studied genes would modify detoxication and consequently women exposure to endogenous or exogenous carcinogens. This would change individual breast cancer susceptibility. A limited role of these polymorphisms was found in ovarian cancer risk. Thus the identification of gene-gene and gene-environment interactions will lead to an individualized prevention strategy by identifying high-risk individuals.CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocSudocFranceF

IMMUNOTHERAPIE GENIQUE DES CANCERS OVARIENS (ETUDE DES INTERACTIONS ENTRE P53 ET LES ONCOSUPPRESSEURS BRCA1, BRCA2 ET ATM (DOCTORAT : BIOLOGIE MOLECULAIRE))

CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocPARIS-BIUM (751062103) / SudocSudocFranceF

Phyto-œstrogènes et cancer du sein (inhibition des oncosuppresseurs BRCA1 et BRCA2 par la technique d'interférence ARN)

Le cancer du sein est la tumeur la plus fréquente et la principale cause de mortalité chez la femme. Des facteurs génétiques ont été mis en évidence et des mutations des oncosuppresseurs BRCA1 et BRCA2 ont été observées dans la majorité des cas héréditaires de cancer du sein. Dans les cas sporadiques (90 à 95% des cas), ce sont des modulations de leur expression qui ont été démontrées. Des facteurs environnementaux semblent intervenir également avec une incidence du cancer du sein plus élevée en Occident qu'en Asie et l'étude des populations migrantes met en avant l'alimentation riche en soja des femmes asiatiques. En effet, de nombreuses études soulignent le rôle protecteur d'un apport en génistéine et daidzéine, principaux phyto-œstrogènes de cet aliment. L'objectif de ce travail a été d'étudier les modulations transcriptionnelles induites par une inhibition d'expression de BRCA1 ou BRCA2 et/ou un traitement par la génistéine et la daidzéine. Pour cela, une étude in vitro a été réalisée sur des cellules humaines mammaires tumorales (MCF-7, MDA-MB-231) et non tumorale (MCF-10a). Les résultats obtenus par les techniques de microarrays et de RT-PCR quantitative en temps réel (TaqMan®) ont montré une action chimiopréventive des phyto-œstrogènes sur le cancer du sein par des modulations significative de gènes impliqués dans les processus de cancérogenèse mammaire tels que le cycle cellulaire, l'apoptose, le métabolisme des xénobiotiques ou encore l'angiogenèse.Breast cancer is the most common cancer and the main cause of death in woman. Genetic predispositions were highlighted and inherited mutations in BRCA1 and BRCA2 breast cancer susceptibility gene conferred increased risk of breast cancer. Because BRCA1 and BRCA2 expressions are often modulated in sporadic breast cancer (90 to 95% of cases), abnormal expressions may also play a role in nonhereditary breast tumors. Interest in phytoestrogens, more particularly soy, has been instigated by epidemiologic studies that have suggested low incidence of breast cancer in Asian countries with high soy intake than Eastern countries. The aim of this work was to determine transcriptional modulations induced by inhibition of BRCA1 or BRCA2 expressions and/or genistein and daidzein treatments. So, an in vitro study was performed on two human breast cancer cell lines (MCF-7, MDA-MB-231) and one nontumorogenic cell line (MCF-10a). Results obtained by microarrays and quantitative RT-PCR (TaqMan®) exhibited phytoestrogens chemopreventive properties in breast cancer by modulating expression of molecular pathways involved in carcinogenesis such as cell communication, apoptosis, xenobiotic metabolism and angiogenesis.CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocSudocFranceF

Resvératrol et cancer du sein (biodisponibilité - régulation transcriptionnelle)

CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Effets des micronutriments sur l'expression des gènes oncosuppressifs BRCA1 et BRCA2 dans la glande mammaire

Le cancer du sein, tumeur hormono-dépendante, est la tumeur la plus fréquente chez les femmes. Deux gènes majeurs de prédisposition héréditaire au cancer du sein et de l'ovaire ont été décrits, il s'agit des gènes BRCA1 et BRCA2. Au niveau sporadique, ce sont des variations d'expression et plus particulièrement une diminution de l'expression des ARNm qui a été retrouvée, alors que ce sont des mutations des gènes dans les cancers héréditaires. Une incidence plus faible du cancer du sein a été décrite chez les populations asiatiques qui consomment beaucoup de soja, composé riche en phytoœstrogènes. De nombreuses études ont d'ailleurs montré que ces composés peuvent inhiber la prolifération cellulaire et ainsi avoir probablement un effet protecteur vis-à-vis du cancer. L'objectif de ce travail de thèse a été d'étudier les effets des phytoœstrogènes sur les gènes suppressifs de tumeur BRCA1 et BRCA2 au niveau transcriptionnel et traductionnel. Cette étude a été réalisée in vitro dans des lignées continues mammaires tumorales et une normale après traitement par la génistéine et la daidzéine et in vitro avec un modèle de rattes femelles Wistar ayant reçu différents régimes riches en phytoœstrogènes. Nous avons réalisé la quantification des ARNm des gènes BRCA1 et BRCA2 par la méthode de RT-PCR quantitative en temps réel. Les protéines ont été étudiées par chromatographie d'affinité à haute pression pour les lignées continues et par immunohistochimie pour les glandes mammaires de rattes. Il semblerait que ces composés puissent réguler in vitro et in vivo l'expression de BRCA1 et BRCA2 au niveau ARNm, par contre au niveau protéique nous n'avons pas mis en évidence de différence d'expression. Les mécanismes et les voies d'action des phytoœstrogènes sur les oncosuppresseurs BRCA1 et BRCA2 dans le cancer du sein restent encore à élucider.CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Resvératrol et cancer du sein (biodisponibilité - régulation transcriptionnelle)

CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Impact de la demethylase JMJD3 sur la croissance tumorale prostatique

International audienc

Lycopène et cancer du sein (effets sur les oncosuppresseurs BRCA1 et BRCA2)

Dans les cancers du sein ; la prédisposition héréditaire (5 à 10 % des cas) correspond à une mutation dans un des 2 oncosuppresseurs, BRCA1 ou BRCA2 alors que dans les formes sporadiques, c'est une diminution de l'expression des ARNm qui est retrouvée. Le lycopène, caroténoïde de la tomate pourrait jouer un rôle dans la prévention des cancers grâce à sa forte activité anti-oxydante. L'objectif de ce travail a été de déterminer si le lycopène pouvait moduler l'expression des gènes impliqués dans la cancérogenèse mammaire et par quelles voies métaboliques. Pour cela, une étude in vitro sur des cellules mammaires humaines tumorales (MCF-7, HBL-100, MDA-MB-231) et dystrophiques (MCF-10a) a été réalisée. Dans un 1er temps, les résultats ont montré une modulation de l'expression des ARNm BRCA1 et BRCA2, par RT-PCR quantitative en temps réel (Taqman®) et des protéines BRCA1 et BRCA2 phosphorylées par chromatographie d'affinité (BioCAD®), suite au traitement avec 10 M de lycopène pendant 48H. Dans un 2ème temps, une signature moléculaire des cellules mammaires humaines traitées par le lycopène, a été établie grâce à la technologie des biopuces transcriptome. Les résultats ont permis de mettre en évidence une régulation des gènes impliqués dans le cycle cellulaire, l'apoptose et la réparation des lésions de l'ADN. En conclusion, le lycopène semble interagir avec de nombreuses voies métaboliques impliquées dans la cancérogenèse mammaire laissant supposer que ce caroténoïde pourrait jouer un rôle préventif dans cette pathologie.In breast cancer, hereditary predisposition (5 or 10 % of cases) can involve germline mutations of BRCA1 or BRCA2 oncosuppressors, whereas in sporadic forms a decrease of BRCA1 and BRCA2 mRNA has been observed. Lycopene, a tomato carotenoid, might play a role in cancer prevention throught its strong antioxidant activity. The aim of this work was to determine if lycopene could modulate the expression of genes involved in breast cancer and through which metabolic pathways. An in vitro study of human breast cancer cell lines (MCF-7, HBL-100, MDA-MB-231) and a dystrophic cell line (MCF-10a) was carried out. The results showed modulation of BRCA1 and BRCA2 mRNA expression by quantitative RT-PCR (Taqman®) and phosphorylation of BRCA1 and BRCA2 proteins by affinity chromatography (BioCAD®), after exposure to 10 M lycopene for 48 hours. A transcriptomic microarray study was performed to determine the molecular signature of human breast cancer cell lines after lycopene treatment. Our results highlight lycopene regulation of genes involved in cell cycle, apoptosis and DNA repair. In conclusion, lycopene seems to interact with many metabolic pathways involved breast cancer, suggesting that this carotenoid could play a preventive role in this pathology.CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF