Il mosaico dell’Euphorbia x lomii

Alla vasta famiglia delle Euphorbiaceae appartengono numerose specie ed anche ibridi molte delle quali arbustive come E. milii (sin. E. splendens) e l’ibrido E. x lomii, alquanti simili tra loro. Si tratta di piante ornamentali semisucculente con base legnosa (E. milii è originario del Madacascar), chiamate anche “corona di Cristo”, probabilmente a causa della presenza di spine e “fiori” di colore rosso che evocano le gocce di sangue. Recentemente, soprattutto in Sicilia, e specificatamente nel ragusano, sono iniziate molteplici attività di selezione riguardanti alcuni arbusti spinosi quali E. x lomii e E. milii. Il caso patologico che presentiamo sottolinea ancora una volta come l’introduzione in Italia di materiale di propagazione non controllato dal punto di vista sanitario possa dare origine a coltivazioni infette da virus con conseguenti rischi dal punto di vista produttivo, economico ed epidemiologico. Il materiale di propagazione I primi studi di tipo agronomico-colturale sono stati effettuati partendo da talee di E. x lomii importante da aziende vivaistiche della Tailandia, Paese in cui vi è da sempre una grande disponibilità di varietà ed ibridi con differenti caratteristiche morfologiche e di adattabilità climatica su cui operare. Si è cercato quindi, come accennato, di selezionare le varietà maggiormente interessanti per il mercato nazionale da proporre sia ai produttori di piante in vaso fiorite del sud Italia, sia ai “consumatori” desiderosi di alternare a pelargoni e Surfinie, specie altrettanto decorative ma maggiormente resistenti in zone calde, soleggiate e spesso e siccitoso. Le talee importate sono state poste a radicare, e quindi messe in coltura (sperimentando opportunamente la concimazione, i parametri ambientali, i trattamenti contro le principali avversità parassitarie, ecc.) fino all’ottenimento di piante fiorite da mettere in produzione presso le singole Aziende, o da utilizzare come piante-madri per il taleaggio. E’ stata anche sperimentata la micropropagazione al fine di migliorare il portamento (ad esempio, maggiormente cespuglioso) e la fioritura (più abbondante e persistente con tendenza alla rifioritura nelle diverse stagioni dell’anno), nonché il numero di talee ottenibili da un singolo individuo (superiore a 3 o 4). Reperimento dei campioni - Nel mese di maggio-giugno 2008, in alcune Aziende della provincia di Palermo si sono verificati alcuni casi di “Mosaico”. In una di queste, in particolare, la malattia coinvolgeva esclusivamente una varietà a fiore rosa corallo di E. x lomii Le altre, presenti nella medesima serra, erano invece asintomatiche. Il “Mosaico” si presentava sotto forma di una maculatura o screziatura sui fiori ed anche sulle foglie. La totalità delle piante di questa varietà appariva sintomatica tanto da fare supporre non solo la presenza di un virus, ma che all’origine dell’infezione vi fosse la propagazione per talea a partire da piante-madri già infette. Per verificare questa ipotesi sono state effettuate opportune indagini virologiche. Indagini virologiche - Da un primo esame visivo, i sintomi di “Mosaico” sono stati diagnosticati quali tipici dell’infezione dal virus del mosaico della Poinsettia (poinsettia mosaic virus: PnMV). Non si è però escluso che altri virus, che normalmente infettano specie del genere Euphorbia potessero essere coinvolti. I test molecolari hanno però dato esito negativo per tutti i virus indagati. Il succo fogliare estratto dai campioni sintomatici di E. x lomii è stato osservato al microscopio elettronico Philips CM10 (tecnica del leaf-dip). Dalle osservazioni, è stato possibile verificare la presenza di particelle virali rotondeggianti, alcune “vuote”, tipicamente riferibili a PmMV. Al fine di confermate l’infezione da questo virus, è stata applicata la tecnica immunoenzimatica DAS-ELISA utilizzando un siero policlonale specifico, che ha dato esito positivo

Molecular characterization of cucumber mosaic virus isolates infecting ornamental species cultivated in the botanical garden of Bologna university.

During an epidemiological survey carried out in the Botanical Garden at Bologna University, Cucumber mosaic virus (CMV) has been detected by applying PAS-ELISA technique infecting some ornamental species exhibiting a severe symptomatology on the leaves. Datura innoxia Miller. showed mosaic and leaf-curling; Globularia nudicaulis L. produced narrowed leaves with a yellow mosaic and/or variegation; Eupatorium cannabinum L. showed a systemic chlorotic and/or yellow mosaic and stunting. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and single strand conformation polymorphism (SSCP) were employed to characterise these CMV isolates. Total RNA was extracted from symptomatic leaf samples with a Qiagen RNeasy Plant Minikit (Qiagen S.P.A., Milan, Italy) according to the manufacturer’s instructions. RT-PCR was carried out using specific primers for the movement protein gene of RNA3 of CMV (forward MP+ CATGGCTTTCCAAGGTACCAG, genomic position 118nt to 138nt, and reverse CTAAAGACCGTTAACCACCTGC, genomic position 938nt to 959nt). All samples from the three ornamental species, yielded DNA fragments of the expected size: 841 bp. PCR products were then analysed by SSCP to identify specific sequence variants and compare genetic relationships with CMV isolates from other ornamental species present in the same Botanical Garden (Thevetia nereifolia and Nandina domestica) (1). The results showed a different sequence variant for each CMV isolate, indicating that these tree isolates are a new accession in the Botanical Garden. Probably these isolates came from the original Country of the plants. 1) Davino et al., 2005. Cucumber mosaic virus infecting Thevetia nereifolia Juss. ex Stedu. and Nandina domestica Thumb. J. Plant Path., 87(4), 292-293

First report of Hosta virus X (HVX) infecting Hosta in Italy.

Hosta, HVX, Ital

Globularia nudicaulis, a new host of Cucumber mosaic virus

Globularia nudicaulis has been found for the firts time naturally infected by CMV. This virus was mechanically transmitted to herbaceous host plants. RT-PCR and SSCP were employed to characterize the CMV isolate. The results showed a sequence variant that was different from other CMV italian isolates

Inula viscosa L. a new host of Cucumber mosaic virus

none4Inula viscosa L. (Asteraceae) is a well-known perennial medicinal herb that grows wild in the Mediterranean area. Both folk and traditional medicines ascribe several uses to this plant, such as antipyretic, antiseptic, etc. In Spring 2007, almost 40% of I. viscosa plants cultivated at the Herb Garden “Augusto Rinaldi Ceroni “ of Casola Valsenio (Emilia Romagna, Italy) showed chlorotic mosaic on leaves. Symptomatic samples were collected and analysed. No spherical or elongated virus-like particles were observed by transmission electron microscopy in leaf extracts using a leaf dip method. By applying PAS-ELISA technique, Cucumber mosaic virus alone was detected in all symptomatic plants (more than 20) tested, using a polyclonal antiserum (PVAS 30, American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA). CMV from I. viscosa leaves was mechanically transmitted to Nicotiana tabacum L. “Samsun”, which developed systemic mosaic symptoms. To confirm the association of CMV with the diseased plants, total RNA was extracted from the same samples (RNeasy Plant Mini Kit; Qiagen, Hilden, Germany) and analyzed by RT-PCR using CMV-specific primers MP+ and MP- (Lin et al., 2004). The expected 842 bp fragment was amplified only from samples of symptomatic tissue while no amplification product was observed when water or healthy plants were used as a template. RT-PCR products were cloned and sequenced. The sequence obtained (GenBank Accession No. EU432181) had 99% identity with CMV-TN (GenBank Accession No. AB176847) which induces tomato necrosis disease, and several other isolates of subgroup II. To our knowledge, this is the first report of CMV infecting I. viscosa and it adds a new host to the list of more than 1,000 species infected by this virus.mixedS. Davino; S. Panno; M. Davino; M.G. BellardiS. Davino; S. Panno; M. Davino; M.G. Bellard

Analisys of a natural population of Cucumber mosaic virus infecting medicinal plants

none4Autore/i del volume: SIPAVmixedS.Davino; A.Lombardo; M.Davino; M.G.BellardiS.Davino; A.Lombardo; M.Davino; M.G.Bellard

Characterization of a strain of Pepino mosaic virus found in Sicily.

During winter 2005, an unusual virus-like yellow leaf disorder associated to interveinal leaf yellowing and marbling on fruits, was observed in some greenhouse tomato crops in Sicily, exactly in province of Ragusa. Two leaves from 250 symptomatic tomato plants were serologically tested by DAS-ELISA technique using the sera to Tomato spotted wilt virus (TSWV), Impatiens necrotic spot virus (INSV), Tobacco mosaic virus (TMV), Cucumber mosaic virus (CMV) and Pepino mosaic virus (PepMV). Of the 250 samples tested, 215 were positive to PepMV presence. This virus was mechanically transmitted to Cucumis sativus “Cubit”, Datura metel, Nicotiana benthamiana and tomato “Rio Grande”. The host range of PepMV-Ragusa differed from that of PepMV found infecting in 2002 tomato “Camone” in Sardinia. To amplify PepMV were utilized primers PepMV-TGB and PepMV-UTR that amplify a fragment of 844 bp containing CP gene, part of TGB gene and UTR3 (14) for PepMV PCR fragments were cloned in apCR2.1 – TOPO vector. Purified recombinant plasmids were sequenced on an ABI PRISM DNA 377 sequencer using standard M13 forward and reverse primers. To compare the PepMV-Ragusa (genbank acc. N. DQ517884) isolate, 14 nucleotide sequences were retrieved from the GenBank entries: nucleotide sequences alignments of CP-PepMV-Ragusa showed homology of 99% with both isolates US2 and Spain-Murcia. From an epidemiological point of view, aspects of the long-distance dissemination of PepMV should be considered, like the trade of living plantlets, seeds, contaminated pots in Southern Italy, occur together, indifferently in the open and greenhouse crops. Restrictive measures are required to avoid the PepMV spreading in others Italian regions