Genótipo e expressão da proteína fluorescente verde melhorada em ratos da linhagem LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc

The Green fluorescent protein (GFP) was first described after being extracted from Aequorea victoria in 1987. Since then, GFP and its derivatives have been widely used in several experiments as cell and protein marker. In the present study it was verified the genotype of the offspring from crosses between heterozygote Lewis LEW-Tg (EGFP) F455.5/ Rrrc rats and analyzed the expression of the enhanced green fluorescent protein (EGFP) in different cell types and genotypes. The genotype of the offspring was assessed by PCR and analysis of EGFP expression in different cells and genotypes, including mesenchymal stem cells (MSC) derived from adipose tissue and calvarial osteoblast cells. Expression of EGFP was verified by flow cytometry, fluorescence microscopy, and immunostaining. Through these methods, it was identified the genotypes of the offspring and determined the levels of expression of EGFP in two cell types. A difference in expression between the (EGFP +/+) and (EGFP +/-) genotypes was also observed in addition to the presence of autofluorescence. Further studies on the natural fluorescence of cells with the (EGFP +/-) genotype and that induced by presence of the EGFP are necessary.A proteína fluorescente verde (GFP) foi descrita pela primeira vez após ter sido extraída de Aequorea victoria em 1987. Desde então, a GFP e seus derivados têm sido amplamente utilizados em várias experiências como marcador celular e de proteínas. O objetivo do presente estudo foi o de verificar o genótipo dos descendentes de cruzamentos entre ratos Lewis LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc heterozigotos e de analisar a expressão da proteína fluorescente verde melhorada (EGFP) em diferentes tipos celulares e genótipos. O genótipo da descendência foi avaliado por PCR e pela análise da expressão da EGFP em diferentes células e genótipos, incluindo-se as células-tronco mesenquimais (MSC) derivadas de tecido adiposo e de osteoblastos de calvária. A expressão da EGFP foi verificada por citometria de fluxo, microscopia de fluorescência e imunocoloração. Foram, identificados os genótipos da descendência e determinados os níveis de expressão de EGFP em dois tipos de células. Foi também constatada uma diferença de expressão entre os genótipos (EGFP +/+) e (EGFP +/-) além da presença de autofluorescência. Mais estudos são necessários para esclarecer a fluorescência natural de células com o genótipo (EGFP +/-) e aquela induzida pela presença da EGFP

Genótipo e expressão da proteína fluorescente verde melhorada em ratos da linhagem LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc

A proteína fluorescente verde (GFP) foi descrita pela primeira vez após ter sido extraída de Aequorea victoria em 1987. Desde então, a GFP e seus derivados têm sido amplamente utilizados em várias experiências como marcador celular e de proteínas. O objetivo do presente estudo foi o de verificar o genótipo dos descendentes de cruzamentos entre ratos Lewis LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc heterozigotos e de analisar a expressão da proteína fluorescente verde melhorada (EGFP) em diferentes tipos celulares e genótipos. O genótipo da descendência foi avaliado por PCR e pela análise da expressão da EGFP em diferentes células e genótipos, incluindo-se as células-tronco mesenquimais (MSC) derivadas de tecido adiposo e de osteoblastos de calvária. A expressão da EGFP foi verificada por citometria de fluxo, microscopia de fluorescência e imunocoloração. Foram, identificados os genótipos da descendência e determinados os níveis de expressão de EGFP em dois tipos de células. Foi também constatada uma diferença de expressão entre os genótipos (EGFP +/+) e (EGFP +/-) além da presença de autofluorescência. Mais estudos são necessários para esclarecer a fluorescência natural de células com o genótipo (EGFP +/-) e aquela induzida pela presença da EGFP

Metabolism

Background: Cardiovascular disease is the leading cause of deaths in nonalcoholic steatohepatitis (NASH) patients. Mouse models, while widely used for drug development, do not fully replicate human NASH nor integrate the associated cardiac dysfunction, i.e. heart failure with preserved ejection fraction (HFpEF). To overcome these limitations, we established a nutritional hamster model developing both NASH and HFpEF. We then evaluated the effects of the dual peroxisome proliferator activated receptor alpha/delta agonist elafibranor developed for the treatment of NASH patients. Methods: Male Golden Syrian hamsters were fed for 10 to 20 weeks with a free choice diet, which presents hamsters with a choice between control chow diet with normal drinking water or a high fat/high cholesterol diet with 10% fructose enriched drinking water. Biochemistry, histology and echocardiography analysis were performed to characterize NASH and HFpEF. Once the model was validated, elafibranor was evaluated at 15 mg/kg/day orally QD for 5 weeks. Results: Hamsters fed a free choice diet for up to 20 weeks developed NASH, including hepatocyte ballooning (as confirmed with cytokeratin-18 immunostaining), bridging fibrosis, and a severe diastolic dysfunction with restrictive profile, but preserved ejection fraction. Elafibranor resolved NASH, with significant reduction in ballooning and fibrosis scores, and improved diastolic dysfunction with significant reduction in E/A and E/E' ratios. Conclusion: Our data demonstrate that the free choice diet induced NASH hamster model replicates the human phenotype and will be useful for validating novel drug candidates for the treatment of NASH and associated HfpEF

Una mirada prospectiva de la industria Risaraldense camino a la industria 4.0 : plan tecnológico 2020–2030 Centro de Diseño e Innovación Tecnológico Industrial

Se presenta el plan tecnológico del Centro de Diseño e Innovación Tecnológico Industrial del SENA para la vigencia 2002 - 2030. Comprende el análisis y diagnóstico de la industria risaraldense, sus necesidades y tendencias, con enfoque a la industria 4.0. Se provee información para: identificar tecnologías y ocupaciones emergentes que permitan anticipar la definición de perfiles de instructores, determinar requerimientos de modernización de infraestructura física y tecnológica del Centro de formación, actualizar, crear o eliminar programas de formación, establecer el tipo de formación, servicios tecnológicos e innovación que el centro de formación ofrecerá en un horizonte de 10 años e identificar los proyectos y actores estratégicos para el centro de formación.The technological plan of the SENA Industrial Technological Design and Innovation Center for the period 2002-2030 is presented. It includes the analysis and diagnosis of the Risaralda industry, its needs and trends, with a focus on industry 4.0. Information is provided to: identify emerging technologies and occupations that allow anticipating the definition of instructor profiles, determine modernization requirements of the physical and technological infrastructure of the Training Center, update, create or eliminate training programs, establish the type of training, services technology and innovation that the training center will offer over a 10-year horizon and identify projects and strategic actors for the training center.Fase I: análisis y diagnóstico estratégico -- Análisis externo del centro de formación -- Análisis interno del centro de formación -- Seguimiento al plan tecnológico inmediatamente anterior -- Cruce DOFA -- Vigilancia científico -tecnológica y competitiva especialidad energía eléctrica -- Vigilancia científico -tecnológica y competitiva especialidad electrónica y automatización -- Vigilancia científico -tecnológica y competitiva especialidad Mecánica Industrial -- Vigilancia científico -tecnológica y competitiva especialidad Informática, diseño y desarrollo de software -- Vigilancia científico -tecnológica y competitiva especialidad materiales para la industria -- Vigilancia científico -tecnológica y competitiva especialidad Automotor -- Vigilancia científico -tecnológica y competitiva especialidad Textil, confección y diseño -- Vigilancia científico -tecnológica y competitiva especialidad construcción e infraestructura -- Vigilancia científico -tecnológica y competitiva servicios tecnológicos -- Fase II: formulación estratégica -- Mapa de trayectoria tecnológica -- Validación con expertos -- Construcción de escenarios -- Formulación estratégica -- Métodos prospectivos utilizados -- Formulación estratégica -- Fase III: recomendaciones estratégicas -- Recomendaciones estratégicas especialidad energía eléctrica -- Recomendaciones estratégicas especialidad electrónica y automatización -- Recomendaciones estratégicas especialidad mecánica industrial -- Recomendaciones estratégicas especialidad Informática, diseño y desarrollo de software -- Recomendaciones estratégicas especialidad materiales para la industria -- Recomendaciones estratégicas especialidad Automotor -- Recomendaciones estratégicas especialidad Textil, confección y diseño -- Recomendaciones estratégicas especialidad construcción e infraestructura -- Recomendaciones estratégicas Sennova -- Servicios tecnológicos -- Introducción e información general -- Planteamiento de la necesidad u oportunidad -- Objetivos -- Desarrollo de la vigilancia científico-tecnológica -- Resultados de vigilancia tecnológica con base en análisis de patentes -- Identificación de tecnologías y sublíneas tecnológicas -- Comportamiento de los aceros -- Vigilancia normativa y regulatoria -- Vigilancia tecnológica -- Vigilancia competitiva -- Vigilancia comercial -- Resultados -- Conclusiones y recomendacionesna556 página

Condrogênese de células tronco mesenquimais derivadas de Rattus Norvegicus utilizando matriz orgãnica tridimensional à base de quitosana

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-12T14:10:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 disserta__o_n.m.breyner.pdf: 736801 bytes, checksum: 27a091658ce79821fbf275943ab9cde5 (MD5) Previous issue date: 10A cartilagem apresenta-se histologicamente descrita como um tecido avascular, o que lhe confere, junto a outras características, uma limitada capacidade de reparo. Consequentemente, pequenas lesões podem acarretar em danos progressivos e/ou processos degenerativos, como osteoartrite. Para o tratamento de lesões da cartilagem, técnicas de engenharia de tecido têm sido indicadas. Neste trabalho, foi demonstrado que a matriz 3D (tridimensional) de quitosana se apresentou adequada ao processo de adesão e diferenciação de CTM (Células-tronco mesenquimais) após a adição do meio condrogênico contendo TGF- e dexametasona. As CTM cultivadas em matriz 3D de quitosana se apresentaram viáveis durante as 9 semanas de cultivo, além de apresentarem uma redução na produção de FA, o que indica alteração fenotípica das células. Corroborando com esses resultados, a produção de colágeno pelas CTM cultivadas neste tipo de matriz aumentou no decorrer do período de cultivo, indicando um início de diferenciação. Entretanto, ao adicionar gelatina à constituição da matriz os resultados obtidos não foram satisfatórios. Diante dos excelentes resultados apresentados pela matriz 3D à base de quitosana na promoção da condrogênese usando CTM, podemos apontar essa estrutura orgânica com um dos principais candidatos em implantes de biomateriais colonizados por células tronco para recuperação tecidual em medicina regenerativa.Cartilage is known to be an avascular tissue and this characteristic taken together with others provides the tissue a very limited regeneration capacity. Consequently, a small damage to the tissue results in progressive damages or degenerative processes like osteoarthrite. Tissue engineering techniques has been applied not only in the treatment of cartilage damage but also in other medical fields such as orthopedic and odontology. In the present work, it was demonstrated that the 3D (tridimesional) chitosan scaffold was efficient in the adhesion and differentiation process of the MSCs (Mesenchymal Stem Cells) after the addition of a chondrogenic medium containing TGF- and dexamethasone. The cultured MSCs in the 3D chitosan scaffold were more viable during the first nine weeks of culture, demonstrating a reduction in the production of Alkaline Phosphastase, which indicates phenotipic changes of the cells. Confirming these results, the collagen production of the MSCs cultured in this kind of scaffold increased together as the culture period indicating the beginning of a differentiation. However, when gelatin is added to the scaffold constitution, the results were not satisfactory. Ahead of the excellent results using a matrix made of chitosan in the promotion of MSCs differentiation. It becomes clear that this 3D organic structure is one of the best candidates for biomaterial implants colonized by stem cells in the tissue recovering in regenerative medicine

Use of rec LABs: Good Bugs to Deliver Molecules of Health Interest: From Mouse to Man

Lactic acid bacteria (LAB) constitute a heterogeneous group of Gram-positive bacteria widely used in the food industry because of their generally regarded as safe (GRAS) status. In this regard, Lhave been widely investigated and used as live vehicles for the production and delivery of heterologous proteins or cDNA of vaccinal, medical or technological interest because of its ease for protein secretion and purification. Here, we review the expression of heterologous protein and the various delivery systems developed to target heterologous proteins to specific cell locations (cytoplasm, extracellular medium or cell wall), as well as the more recent research on Las DNA delivery vehicles and finale with the challenges and future trends to improve the existing strategies and develop new ones

Use of rec LABs: Good Bugs to Deliver Molecules of Health Interest: From Mouse to Man

Lactic acid bacteria (LAB) constitute a heterogeneous group of Gram-positive bacteria widely used in the food industry because of their generally regarded as safe (GRAS) status. In this regard, Lhave been widely investigated and used as live vehicles for the production and delivery of heterologous proteins or cDNA of vaccinal, medical or technological interest because of its ease for protein secretion and purification. Here, we review the expression of heterologous protein and the various delivery systems developed to target heterologous proteins to specific cell locations (cytoplasm, extracellular medium or cell wall), as well as the more recent research on Las DNA delivery vehicles and finale with the challenges and future trends to improve the existing strategies and develop new ones

Une exposition orale chronique à l'additif alimentaire E551 (dioxyde de silice) bloque l'induction de la tolérance orale et prédispose à l'intolérance alimentaire chez la souris

International audienc

Validating Enteroid-Derived Monolayers from Murine Gut Organoids for Toxicological Testing of Inorganic Particles: Proof-of-Concept with Food-Grade Titanium Dioxide

Human exposure to foodborne inorganic nanoparticles (NPs) is a growing concern. However, identifying potential hazards linked to NP ingestion often requires long-term exposure in animals. Owing these constraints, intestinal organoids are a promising alternative to in vivo experiments; as such, an in vitro approach should enable a rapid and reliable assessment of the effects of ingested chemicals on the gut. However, this remains to be validated for inorganic substances. In our study, a transcriptomic analysis and immunofluorescence staining were performed to compare the effects of food-grade TiO2 (fg-TiO2) on enteroid-derived monolayers (EDMs) from murine intestinal organoids to the known impacts of TiO2 on intestinal epithelium. After their ability to respond to a pro-inflammatory cytokine cocktail was validated, EDMs were exposed to 0, 0.1, 1, or 10 µg fg-TiO2/mL for 24 h. A dose-related increase of the muc2, vilin 1, and chromogranin A gene markers of cell differentiation was observed. In addition, fg-TiO2 induced apoptosis and dose-dependent genotoxicity, while a decreased expression of genes encoding for antimicrobial peptides, and of genes related to tight junction function, was observed. These results validated the use of EDMs as a reliable model for the toxicity testing of foodborne NPs likely to affect the intestinal barrier

Genótipo e expressão da proteína fluorescente verde melhorada em ratos da linhagem LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc

A proteína fluorescente verde (GFP) foi descrita pela primeira vez após ter sido extraída de Aequorea victoria em 1987. Desde então, a GFP e seus derivados têm sido amplamente utilizados em várias experiências como marcador celular e de proteínas. O objetivo do presente estudo foi o de verificar o genótipo dos descendentes de cruzamentos entre ratos Lewis LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc heterozigotos e de analisar a expressão da proteína fluorescente verde melhorada (EGFP) em diferentes tipos celulares e genótipos. O genótipo da descendência foi avaliado por PCR e pela análise da expressão da EGFP em diferentes células e genótipos, incluindo-se as células-tronco mesenquimais (MSC) derivadas de tecido adiposo e de osteoblastos de calvária. A expressão da EGFP foi verificada por citometria de fluxo, microscopia de fluorescência e imunocoloração. Foram, identificados os genótipos da descendência e determinados os níveis de expressão de EGFP em dois tipos de células. Foi também constatada uma diferença de expressão entre os genótipos (EGFP +/+) e (EGFP +/-) além da presença de autofluorescência. Mais estudos são necessários para esclarecer a fluorescência natural de células com o genótipo (EGFP +/-) e aquela induzida pela presença da EGFP