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Ovariole structure supports sistergroup relationship of Neuroptera and Coleoptera
Insect ovaries consist of functional units, the ovarioles. Each ovariole is a polarized tube with a germarial region at its anterior end. Undifferentiated germarial germ cells may differentiate either into oocytes alone (so-called panoistic ovarioles) or in oocytes and nurse cells (so-called meroistic ovarioles). Whenever nurse cells accompany an oocyte through all growth periods in a separated physiological unit – the follicle – the subtype is called polytrophic meroistic. In telotrophic meroistic ovarioles all nurse cells remain in an anterior trophic chamber and contribute their products finally into all growing oocytes via nutritive cords. Differences in the mode of germ cell cluster formation and the specifi c interaction of germ cells with the somatic tissues were causing these different types. All three types are constant at the family to order level or even at a supra-order level. Therefore the characters which lead to these types are excellent candidates to unravel order and supraorder ranked taxa. Data from the analysis of germ cell cluster formation are presented which corroborate the sistergroup relationship of Neuropterida and Coleoptera
Toluidine blue staining as a rapid measure for initiation of oocyte growth and fertility in Varroa jacobsoni Oud
A whole mount method was used to determine the moment of activation of oocyte growth
in Varroa jacobsoni females. Ovaries of the mites were dissected and stained with
toluidine blue. The coloration of the terminal oocyte indicates the uptake of
euplasmatic and/or yolk material and, therefore, the initiation of the reproductive
phase. In phoretic mites from adult bees, no staining of the ovary could be
detected. V. jacobsoni females artificially introduced into freshly capped brood
cells and removed for dissection 6 h later already showed clear blue staining of
the terminal oocyte. The ovaries of V. jacobsoni females introduced 14 h after
capping of the brood cell, however, remained uncolored after incubation in toluidine
blue. We conclude that, in phoretic mites, oogenesis is arrested at a previtellogenic
phase. Immediately after invasion of the brood cell, reproduction is activated by an as
yet unknown host factor. This factor is present in freshly capped brood cells but not
in brood cells 14 h after capping. Our new method offers new possibilities for the exact
determination of oocyte growth and, therefore, for the study of V. jacobsoni fertility
in different host and parasite populations.Coloration au bleu de toluidine pour une détermination rapide du début de la croissance des
ovocytes et de la fertilité chez Varroa jacobsoni Oud. La fertilité réduite des acariens
Varroa jacobsoni dans les cellules de couvain d'ouvrières (Apis mellifera L.) est l'un des
facteurs clés liés à la tolérance à la varroose, comme cela a été montré chez l'hôte
d'origine Apis cerana Fabr. et chez les abeilles africanisées du Brésil. Les signaux qui
déclenchent l'activation de la reproduction de l'acarien après l'invasion de la cellule
de couvain restent à ce jour inconnus. Nous avons utilisé une nouvelle méthode de
coloration in toto pour déterminer avec précision le début de la croissance des ovocytes.
Des femelles phorétiques de V. jacobsoni ont été prélevées sur des abeilles adultes et
introduites artificiellement dans des cellules de couvain fraîchement operculées et
dans des cellules de couvain operculées depuis 14-16 h. Toutes les 6 h, les acariens
ont été retirés des cellules et pesés sur une balance de précision. Immédiatement
après la pesée, les ovaires ainsi que la spermathèque et l'organe en forme de lyre, ont été
soigneusement disséqués, fixés dans la formaline à 4 % et colorés durant 30 min au bleu de
toluidine à 0,005 % . Les ovocytes ont été lavés dans un tampon PBS et leur coloration a été
analysée au microscope. La coloration de l'ovocyte dépend de l'incorporation de vitellus ou
d'autres constituants euplasmatiques et marque donc l'activation de l'ovaire.
Tous les acariens présents sur le couvain ont vu leur poids augmenter d'environ
325 g à plus de 400 g durant les 24 h qui ont suivi l'introduction (Fig. 1),
quel que soit le moment de l'introduction. Ce comportement alimentaire indique une
disposition générale des femelles phorétiques de V. jacobsoni à entrer dans la phase
de reproduction. Mais chez tous les acariens phorétiques examinés (n = 18) aucune
coloration au bleu de toluidine n'a été détectée (Tab. I ; Fig. 2a). Ceci confirme les
observations antérieures selon lesquelles l'ovaire des acariens phorétiques est bloqué à
un stade de prévitellogenèse. Pourtant, dans les ovaires des acariens présents sur le
couvain, une coloration bleu clair de l'ovocyte terminal était déjà visible 6 h après
l'introduction artificielle des acariens dans les cellules fraîchement operculées
(n = 41 ; Tab. I ; Fig. 2b). Sur les 10 femelles de V. jacobsoni introduites 14 à 16 h
après l'operculation, nous n'avons trouvé un ovocyte coloré que dans un seul ovaire
(Tab. I), c'est-à-dire que, chez 90 % des acariens de ce groupe, la maturation des
ovocytes n'avait pas commencé.
En conclusion, la reproduction de V. jacobsoni doit être
stimulée par un signal qui n'est présent que dans les cellules fraîchement operculées.
Si les femelles de V. jacobsoni sont introduites dans des cellules operculées depuis 14 h,
la croissance des ovocytes n'est pas du tout démarrée, ce qui indique l'absence de signal
d'activation à ce stade de l'hôte. La nature du signal et les mécanismes de stimulation de
la reproduction de V. jacobsoni restent inconnus. Notre nouvelle méthode offre la
possibilité de déterminer avec précision la croissance des ovocytes dans de grands
échantillons de femelles de V. jacobsoni. C'est donc un outil approprié pour des
études en conditions semi-naturelles de la fertilité de V. jacobsoni dans des
populations qui présentent divers degrés de tolérance à la varroose
ILFA - A Project in Experimental Logic Computation
ILFA provides programs and libraries of reusable software components for logic processing. "ILFA" stands for Inte- grated Logic Functions for Advanced Applications and has its roots in a research project between the german IBM in Heidelberg and the Universities of Duisburg and Paderborn. The implementation by the C programming language supports an efficient work with logic methods in different computer environments. ILFA contains a great number of logic algorithms divided in implementations for important subclasses of logic. Special attention has been considered to visual user interfaces for the ILFA library components, i.e. for using them, programming with them and providing on-line documentation. 1 Introduction According to the rising demand for knowledge--based systems, implementations of logic algorithms has gained growing importance in computer science. Examples are applications like deductive databases, natural language processing, test pattern generators for hardware verificat..