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Rotavirus Rearranged Genomic RNA Segments Are Preferentially Packaged into Viruses Despite Not Conferring Selective Growth Advantage to Viruses
The rotavirus (RV) genome consists of 11 double-stranded RNA segments. Sometimes, partial sequence duplication of an RNA segment leads to a rearranged RNA segment. To specify the impact of rearrangement, the replication efficiencies of human RV with rearranged segments 7, 11 or both were compared to these of the homologous human wild-type RV (wt-RV) and of the bovine wt-RV strain RF. As judged by viral growth curves, rotaviruses with a rearranged genome (r-RV) had no selective growth advantage over the homologous wt-RV. In contrast, r-RV were selected over wt-RV during competitive experiments (i.e mixed infections between r-RV and wt-RV followed by serial passages in cell culture). Moreover, when competitive experiments were performed between a human r-RV and the bovine wt-RV strain RF, which had a clear growth advantage, rearranged segments 7, 11 or both always segregated in viral progenies even when performing mixed infections at an MOI ratio of 1 r-RV to 100 wt-RV. Lastly, bovine reassortant viruses that had inherited a rearranged segment 7 from human r-RV were generated. Although substitution of wt by rearranged segment 7 did not result in any growth advantage, the rearranged segment was selected in the viral progenies resulting from mixed infections by bovine reassortant r-RV and wt-RV, even for an MOI ratio of 1 r-RV to 107 wt-RV. Lack of selective growth advantage of r-RV over wt-RV in cell culture suggests a mechanism of preferential packaging of the rearranged segments over their standard counterparts in the viral progeny
Réarrangements génomiques et génétique inverse des rotavirus
Les rotavirus (RV) sont les principaux agents des gastro-entérites aigües du nourrisson. Leur génome est composé de 11 segments d ARN bicaténaire. Le réarrangement génomique est l un des mécanismes de la variabilité génétique des RV. Cet événement rare consiste en une duplication partielle de la séquence d un segment suite à une recombinaison intra-moléculaire. Les conséquences des réarrangements génomiques sur la capacité réplicative de RV à génome réarrangé n ont été que peu étudiées. Nous avons montré que les segments réarrangés 7 et/ou 11 ne confèrent pas d avantage réplicatif aux RV humains par rapport à leur homologue sauvage. Paradoxalement, les segments réarrangés sont ségrégés préférentiellement dans la descendance virale lors d expériences de compétition entre un RV à génome réarrangé et un RV sauvage. L ensemble de ces résultats suggère que les segments réarrangés 7 et/ou 11 des RV humains sont encapsidés préférentiellement à leur homologue sauvage lors de la réplication virale. Nous avons ensuite développé un système de génétique inverse pour les RV basé sur l utilisation de l encapsidation préférentielle des segments réarrangés. Ce système qui utilise comme exogène un segment réarrangé et comme virus auxiliaire un RV bovin a permis l obtention des RV recombinants ayant intégré un segment 7 réarrangé modifié in vitro, notamment un RV recombinant qui exprime une protéine NSP3 modifiée d un poids moléculaire correspondant au double de celui de la protéine sauvage. Enfin, des expériences complémentaires ont été initiées afin de généraliser le système à d autres segments réarrangés ou à d autres virus auxiliairesPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF
ETUDE D'UN ROTAVIRUS HUMAIN POSSEDANT UN GENE 7 REARRANGE CODANT UNE PROTEINE NSP3 MODIFIEE
PARIS-BIUM (751062103) / SudocCentre Technique Livre Ens. Sup. (774682301) / SudocSudocFranceF
Etude de l'immunité innée anti-rotavirus chez l'homme et vaccination rectale chez la souris fondées sur l'utilisation de pseudo-particules virales
PARIS7-Bibliothèque centrale (751132105) / SudocSudocFranceF
DIAGNOSTIC DES INFECTIONS RESPIRATOIRES A CHLAMYDIA PNEUMONIAE ET MYCOPLASMA PNEUMONIAE PAR PCR DUPLEX (DES BIOL. MED.)
PARIS6-Bibl. St Antoine CHU (751122104) / SudocPARIS-BIUM (751062103) / SudocSudocFranceF
Diversité génétique des erythrovirus humains
CHATENAY M.-PARIS 11-BU Pharma. (920192101) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF
The effect of trypsin on the growth in vitro of adenoviruses present in faeces.
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