TIP47, ein intrazelluläres Apolipoprotein und/oder ein Sortierungsfaktor für Mannose-6-Phoshphat Rezeptoren

TIP47 (tail interacting protein of 47kDa) wurde als Sortierungsfaktor für den retrograden Transport der Mannose-6-Phosphat Rezeptoren und als ein Schlüsseleffektor für die GTPase Rab9 beschrieben (Aivazian et al., 2006; Diaz and Pfeffer, 1998). Diese Funktionen konnten in der vorliegenden Arbeit nicht bestätigt werden. TIP47 konnte nicht an Mannose-6-Phosphat Rezeptoren- und Rab9-positiven Membranen detektiert werden und interagierte weder mit den Rezeptoren noch mit Rab9 in vitro. Des Weiteren hatte die Supprimierung von TIP47 über RNAi weder einen Einfluss auf die Verteilung der Mannose-6-Phosphat Rezeptoren, noch auf die Sortierung lysosomaler Enzyme durch die Rezeptoren. Im Gegensatz dazu konnten wir zeigen, dass andere Sortierungsfaktoren wie der Retromerkomplex (Seaman, 2004) sehr wohl einen Einfluss auf die Verteilung und Funktion der Mannose-6-Phosphat Rezeptoren hat. Daher sprechen unsere Daten gegen die Funktion von TIP47 als Sortierungsfaktor für Mannose-6-Phosphat Rezeptoren. TIP47 wurde nicht nur als Sortierungsfaktor beschrieben, sondern auch als ein an Lipid droplet bindendes Protein mit noch unbekannter Funktion (Wolins et al., 2001). Diese Lokalisierung konnten wir bestätigen und ferner zeigen, dass die Supprimierung von TIP47 die Lipid droplet Biogenese beeinträchtigt und den Einbau von Triacylglycerin in Lipid droplets reduziert. Des Weiteren konnten wir zeigen, dass TIP47 eine apolipoprotein-ähnliche Funktion besitzt, indem es Liposomen in vitro reorganisieren kann. Damit liegen zum erstenmal Daten zur möglichen Funktion von TIP47 vor, die darauf hindeuten, dass die lipidorganisierenden Eigenschaften von TIP47 für die Biosynthese von Lipid droplets von Bedeutung sind

TIP47 functions in the biogenesis of lipid droplets

TIP47 (tail-interacting protein of 47 kD) was characterized as a cargo selection device for mannose 6-phosphate receptors (MPRs), directing their transport from endosomes to the trans-Golgi network. In contrast, our current analysis shows that cytosolic TIP47 is not recruited to organelles of the biosynthetic and endocytic pathways. Knockdown of TIP47 expression had no effect on MPR distribution or trafficking and did not affect lysosomal enzyme sorting. Therefore, our data argue against a function of TIP47 as a sorting device. Instead, TIP47 is recruited to lipid droplets (LDs) by an amino-terminal sequence comprising 11-mer repeats. We show that TIP47 has apolipoprotein-like properties and reorganizes liposomes into small lipid discs. Suppression of TIP47 blocked LD maturation and decreased the incorporation of triacylglycerol into LDs. We conclude that TIP47 functions in the biogenesis of LDs

Hypoxia-inducible protein 2 is a novel lipid droplet protein and a specific target gene of hypoxia-inducible factor-1

Hypoxia-inducible protein 2 (HIG2) has been implicated in canonical Wnt signaling, both as target and activator. The potential link between hypoxia and an oncogenic signaling pathway might play a pivotal role in renal clear-cell carcinoma characterized by constitutive activation of hypoxia-inducible factors (HIFs), and hence prompted us to analyze HIG2 regulation and function in detail. HIG2 was up-regulated by hypoxia and HIF inducers in all cell types and mouse organs investigated and abundantly expressed in renal clear-cell carcinomas. Promoter analyses, gel shifts, and siRNA studies revealed that HIG2 is a direct and specific target of HIF-1, but not responsive to HIF-2. Surprisingly, HIG2 was not secreted, and HIG2 overexpression neither stimulated proliferation nor activated Wnt signaling. Instead, we show that HIG2 decorates the hemimembrane of lipid droplets, whose number and size increase on hypoxic inhibition of fatty acid beta-oxidation, and colocalizes with the lipid droplet proteins adipophilin and TIP47. Normoxic overexpression of HIG2 was sufficient to increase neutral lipid deposition in HeLa cells and stimulated cytokine expression. HIG2 could be detected in atherosclerotic arteries and fatty liver disease, suggesting that this ubiquitously inducible HIF-1 target gene may play an important functional role in diseases associated with pathological lipid accumulation.-Gimm, T., Wiese, M., Teschemacher, B., Deggerich, A., Schodel, J., Knaup, K. X., Hackenbeck, T., Hellerbrand, C., Amann, K., Wiesener, M. S., Honing, S., Eckardt, K.-U., Warnecke, C. Hypoxia-inducible protein 2 is a novel lipid droplet protein and a specific target gene of hypoxia-inducible factor-1. FASEB J. 24, 4443-4458 (2010). www.fasebj.or