Toxoplasma gondii: II. Tachyzoite antigenic characterization of eigth strains

Oito amostras de T. gondii - LIV IV, LIV V e S 11 isoladas de suínos, RH e VPS de seres humanos, AS 28 de camundongo, HV III de cão e CN de gato - foram analisadas com o objetivo de verificar a existência de possíveis diferenças na resposta imune quando inoculadas em coelhos. Através da técnica de ELISA, não foram constatadas diferenças entre as oito amostras estudadas. Todas as amostras reagiram de forma semelhante com soros homólogos e heterólogos. A suspensão antigênica, constituída de extrato celular total, mostrou-se eficiente no ELISA teste indireto, já que os soros positivos reagiram fortemente e os soros negativos não apresentaram reação contra os antígenos testados. A análise das amostras, pela técnica de Western blot, revelou que os isolados de T. gondii compartilham vários antígenos com algumas variações. Dentre as bandas reconhecidas no Western blot, três foram comuns a todas as amostras: a p33 (33-37 kDa), p54 (52-55 kDa) e a p66 (66 kDa). A amostra HV III, isolada recentemente de um cão, foi a que mais diferiu no perfil antigênico. Essa amostra não apresentou três antígenos (50, 70 e 75 kDa) presentes nas demais amostras. Apenas dois antígenos, um de 62 kDa da CN e outro de 67 kDa da LIV IV, foram amostra-específicos.Eight Toxoplasma gondii strains were analyzed using ELISA and Western blot techniques, in order to demonstrate possible immunological differences. The analyzed strains were: LIV IV, LIV V and S 11 isolated from swine, RH and VPS from a human being, AS 28 from a wild mouse, HV III from a dog and CN from a cat. With the ELISA assay the eight strains showed similar reactivity with homologous and heterologous sera. The antigenic suspension, consisting of total cellular extract of tachyzoites, was effective in the indirect ELISA assay, with the positive sera reacting strongly and the negative not reacting with the antigens. The Western blot analysis showed that the T. gondii strains have similar antigenic profiles with a few variations. Three bands were observed in all strains: one of about 33 kDa (p33), another of 54 kDa (p54) and a third one of 66 kDa (p66). The HV III strain, isolated from a dog, did not show three antigens (50, 70 and 75 kDa) that were present in the others. However, this difference was not detected by the ELISA assay. Only two antigens (62 kDa of the CN and 67 kDa of the LIV IV) were strain-specific antigens