Zebrafish as an Experimental Model for the Study of Obesity

Obesity is considered a silent global pandemic, with a steady increase in adults and children. It is a complex disease that involves the interaction of genetic and environmental factors and predisposes individuals to severe chronic complications such as various types of cancer, dyslipidemia, hyperglycemia, hypercholesterolemia, nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD), and nonalcoholic steatohepatitis. To help elucidate the physiological mechanisms of this comorbidity in order to identify and develop effective treatments, the use of animal models is indispensable. Zebrafish is emerging as an important model for studying obesity and related metabolic diseases. In addition to being a small animal, with high genetic similarity when compared to humans and easy to handle, zebrafish also has the main well-conserved metabolism-related functions such as appetite regulation, insulin regulation, and lipid storage. Zebrafish is also suitable for the identification of new targets associated with the risk and treatment of obesity in humans. In this review, we highlight the studies that use zebrafish to study metabolic diseases demonstrating their important contribution in this area of research

Morfometria das lâminas epidérmicas primárias e secundárias do casco de equinos

Foi estudado o comprimento das lâminas epidérmicas primárias e secundárias da pinça e dos quartos lateral e medial, distribuídas nos terços proximal, médio e distal dos cascos de equinos. Utilizaram-se os membros de oitos cavalos adultos utilizados para tração de carroças, que não apresentavam afecções podais, sendo quatro fêmeas e quatro machos, sem raça definida. Fragmentos foram retirados das diferentes regiões dos cascos e submetidos à técnica histológica convencional. As amostras foram coradas com H&E e analisadas em microscópio óptico. As lâminas epidérmicas primárias apresentaram-se maiores nos cascos dos membros torácicos em relação aos membros pélvicos nos terços proximal e médio e nas regiões do quarto medial e na pinça. As lâminas secundárias foram maiores também no membro torácico no terço médio e no quarto medial. Comparando-se o comprimento das lâminas epidérmicas entre as regiões do casco, observou-se que as lâminas primárias são menores no terço proximal e maiores na pinça, enquanto as menores lâminas secundárias estão no terço proximal e no quarto medial. Os resultados sugerem que a morfologia das lâminas nas diversas regiões do casco sofra influência do trabalho realizado pelo animal, assim como, das diferentes distribuições de força existentes no mesmo.We studied the length of primary and secondary epidermal laminae of the toe and the lateral and medial quarters of horses, distributed into proximal, middle and distal thirds of the hooves. Eight limbs from adult crossbred horses, four females and four males, used to pull carts without pedal conditions. Fragments were taken from different regions of the hooves and subjected to conventional histological techniques. The samples were stained with hematoxylin-eosin and analyzed by light microscopy. The primary epidermal laminae were higher in the hooves of forelimbs compared to hindlimbs in the proximal and middle thirds and the regions of the medial quarter and toe. The secondary laminae were higher in forelimb of the middle third and medial quarter. Comparing the length of the epidermal laminae between hoof parts, it was seen that the primary laminae are lower in the proximal third and higher in the toe, while the secondary laminae are lower in the proximal third and medial quarter. The results suggested that the morphology of the laminae in the different regions of the hooves is influenced through the work performed by the animal, as well as through the different distribution of forces

Densidade das lâminas epidérmicas primárias e secundárias nos cascos de equinos

Diferenças na morfologia microscópica dos cascos dos membros pélvicos e torácicos dos equinos têm sido pouco relatadas na literatura, principalmente no tocante a distribuição de lâminas epidérmicas primárias e secundárias nas diversas regiões. O propósito deste estudo foi quantificar a densidade de lâminas epidérmicas primárias e secundárias no casco de equinos. Foram utilizados membros torácicos e pélvicos de oito equinos adultos e sem raça definida. Em uma secção transversal de aproximadamente 0,5cm de altura da sola dos cascos foi quantificada a densidade das lâminas epidérmicas primárias tanto na região da pinça quanto dos quartos lateral e medial. Fragmentos com aproximadamente 1cm³ foram retirados dos terços proximal, médio e distal do casco, nas diferentes regiões e submetidos a técnica histológica convencional, a densidade de lâminas epidérmicas secundárias foi quantificada com auxilio de microscópio óptico. Os dados foram analisados estatisticamente em relação aos membros torácicos e pélvicos e entre suas diversas regiões. A densidade de lâminas epidérmicas primárias varia ao redor da circunferência do casco, sendo maior na região da pinça do casco e diminui gradualmente em direção ao bulbo do casco, não existindo diferença entre membros pélvicos e torácicos. A densidade média de lâminas epidérmicas secundárias por lâmina epidérmica primária não varia em torno da circunferência dos cascos, assim como, quando comparada entre os membros torácicos e pélvicos. A variação da densidade das lâminas epidérmicas primárias em torno do casco parece fazer parte de uma resposta adaptativa às diferentes tensões existentes em cada região. O melhor entendimento da morfologia das estruturas do casco contribui na melhor compreensão do diagnóstico, fisiopatologia e tratamento das afecções que as acometem.Differences in the microscopic morphology of the hoof in forelimbs and hindlimbs of horses have been scarcely reported in the literature, especially concerning the distribution of primary and secondary epidermal laminae in the different regions. This study aimed to determine the density of primary and secondary epidermal laminae in the hoof of horses. For this, it was used fore and hindlimbs of 16 adult mixed breed horses. With a cross section 0.5 cm above the sole, it was quantified the primary epidermal laminae in the regions of the toe, and of lateral and medial quarters. Fragments with about 1cm ³ were taken from the proximal, middle and distal thirds of the hooves, in the different regions, subjected to conventional histological techniques and examined with an optical microscope. Data were statistically analyzed in relation to the fore and hindlimbs and between their various regions. The density of primary epidermal laminae varied around the hoof circumference, with greater values in the hoof toe, which gradually decreased towards the bulb of the hoof, without difference between thoracic and pelvic limbs. The average density of the secondary epidermal laminae per primary epidermal lamina does not change around the circumference of the hoof. Our findings indicated that the density of epidermal laminae is not different between fore and hindlimbs. The variation in the density of primary epidermal laminae around the hoof seems to be part of an adaptive response to different stresses in each region. A better understanding of the structural morphology contributes to a better understanding of the diagnosis, pathophysiology, and treatment of disorders that affect the hoof

Quantification of connective tissue in cardiac muscle from horses used for traction using histochemical and morphometric techniques

Os cardiomiócitos são sustentados e inseridos em um esqueleto de tecido conjuntivo, este possui distribuição desigual de acordo com as propriedades das distintas regiões em que se encontra. O propósito deste estudo foi quantificar a proporção de tecido conjuntivo em relação à disposição de cardiomiócitos dos ventrículos direito e esquerdo e no septo interventricular do miocárdio de seis equinos subnutridos, adultos, sendo quatro machos e duas fêmeas, sem raça definida e utilizados para tração. Com auxílio de paquímetro eletrônico digital, avaliou-se a altura do ventrículo esquerdo, a largura do coração, assim como sua circunferência, as espessuras das paredes livres dos ventrículos e do septo interventricular. Os fragmentos relativos ao terço médio do septo interventricular e das paredes livres dos ventrículos foram submetidos à técnica histológica convencional. Os blocos foram cortados com espessura de 5μm e corados com Picrosirius Red, Tricromo de Gomori e Tricromo de Azan para evidenciação do tecido conjuntivo. As lâminas foram analisadas com uso do microscópio óptico digital acoplado ao programa de análise de imagens Image-Pro Plus®. A proporção média de tecido conjuntivo no ventrículo esquerdo foi de 6,1+3,7%, no septo interventricular foi obtida a média de 6,8+3,6% e no ventrículo direito a média foi de 6,1+3,1%. Ao aplicarmos teste H de Kruskal-Wallis, verificamos que ocorreu diferença estatística entre os diferentes corantes utilizados em relação às regiões avaliadas. No teste de correlação de Pearson, não foi encontrado padrão de correlação entre a espessura das regiões analisadas e a proporção de tecido conjuntivo.The purpose of this study was to quantify the proportion of connective tissue in relation to the arrangement of cardiomyocytes of left and right ventricles and interventricular septum in myocardium of six mixed breed, ill trifted adult horses, of both sexes, used for traction. With hearts still fresh and with the aid of a digital caliper, it was estimated the height of left ventricle, the heart’s width, the heart’s circumference and the thickness of the ventricular free walls and interventricular septum. The fragments on the middle third of the interventricular septum and free walls of the ventricles were subjected to conventional histological technique. The blocks were cut with thickness of 5μm and stained with Picrosirius Red, Gomori Trichrome and Azan Trichrome to show the connective tissue. The slides were analyzed using optical microscope coupled to a digital analysis program Image-Pro Plus®. The average proportion of connective tissue in the left ventricle was 6.1+3.7%, in the interventricular septum and it was observed a mean of 6.8+3.6%. In the right ventricle the average was 6.0+3.0%. Applying the H test of Kruskal-Wallis, it was found that there was statistical difference between the different dyes used for each region. In the Pearson correlation test it was not found pattern correlation between the thickness of the regions analyzed and the proportion of connective tissue

Microstructure and morphoquantitative study of pineal gland in santa ines sheep

O presente estudo avaliou os aspectos morfoquantitativos e qualitativos da glândula pineal em fêmeas de ovinos da raça Santa Inês em atividade reprodutiva e anestro fisiológico. Foram utilizados sete ovinos, fêmeas e adultas, coletados em frigoríficos da região de Brasília-DF. Estes não apresentavam sinais clínicos relacionados a afecções do sistema nervoso. Os encéfalos foram retirados e suas dimensões mensuradas. Posteriormente foram seccionados para expor a glândula pineal e mensurar suas dimensões. Os fragmentos do diencéfalo, contendo a glândula pineal, foram submersos em solução aquosa a 20% de formaldeído e posteriormente submetidos a técnicas histológicas convencionais. Para a avaliação morfoquantitativa desta glândula, foram empregadas as colorações Hematoxilia-Eosina, Azul de Toluidina e Tricrômio de Gomori. O encéfalo teve um comprimento médio de 67,25 ± 1,75 mm e a largura média de 58,97 ± 4,0 mm. Já a glândula pineal apresentou o comprimento médio de 6,98 ± 0,79 mm e a largura média de 6,40 ± 1,35 mm. Diante da análise microscópica, foi obtida uma média de 86,27 ± 30,44 pinealócitos por campo. Ao ser aplicado o teste de correlação de Pearson, o número de pinealócitos apresentou fraca correlação linear negativa (r = -0,11) em relação ao comprimento da glândula pineal e uma fraca correlação linear positiva (r = 0,39) em relação à largura da mesma. Portanto o número de pinealócitos apresenta uma maior correlação com a largura da glândula do que com o seu comprimento. Mastócitos estiveram presentes em apenas um animal (14,28%) e as concreções calcareas foram observadas em dois animais (28,57%). A glândula se mostrou envolta por uma cápsula de tecido conjuntivo com ausência de projeções para o parênquima. _________________________________________________________________________________ ABSTRACTThis study examined morphologic aspects of the pineal gland in Santa Ines sheep in anoestrus physiological and reproductive activity. Seven female adult sheep were collected at slaughterhouses in the region of Brasilia-DF, with no clinical signs related to diseases of the nervous system were used. The brains were removed and their dimensions were measured. The brains were sectioned to expose and measure the pineal gland. The fragments of the diencephalon containing the pineal gland were immersed in 20% formaldehyde solution. Subsequently, the fragments were submitted to conventional histological techniques. The Hematoxylin-eosin, Toluidine blue and Gomori trichrome staining were used for a morphoquantitative analysis. The brain had an average length of 67.25 ± 1.75 mm and average width of 58.97 ± 4.0 mm. The pineal gland had an average length of 6.98 ± 0.79 mm and average width of 6.40 ± 1.35 mm. The quantitative analysis showed an average 86.27 ± 30.44 of pinealocytes per field. According to the Pearson correlation test, the number of pinealocytes showed a weak negative linear correlation (r = -0.11) with the length of the pineal gland and a weak positive linear correlation (r = 0.39) with the width. Therefore, the number of pinealocytes has a stronger correlation with the width of the gland compared to the length. Mastocytes were present in only one animal (14.28%). Calcareous concretions were observed in two animals (28.57%). The connective tissue formed the capsule surrounding the gland with no projections into the parenchyma

Descrição morfoquantitativa do tórus digital de bovinos

O tórus digital é caracterizado como um tecido subcutâneo modificado que atua na absorção do impacto durante a locomoção, auxilia o retorno venoso do casco e mantêm o suporte de uma considerável parte do peso corporal. Os tórus possuem particular importância nas patogêneses de casco, já que eles precisam trabalhar corretamente para prevenir compressões e traumas nos tecidos moles. Assim, o objetivo deste estudo foi quantificar e com isso determinar, como se arranjam estas estruturas, para tanto, foram estabelecidas as proporções dos tecidos conjuntivo, adiposo, vascular e ainda das fibras colágenas e dos tipos de colágenos encontrados nos tórus digitais palmares e plantares de bovinos. Foram utilizados membros torácicos e pélvicos de doze bovinos zebuínos adultos, de ambos os sexos, sendo onze machos e uma fêmea, com peso médio de carcaça com 269kg e sem afecções nos membros. Os fragmentos dos tórus foram submetidos à técnica histológica convencional, cortados em espessura de 4µm e corados com Picrosirius Red. Com o uso de microscópio óptico digital, o tecido conjuntivo e a diferenciação dos tipos de colágeno foram quantificados empregando-se o programa de análise de imagem Image Pro Plus® e para a quantificação dos tecidos adiposo e vascular foi utilizada o sistema teste de pontos. Através do programa GraphPad Prism 5.0 foram obtidas por meio de uma analise descritiva a media e o erro padrão da media, em seguida os dados foram submetidos à aplicação do teste de normalidade de Kolmogorov-Smirnov e ao teste "T" Student com nível de significância de 5% para a determinação da quantidade encontrada dos diferentes tecidos entre os membros torácicos e pélvicos dos animais estudados. Nos membros torácicos a média e o erro padrão da proporção de tecido conjuntivo foi de 50,10%+1,54, a de tecido adiposo foi de 21,34%+1,44 e a de tecido vascular foi de 3,43%+0,28. Os membros pélvicos apresentaram uma proporção de tecido conjuntivo de 61,61%+1,47, de tecido adiposo de 20,66%+1,53 e de tecido vascular de 3,06%+0,20. Verificou-se diferença estatística na proporção de tecido conjuntivo entre membros torácicos e pélvicos (p<0,001). As fibras colágenas tipo I e III apresentaram, respectivamente, uma proporção de 31,89% e 3,9% nos membros torácicos e 34,05% e 1,78% nos membros pélvicos. Os tórus digitais, de acordo com a metodologia utilizada, apresentaram diferenciação evidente em relação ao tecido adiposo entre membros torácicos e pélvicos.The digital cushion is characterized as a modified subcutaneous tissue that absorbs the shock during gait, assists venous return of the hoof and supports a considerable part of body weight. Digital cushions have particular importance in the pathogenesis of the hoof, since they need to properly work in order to prevent compression and traumas in soft tissues. This study aimed to measure and determine how is the arrangement of these structures, and for this it was established the proportions of connective, adipose, vascular tissues and collagen fibers and collagen types found in palmar and plantar digital cushion of bovine using fore and hindlimbs of twelve adult zebu cattle of both sexes, 11 male and one female, with 269kg average carcass weight and without limb disorders. Fragments of cushions were subjected to conventional histology, cut to a thickness of 4µm and stained with Red Picrosirius. With digital optical microscope, the quantification of the connective tissue and differentiation of types of collagen used the Image Pro Plus® software, and of adipose and vascular tissue, the test point system. The mean and standard error were estimated with the GraphPad Prism 5.0 software, and then data were subjected to Kolmogorov-Smirnov normality test and Student's t-test with significance level set at 5% for determining the amount of different tissues between fore and hindlimbs of studied animals. In forelimbs the mean and standard error of the connective tissue proportion was 50.10%+1.54, of the adipose tissue was 21.34%+1.44, and of vascular tissue was 3.43%+0.28. Hindlimbs presented a proportion of connective tissue of 61.61%+1.47, 20.66%+1.53 of adipose tissue, and 3.06%+0.20 of vascular tissue. A significant difference (p<0.001) was detected in the connective tissue proportion between fore and hindlimbs. Types I and II collagen fibers have presented, respectively, a proportion of 31.89% and 3.9% in forelimbs and 34.05% and 1.78% in hindlimbs. According to the used methodology, digital cushions had a clear differentiation relative to adipose tissue between fore and hindlimbs

Parâmetros clínicos e hemogasométricos de equinos durante prova de vaquejada

As análises clínica e complementar são boas alternativas para avaliar a demanda fisiológica de equinos atletas. O objetivo deste estudo foi avaliar se a variação do esforço entre os três dias de competição de vaquejada refletiu em alterações clínicas e hemogasométricas. Durante a competição foram realizados oito sprints no primeiro dia (D1), oito no segundo (D2) e três no ultimo (D3). Dez equinos foram avaliados através de aferição das frequências cardíaca, frequência respiratória e coleta de amostra de sangue para uso em analisador químico portátil. Foi determinado o potencial hidrogênionico (pH), pressão de dióxido de carbono (pCO2), bicarbonato (HCO3-) e concentração de base titulável (cBASE). As avaliações foram realizadas em repouso de pelo menos vinte horas, antes do exercício (D0), considerado como parâmetro de controle, e até três minutos após cada sprint. Os parâmetros clínicos aumentaram em D1, D2 e D3, quando comparados a D0, o que demonstrou a maior demanda de substrato e oxigênio para as células. A avaliação hemogasométrica demonstrou redução de todas as variáveis, mais acentuada entre D1 e D2. Em D3, verificou-se menor alteração de todos os parâmetros clínicos e hemogasométricos em comparação a D0. Foi possível concluir que a variação de esforço entre os dias de competição influenciou os parâmetros clínicos e hemogasométricos, demonstrando resposta fisiológica adequada. Os dados foram apresentados como média e erro padrão da média (mean ± SEM) obtidos nos diferentes dias. A normalidade foi comprovada pelo teste de Kolmogorov-Sminov e dados foram comparados através do teste one-way ANOVA, seguido pelo pós-teste de Holm-Sidak (GraphPad Prism 6.02 for Windows, GraphPad Software, San Diego, CA, USA). Foi considerado p≤0.05, como estatisticamente significativo.Clinical and complementary analysis are good alternatives to evaluate physiological demand in performance horses. The aim of this study was to assess whether the physical effort variation of the three-day Vaquejada competition (a Brazilian form of bullfighting) reflected in clinical and blood gasometric changes. During the competition eight sprints have been performed on the first day (D1), eight on the second (D2) and three on the last one (D3). Ten horses were evaluated by checking heart and respiratory rates and collecting blood samples for use in portable chemistry analyzer. Through that, it was assessed potential of hydrogen ion (pH), carbon dioxide pressure (pCO2), bicarbonate (HCO3-) and titratable base concentration (cBase). Evaluations were carried with resting of at least twenty hours, before physical activity (D0), as control parameter, and up to thirty minutes after each sprint. Clinical parameters have increased on D1, D2 and D3, when compared to D0, which demonstrated the increased demand for substrate and oxygen to the cells.. Blood gasometric trial showed reductions of all variables, most marked between D1 and D2. It was verified less alteration of all clinical and blood gasometric parameters in D3 against D0. We concluded that the change effort between days of competition influenced the clinical and blood gas parameters, demonstrating appropriate physiological response. The data were presented as mean and standard error of the mean (mean ± SEM) obtained in different days. Normality was confirmed by the Kolmogorov-Sminov test and data were compared by one-way ANOVA, followed by post-test Holm-Sidak (GraphPad Prism 2.6 for Windows, GraphPad Software, San Diego, CA, USA). P≤0.05 was considered as statistically significant

Hemogasometria venosa de equinos finalistas de provas de enduro de 90 km

Diante do exercício, os sistemas orgânicos podem sofrer desequilíbrios hidroeletrolíticos e ácido-base, especialmente em se tratando dos gases sanguíneos, demonstrando variações decorrentes de diferentes causas, sejam elas respiratórias e ou metabólicas. O entendimento das adaptações fisiológicas que ocorrem em resposta ao exercício é de fundamental importância na busca do ótimo desempenho. Desta forma buscou-se mensurar os gases sanguíneos venosos (pO2, pCO2), bem como, a saturação de oxigênio (SatO2) em equinos saudáveis, Puro Sangue Árabe finalistas de competições de enduro de 90 km. Foram avaliados 14 equinos Puro Sangue Árabe (PSA), nove machos e cinco fêmeas, com seis a 12 anos de idade, finalistas em provas de enduro de 90 km. Houve redução significativa da pO2, pCO2 e SatO2 após o exercício, entretanto os valores se mantiveram dentro da normalidade, não alterando o desempenho atlético dos animais, indicando alterações transitória e caracterizando um caráter de resposta fisiológica ao exercício realizado. Os equinos, finalistas em provas de 90 Km, demonstraram processo ventilatório eficiente, sem quaisquer alterações no desempenho atlético e portanto estando adaptados ao tipo de exercício imposto.Front of exercise, the organic systems may suffer water-electrolyte and acid-base imbalances, particularly in the case of blood gases, demonstrating variations from different causes, whether respiratory and/or metabolic. Understanding the physiological adaptations to exercise is essential in the search for the optimum performance. In this way, this study measured the venous blood gases (pO2, pCO2), as well as the oxygen saturation (SatO2) in healthy equines, Arabian horses finalists in 90km endurance races. A total of fourteen Arabian horses were evaluated, nine males and five females, between six and 12 years old, finalists in 90km endurance races. There was a significant reduction in pO2, pCO2 and SatO2 after the exercise, however, the values remained within the normality range, and did not change the athletic performance of the animals, indicating a temporary alteration, assuming thus a character of physiological response to the exercise performed. The equines, finalists in 90 Km endurance races, demonstrated efficient ventilatory process, without any alterations in the athletic performance, being adapted to the type of exercise imposed