A imunoistoquímica como fator prognóstico em tumores de Wilms

Resumo: O nefroblastoma, ou tumor de Wilms, é a neoplasia renal mais freqüente na infância e corresponde a 98% dos tumores renais nesta faixa etária. Embora o prognóstico seja favorável para a maioria dos pacientes muitos evoluem para recidiva ou óbito. A caracterização de grupos de risco através de biomarcadores tem por objetivo adequar o tratamento ao grupo de risco e reduzir recidivas e óbitos. Entre os marcadores estão o WT1, p53, BCL-2, BAX e VEGFR1, relacionados a via apoptótica, reparo do DNA e neovascularização. A quiescina/sulfidril oxidase (QSOX1) parece participar da formação da matriz xtracelular e da via apoptótica. O objetivo deste estudo é avaliar a expressão imunoistoquímica da QSOX1 em amostras de nefroblastoma humano correlacioná-la a fatores prognósticos clínicopatológicos e demais marcadores imunoistoquímicos (WT1, p53, BCL-2, BAX e VEGFR1). Foram utilizadas 29 amostras de nefroblastomas, retiradas dos Serviços de Anatomia Patológica do Hospital Infantil Pequeno Príncipe e Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná, com diagnósticos entre 1994 a 2007. Através da técnica de imunoistoquímica com as amostra em tissue microarray realizou-se análise comparativa entre a expressão imunoistoquímica destes marcadores e fatores prognósticos línico-patológicos. Quanto ao estadiamento a amostra é composta por 8 pacientes estadio I, 4 estadio II, 10 estadio III e 7 estadio IV. Anaplasia foi observada em 2 casos (6,9%). Em relação à evolução clínica, 5 pac entes foram a óbito (14,2%), 2 doentes apresentaram recidiva (6,9%), enquanto a maioria, 22 crianças (75,86%), apresentou-se livre de doença. Quanto ao risco, 4 eram de alto risco e 25 de risco intermediário. Com relação à expressão imunoistoquímica da QSOX1, não foram encontradas correlações significativas. Houve associação da expressão imunoistoquímica média de BCL-2 com a evolução clínica, sendo sua maior positividade encontrada no grupo livre de doença. Observamos, em relação ao BAX, tendência a associação a maior ositividade no grupo de estadio I. A expressão imunoistoquímica média e isolada de VEGFR1 nos componentes blastematoso e epitelial se associaram ao grupo de risco. Deste modo, a QSOX1 não se mostrou um bom marcador para discriminar grupos prognósticos. O BCL-2 foi capaz de separar grupos com evoluções clínicas diferentes, sendo mais expresso no grupo livre de doença. O BAX apresentou uma tendência para discriminar grupos com estadios diferentes, sendo mais expressa no estadio inicial e o VEGFR1 se mostrou útil em se associar ao grupo de risco

Expressão imunoistoquímica de ácido retinóico, CRABP2, NFkB p100 e p105, TRAP1 e TWEAK em nefroblastomas

Orientadora : Drª Lúcia de NoronhaTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciencias Biológicas (Microbiologia, Parasitologia e Patologia Básica). Defesa: Curitiba, 30/06/2017Inclui referências : f.89-104Resumo: O nefroblastoma, ou tumor de Wilms, é a neoplasia renal mais freqüente na infância correspondendo a 98% dos tumores renais nesta faixa etária. Apesar do prognóstico favorável uma parcela dos pacientes evolui para recidiva e óbito. Biomarcadores atuantes na progressão tumoral, proliferação, diferenciação, apoptose e recentemente descrita ação na resposta imune e inflamação, tais como ácido retinóico (AR), CRABP2, NF?B p100/52, NF?B p105/50, TRAP1 e TWEAK tem sido descritos. Este estudo tem por objetivo a avaliação da expressão imunoistoquímica de ácido retinóico (AR), CRABP2, NF?B p100/52, NF?B p105/50, TRAP1 e TWEAK em amostras parafinadas de nefroblastomas correlacionando-a com fatores prognósticos. Foram selecionados 77 espécimes de nefroblastoma provenientes de serviços de patologia. A imunoexpressão foi avaliada através de análise semiquantitativa e quantitativa. Para a análise semiquantitativa empregou-se o sistema escore de Allred e para a avaliação quantitativa, a análise morfométrica da área corada. Para a comparação de dois grupos foi utilizado o teste não-paramétrico de Mann-Whitney, enquanto para a comparação de três ou mais grupos utilizou-se o teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis. A imunopositividade para AR, CRABP2, NF?B p100/52 e NF?B p105/50 foi encontrada tanto no núcleo quanto citoplasma. A imunoexpressão de TRAP1 e TWEAK esteve presente apenas no citoplasma das células cancerosas. Todos os tipos histológicos do nefroblastoma (blastema, epitélio e estroma) foram positivos para as seis proteínas estudadas. AR pela análise morfométrica e CRABP2 pela análise semiquantitativa apresentaram maior expressão imunoistoquímica nos pacientes com metástase (p= 0.0247 e p= 0.0128, respectivamente). Semelhante ao encontrado em relação à análise quantitativa de AR que apresentou maior imunopositividade em amostras tumorais submetidas a quimioterapia pré-cirúrgica (p= 0.0330). Observou-se a maior expressão de NF?B p105/50 em nefroblastomas em estádio I/II (p= 0.0415). NF?B p105/50 e TRAP1 através da análise semiquantitativa e TWEAK de acordo com análise quantitativa, apresentaram menor positividade em nefroblastomas tipo blastematoso (p= 0.046, p= 0.003 e p= 0.066, respectivamente). A anaplasia se associou a maior escore total de Allred de TRAP1 (p= 0.005). Não houve correlação estatística da imunoexpressão dos marcadores estudados, comprometimento nodal e evolução clínica. A análise semiquantitativa e quantitativa dos marcadores AR, CRABP2, NF?B p105/p50, TRAP1 e TWEAK apontam para potenciais biomarcadores para progressão tumoral e para a participação destas proteínas na tumorigênese do nefroblastoma. Palavras-chave: nefroblastoma; ácido retinóico; CRABP2; NF?B; TRAP1; TWEAK.Abstract: Nephroblastoma, or Wilms' tumor, is the commonest renal cancer in children and accounts for about 98% of renal tumors in this age group. Despite of the favorable prognosis, a parcel of patients evolved to tumor relapse and death. Biomarkers acts in tumor progression, proliferation, differentiation, apoptosis and the most recent described immune and inflammation response action, as retinoic acid (RA), CRABP2, NF?B p100/52, NF?B p105/50, TRAP1 and TWEAK. The aim of this study was to evaluate the immunohistochemical expression of RA, CRABP2, NF?B p100/52, NF?B p105/50, TRAP1 and TWEAK in paraffin-embedded samples of nephroblastomas to determine whether expression correlates with prognostic factors. A total of 77 specimens from pathology services were selected. The immunoexpression was evaluated through semiquantitative and quantitative analysis. For the semiquantitative analysis, the Allred score system was used and for the quantitative evaluation, the morphometric analysis of the stained area was applied. For the comparison of two groups, the non-parametric test of Mann-Whitney was used, while for the comparison of three or more groups the Kruskal-Wallis nonparametric test was used. Immunopositivity to RA, CRABP2, NF?B p100/52 and NF?B p105/50 was found in the nucleus and cytoplasm. Immunoexpression of TRAP1 and TWEAK was present only in the cytoplasm of cancer cells. All histological types of nephroblastoma (blastema, epithelium and stroma) were positive for the six proteins studied. RA morphometric analysis and CRABP2 semiquantitative analysis presented higher immunohistochemical expression in patients with metastasis (p= 0.0247 and p= 0.0128, respectively). This is similar to the results of the quantitative analysis of RA, which showed greater immunopositivity in tumor samples of patients subjected to pre-surgical chemotherapy (p= 0.0330). The highest expression of NF?B p105/50 was observed in stage I/II nephroblastomas (p= 0.0415). NF?B p105/50 and TRAP1 semiquantitative analisys and TWEAK quantitative analisys presented lower positivity in nephroblastomas blastematal type (p= 0.046, p= 0.003 and p= 0.066, respectively). Anaplasia were associated with high TRAP1 total Allred score (P= 0.005). No significant correlation was found between the markers and variables studied, such as nodal involvement, and clinical evolution. The semiquantitative and quantitative analysis of RA, CRABP2, NF?B p100/p52, NF?B p105/p50, TRAP1 and TWEAK point to potential biomarkers for tumor progression and for the participation of these proteins in nephroblastoma tumorigenesis. Key words: nephroblastoma; retinoic acid; CRABP2; NF?B; TRAP1; TWEAK

Immunohistochemical expression of p53, BCL-2, BAX and VEGFR1 proteins in nephroblastomas A expressão imuno-histoquímica das proteínas p53, BCL-2, BAX e VEGFR1 em nefroblastomas

INTRODUCTION: Nephroblastoma or Wilms' tumor is the most frequent renal cancer in children. Although its prognosis is favorable for most patients, it may relapse or have a fatal outcome. The characterization of risk groups by applying immunohistochemical biomarkers aims to adapt the treatment to its corresponding group as well as to reduce relapses and fatal outcome. p53, B-cell lymphoma 2 (BCL-2), BCL-2 associated protein X (BAX) and vascular endothelial growth factor receptor 1 (VEGFR1) are among the most widely studied biomarkers, which are related to the apoptotic pathway, DNA repair and neovascularization. OBJECTIVE: The objective of this study is to assess the immunohistochemical expression of p53, BCL-2, BAX and VEGFR1 in samples of human nephroblastoma and to correlate them with clinicopathological prognostic factors. MATERIAL AND METHODS: Twenty-nine surgical specimens of nephroblastoma diagnosed from 1994 to 2007 were selected from the Anatomopathological Service of two hospitals in Curitiba. The immunohistochemical analysis of tissue microarrays was performed through immunoperoxidase staining and the yielded results were compared with clinicopathological prognostic factors. RESULTS: The major immunohistochemical expression of VEGFR1 in blastema and epithelium presented positive association with the risk group. Hence this may be related to higher vascular neoplastic invasion apparently caused by the endothelial growth factor, which maximizes the chances of metastasis and ultimately changes tumor staging, risk group and clinical evolution. CONCLUSIONS: The immunohistochemical expression of VEGFR1 substantiated a directly proportional association with the nephroblastoma risk group.<br>INTRODUÇÃO: O nefroblastoma, ou tumor de Wilms, é a neoplasia renal mais frequente na infância. Embora o prognóstico seja favorável para a maioria dos pacientes, muitos evoluem para recidiva ou óbito. A caracterização de grupos de risco por meio de marcadores imuno-histoquímicos tem por objetivo adequar o tratamento ao grupo de risco e reduzir recidivas e óbitos. Entre os marcadores mais estudados estão p53, B-cell lymphoma 2 (BCL-2), BCL-2 associated protein X (BAX) e fator de crescimento vascular endotelial e seu receptor 1 (VEGFR1), relacionados com a via apoptótica, o reparo do ácido desoxirribonucleico (DNA) e a neovascularização. OBJETIVO: O objetivo deste estudo é avaliar a expressão imuno-histoquímica de p53, BCL-2, BAX e VEGFR1 em amostras de nefroblastoma humano e correlacioná-las com fatores prognósticos clínico-patológicos. MATERIAL E MÉTODO: Foram utilizadas 29 amostras de nefroblastomas retiradas dos Serviços de Anatomia Patológica de dois hospitais de Curitiba, com diagnósticos entre 1994 e 2007. Por meio da técnica de imunoperoxidase, com as amostras em arranjo tecidual em matriz, realizou-se análise da imuno-histoquímica desses marcadores e sua comparação com fatores prognósticos clínico-patológicos. RESULTADOS: A maior imunoexpressão de VEGFR1 nos componentes blastematoso e epitelial mostrou associação positiva ao grupo de risco, sendo que isso poderia estar relacionado com a maior capacidade de invasão vascular neoplásica que pode ser conferida por esse fator de crescimento endotelial, aumentando, assim, as chances de metástases e alterando o estadimento, o grupo de risco e a evolução clínica. CONCLUSÃO: A expressão imuno-histoquímica aumentada de VEGFR1 mostrou associação diretamente proporcional ao grupo de risco dos pacientes com nefroblastoma

Immunohistochemical expression of Ki67, EGFR and TRKC and their correlation with prognostic factors in medulloblastoma

Introduction: Medulloblastoma is a malignant embryonal tumor of the cerebellum with poor prognosis. The treatment is based only on clinical criteria, such as risk group that only considers age, extent of tumor resection, recurrence, and metastasis. Objective: To evaluate a possible relationship between the immunoexpression of biomarkers (Ki67, receptor neutrophin-3 [TRKC], epidermal growth factor receptor [EGFR], B-cell lymphoma 2 [Bcl-2], and cyclin-D1), and the classical clinical prognostic factors of medulloblastoma. Material and method: thirty-five samples of pediatric medulloblastoma free of neoadjuvant chemotherapy were separated and reviewed for their histopathological classification; two areas representative of tumor were used in the construction of tissue microarrays. The following clinical data from 29 patients were used for comparison with the biomarkers expression: patient's age, presence or absence of complete tumor resection, staging patient's risk group, presence or absence of metastases, presence or absence of postoperative chemotherapy, and presence or absence of recurrence. Clinical follow-up of the study ranged from two to thirteen years, and cases with fatal outcome were also analyzed. Results: Patients with upper age showed higher expression of TRKC (p = 0.033). There was inversely proportional and statistically significant correlation between TRKC and Ki67 (p = 0.027). There was no statistical significance in the analysis of EGFR, Bcl2, and cyclin-D1. Conclusion: The immunoexpression of TRKC might be considered a biomarker related to tumors with better prognosis in patients with medulloblastoma, contributing to better risk groups' stratification

Quantitative analysis of inflammatory and adhesion molecules in lungs of neonates with chronic lung disease (bronchopulmonary dysplasia) receiving mechanical ventilation

ABSTRACT INTRODUCTION: Chronic lung disease (CLD), clinically known as bronchopulmonary dysplasia (BPD), is a major cause of morbidity in premature newborn and were submitted to oxygen therapy. OBJECTIVE: Immunohistochemical identification of inflammatory molecules in the lung tissue of premature neonates that died with CLD. METHODS: Immunohistochemical analysis of 51 samples of premature newborn lungs &#8211; grouped in: without CLD,"classic" CLD and"new" CLD. RESULTS: Neutrophil influx and the number of CD4+ and CD45RO+ cells were higher in the"classic" CLD group (p < 0.001). CONCLUSION: Our findings suggest that the inflammatory response is mediated by neutrophils and CD45RO+ and CD4+ T lymphocytes in the"classic" CLD