Screening for mutations in the GJB3 gene in Brazilian patients with nonsyndromic deafness

Abstract. Deafness is a complex disorder that is affected by a high number of genes and environmental factors. Recently, enormous progress has been made in nonsyndromic deafness research, with the identification of 90 loci and 33 nuclear and 2 mitochondrial genes involved (http://dnalab-www.uia.ac.be/dnalab/hhh/). Mutations in the GJB3 gene, encoding the gap junction protein connexin 31 (Cx31), have been pathogenically linked to erythrokeratodermia variabilis and nonsyndromic autosomal recessive or dominant hereditary hearing impairment. To determine the contribution of the GJB3 gene to sporadic deafness, we analysed the GJB3 gene in 67 families with nonsyndromic hearing impairment. A single coding exon of the GJB3 gene was amplified from genomic DNA and then sequenced. Here we report on three amino acid changes: Y177D (c.529T > G), 49delK (c.1227C > T), and R32W (c.144-146delGAA). The latter substitution has been previously described, but its involvement in hearing impairment remains uncertain. We hypothesize that mutations in the GJB3 gene are an infrequent cause of nonsyndromic deafness

Molecular genetics of non-syndromic deafness

One in every 1,000 newborn suffers from congenital hearing impairment. More than 60% of the congenital cases are caused by genetic factors. In most cases, hearing loss is a multifactorial disorder caused by both genetic and environmental factors. Molecular genetics of deafness has experienced remarkable progress in the last decade. Genes responsible for hereditary hearing impairment are being mapped and cloned progressively. This review focuses on non-syndromic hearing loss, since the gene involved in this type of hearing loss have only recently begun to be identified.Aproximadamente 1/1000 recém-nascidos apresentam deficiência auditiva congênita, sendo 60% dessas de etiologia genética. Na maioria dos casos, a deficiência auditiva é uma doença multifatorial causada por ambos os fatores, genéticos e ambientais. A genética molecular da deficiência auditiva tem apresentado grandes avanços na última década, pois os genes responsáveis pela deficiência auditiva hereditária vêm sendo progressivamente mapeados e clonados. Esta revisão enfatiza a deficiência auditiva não-sindrômica, uma vez que, os genes envolvidos nesse tipo de deficiência foram identificados recentemente.21622

Estudo de mutações no gene GJB3 como causa de deficiencia auditiva neurossensorial não-sindromica

Orientadores: Edi Lucia Sartorato, Andrea Trevas Maciel-GuerraDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias MedicasResumo: A deficiência auditiva neurossensorial está presente em cerca de 1 em cada 1000 crianças e, em muitos casos, é dificil estabelecer sua origem. Isso se deve a sua grande diversidade etiológica, e também ao fato do ouvido interno ser inacessível a procedimentos diagnósticos discriminantes. Embora não se saiba com exatidão o número de Zoei envolvidos na surdez com etiologia não esclarecida, é certo que mutações no gene GJB2 (Cx26) estão envolvidas em 50% dos casos de surdez pré-lingual não-sindrômica de herança autossômica recessiva. Alguns indivíduos com deficiência auditiva neurossensorial apresentam mutações no gene GJB2 em apenas um dos alelos, sendo de grande importância esclarecer se o fenótipo observado nesses casos seria devido à interação entre diferentes conexinas expressas no aparelho auditivo resultando em um efeito dominante negativo, afetando a função da proteína normal. Diferentes genes e mutações são apontados fteqüentemente como causa de deficiência auditiva em diferentes populações na medida em que mais indivíduos vão sendo estudados. Assim, outro gene também da família de conexinas, GJB3, que codifica a conexina 31 (Cx31), está relacionado como causa de surdez não-sindrômica principalmente com padrão de herança autossômico dominante. O estudo de mutações no gene GJB3 (conexina 31), tem como objetivo esclarecer alguns casos de perda auditiva nos quais não foram identificadas mutações no gene GJB2 (conexina 26), aumentando a possibilidade de realizar o aconselhamento genético da família, além de proporcionar melhor esclarecimento a respeito do complexo mecanismo que envolve a audição humana. É importante ressaltar que há grande variação no grau de comprometimento de capacidade auditiva devido a mutações nos diferentes genes de conexinas, dificultando o aconselhamento genético e o estabelecimento e o estabelecimento de um prognóstico para outros casos na família. Sendo assim, é sugerido o estudo mutações de no gene GJB3, nos casos onde foram encontradas mutações somente em um dos alelos do gene GJB2, poderia esclarecer alguns fenótipos observados. Portanto, o rastreamento de mutações no gene GJB3 em indivíduos com surdez neurossensorial de etiologia não esclarecida, em casos com padrões de herança recessivo ou dominante e em casos esporádicos contribuiria com mais informações essenciais ao aconselhamento genéticoAbstract: Deafness is one of the most common sensory defects in the general population and its prevalence increases with age. In developed countries about 60% of hearing loss cases are due to genetic factors. In Brazil the majority of cases of hearing loss are due to environmental factors. However, the proportion of genetic causes tends to increase as a result of improvement in health care, and thus modify daily medical practice in the etiologic investigation of deafuess. Recent years have seen tremendous progress localizing and cloning genes associated with inherited hearing loss. Most of cases inherited are nonsyndromic, and approximately 80% of these genes are autosomal recessive, 18% autosomal dominant, and 2% X-linked or mitochondrial inherited. Several connexin genes have been found mutated in patients with non-syndromic and syndromic deafness indicating an important role these proteins in the auditory system. Mutations in the connexin 26 (GJB2) lead to hearing impairment in most ofpopulations alI over the countries. This gene is responsible for approximateIy 80% ofthe non-syndromic recessive deafness. The GJB3 gene (Cx31) has recently been found as deafuess gene. Mutations in the connexin 31 have been detected either in erythrokeratodermia variabilis and non-syndromic autosomal recessive or dominant deafness. To determine the contribution of connexin 31 to sporadic deafness, we ana1ysed the entire gene of connexin 31 in 67 families with non-syndromic hearing impairment. We reported three amino acid changes, YI77D, 49deIK and R32W, and two nuc1eotides variants, which represents a silent mutation. The R32W substitution has been previously described, and its invo lvement in hearing impairment remains uncertain.We presume that mutations in connexin 31 gene are an infrequent cause of non syndromic deafnessMestradoCiencias BiomedicasMestre em Ciencias Biomédica

Molecualr study in keratinization disturb and hearing loss genes

Orientadores: Edi Lucia SartoratoTese (doutorado)- Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias MedicasResumo: Nos organismos superiores, a comunicação entre as células ocorre através de proteínas denominadas conexinas, implicadas na comunicação intercelular (gap junction), as quais permitem a transferência direta de pequenas moléculas e íons. Na pele desempenham um papel crucial na sinalização e diferenciação epidérmica. Na cóclea as gap junctions existem entre as células de suporte das células ciliadas, formando um caminho para a reciclagem dos íons K+, envolvidos na transdução da audição. A multiplicidade de funções exercidas pelas gap junctions é refletida pela variedade de fenótipos causados por mutações em genes de conexinas. A combinação da perda auditiva, distúrbio congênito da diferenciação celular das camadas da epiderme, e envolvimento de tecidos ectodérmicos, reflete o papel crucial das conexinas na diferenciação epitelial e na transdução auditiva. Dessa forma, frente a um indivíduo com distúrbios de queratinização associada ou não a perda auditiva propõe-se à investigação molecular de conexinas que se expressam na cóclea e epiderme, como as conexinas 26, 30, 31, 43, 30.3 e 31.1. Assim sendo, o presente trabalho tem como objetivo a análise molecular dos genes GJB2 (Cx26), GJB6 (Cx30), GJB3 (Cx31), GJA1 (Cx43), GJB4 (Cx30.3) e GJB5 (Cx31.1), bem como a triagem das deleções ?(GJB6-D13S1830) e ?(GJB6-D13S1854) no gene GJB6 e da mutação mitocondrial A7445G no gene tRNASer(UCN). As metodologias empregadas para avaliação molecular dos pacientes foram o seqüenciamento automático dos produtos de PCR dos genes conexinas, PCR multiplex para detecção das deleções e análise de restrição do produto de PCR do DNA mitocondrial. Nos resultados foram observados dois casos com mutações autossômicas dominantes no gene GJB2 e um paciente com herança digênica, com mutações nos genes GJB2 e GJB3. Outras alterações foram observadas nos demais pacientes, algumas descritas como polimorfismos freqüentes na população normal, ou ainda outras alterações com funções desconhecidasAbstract: The connexins are family proteins whose major function is as part of the gap junctions of cell-to-cell channels. They are expressed in several tissues including brain, skin, and cochlea. Mutations in connexins genes play a major role in nonsyndromic deafness, but have been also described in individuals with variable dermatological features. In recent years, many genes responsible for hereditary skin diseases have been discovered. These genes may encode different proteins that participate in the terminal differentiation of the epidermis. Therefore alteration or absence of these proteins causes a keratinization disorder. It has been demonstrated that distinct germline mutations within six connexin (Cx) genes GJB2 (Cx26), GJB6 (Cx30), GJB3 (Cx31), GJA1 (Cx43), GJB4 (Cx30.3), and GJB5 (Cx31.1), may cause sensorineural hearing loss and various skin disease phenotypes. The objectives are to screen for mutations in the connexin genes, the ?(GJB6-D13S1830) e ?(GJB6-D13S1854) deletions in GJB6 gene and mitochondrial mutation A7445G in tRNASer(UCN) gene. For mutation analysis, the single coding regions of the connexin genes were sequenced from PCR products. The deltions of the GJB6 gene were amplified the breakpoint junction of the ?(GJB6-D13S1830) e ?(GJB6-D13S1854) by PCR and the mitochondrial mutation A7445G were performed using PCR were digested with specific restriction enzymes (Xba I). We report two autosomal dominant mutations different in GJB2 gene and digenic inheritance with mutations in GJB2 and GJB3 genes. The mutations in the connexin genes in individuals with deafness and different skin disorders illustrating the heterogeneity genetic and clinical of the conditionDoutoradoCiencias BiomedicasMestre em Ciências Médica

MIGRAÇÕES FRONTEIRIÇAS E A INFLUÊNCIA NO DESENVOLVIMENTO ECONÔMICO NA AMAZÔNIA

Na pós-modernidade, os processos migratórios têm sido constantemente debatidos na academia, assim como, e em outras áreas de comunicação em massa, tendo em vista os reflexos sociais, econômicos, culturais e jurídicos que causam nos países envolvidos. E, ao se discutir a migração em território amazônico, é imprescindível trazer a importância dos deslocamentos humanos para o desenvolvimento da região. Nesse sentido, o presente artigo busca responder o seguinte questionamento que medida o processo migratório tem influenciado no desenvolvimento econômico na Amazônia? Como objetivo geral o trabalho busca discutir as relações migratórias no contexto regional amazônico, destacando os deslocamentos populacionais como influencia no desenvolvimento econômico na região. E, como objetivos específicos buscou-se: a) compreender o espaço amazônico como uma região de fronteira que propicia o deslocamento populacional; b) avaliar a importância do transnacionalismo e da globalização na região; e por fim, c) entender a relevância do processo migratório para o desenvolvimento econômico na região. metodologicamente, utilizou-se o método dedutivo de pesquisa, sendo realizado levantamento teórico bibliográfico através de literatura acerca dos postulados que tratam da migração, do desenvolvimento econômico e transnacionalismo no território amazônico. &nbsp

Method For Genetically Modifying Acidophilic Bacteria And Constructing A Transformation Vector

A presente invenção descreve um processo de transformação de bactérias acidófilas quimiolitotróficas através da técnica de eletroporação. O processo proposto é capaz de transformar uma linhagem de bactéria com um vetor de transformação denominado vetor pAF que contém uma origem vegetativa de replicação capaz de conferir ao vetor a habilidade de se replicar no interior da bactéria, sem alterar suas funções fisiológicas naturais e, o uso das bactérias modificadas de acordo com a invenção em processos de biolixiviação de minérios sulfatados de cobre, ouro, urânio níquel, zinco, cobalto e outros.The present invention describes a method for transforming chemolithotrophic acidophilic bacteria using electroporation technology. The proposed method allows transforming a bacterial line using a transformation vector, the pAF vector, which contains an origin of vegetative replication that allows the vector to replicate inside the bacteria without altering the natural physiological functions of the latter. Also disclosed is the use of the bacteria modified according to the invention in bioleaching processes of sulphated copper, gold, uranium, nickel, zinc and cobalt ore, inter alia.AU2012222880 (A1); AU2012222880 (A2)C12N15/63C12N15/64C12N15/74AU20120222880C12N15/63C12N15/64C12N15/7

Process For Genetically Engineering Acidophilic Bacteria And Constructing A Transformation Vector

The present invention describes a method for transforming chemolithotrophic acidophilic bacteria using electroporation technology. The proposed method allows transforming a bacterial fine using a transformation vector, the pAF vector, which contains an origin of vegetative reparation that allows the vector the replicate inside the bacteria without altering the natural physiological functions of the latter. Also disclosed is the use of the bacteria modeled according to the invention in bioleaching processes of sulphated copper, gold, uranium, nickel, zinc and cobalt ore, inter alia.CA2832932 (A1)C12N15/63C12N15/64C12N15/74CA20122832932C12N15/63C12N15/64C12N15/7