Evaluation of in vitro Cytotoxic Effects of Especifico Pessoa Phytotherapic Tincture on Ehrlich Tumor Cells and Mice Spleen Cells

Especifico Pessoa (EP) is traditionally used for the treatment of snakebite envenoming. The traditional use of EP and its properties have been reported. In this study, we evaluated the in vitro cytotoxic effects of EP on Ehrlich tumor and mice spleen cells. Cytotoxicity assay was carried out by using Trypan blue exclusion method. Spleen cell suspension was prepared (n=2) with RPMI medium and tumor cell suspension was prepared from ascitic fluid of Ehrlich tumor-bearing mice (n=1); both the suspensions contained 4 x 106 cells mL-1. Pure EP or EP diluted in RPMI (1:2; 1:4) was used. The results were expressed as percentage of cell viability and demonstrate that EP is toxic to Ehrlich cells at all concentrations (Control: 96.42 ± 3.40; Pure: 1.55 ± 2.91; 1:2: 4.85 ± 5.04; 1:4: 13.39 ± 5.08), but nontoxic to spleen cells in at the lowest dilution (Control: 72.86 ± 13.79; Pure: 13.52 ± 6,36; 1:2: 41.36 ± 13.51; 1:4: 56.59 ± 8.62). Therefore, the results demonstrate that EP has cytotoxic effects, depending on the dose and the cell line evaluated.Especifico Pessoa (EP) é utilizado no envenenamento por serpentes. Estudos comprovam seu uso tradicional e descrevem outras propriedades, como antitumoral. O objetivo deste estudo foi avaliar seu efeito citotóxico em células do Tumor de Ehrlich e esplênicas de camundongos. O ensaio foi realizado pelo método de exclusão do Azul Tripan. A suspensão de células esplênicas foi obtida (n = 2) em RPMI e a tumoral a partir do fluido ascitico de camundongos portadores do tumor (n = 1), ambos a 4 x 106 células mL-1. O EP foi usado puro ou diluído em RPMI (1:2; 1:4). Os resultados são expressos como porcentagem de viabilidade celular e demonstraram que o EP é tóxico para células tumorais, em todas as concentrações (Controle: 96,42 ± 3,40; Puro: 1,55 ± 2,91; 1:2: 4,85 ± 5,04; 1:4: 13,39 ± 5,08), mas atóxico para os esplenócitos na menor diluição (Controle: 72,86 ± 13,79; Puro: 13,52 ± 6,36; 1:2: 41,36 ± 13,51; 1:4: 56,59 ± 8,62). Portanto, os resultados demonstram que o EP tem efeito citotóxico, dependendo da dose e linhagem celular utilizada

Natural killer activity of the spleen cells of Ehrlich tumor-bearing mice treated with Copaifera multijuga extract

AIMS: Copaifera multijuga Hayne oleoresin is commonly used in traditional medicine owing to its anti-inflammatory, antiseptic, antitumor, and antibacterial properties. However, little is known about the effect of the compounds from the bark of this plant. In this study, the immunomodulatory effect of the ethanolic extract of C. multijuga bark via natural killer activity of non-adherent spleen cells of Ehrlich tumor-bearing mice was evaluated.METHODS: Male Swiss mice were inoculated subcutaneously with 1×106 Ehrlich tumor cells (Ehrlich and Ehrlich/C. multijuga group) or phosphate buffered saline solution (control group and C. multijuga group) and treated orally daily with C. multijuga extract (200 mg kg-1, 0.1 mL per mouse, for the Ehrlich/C. multijuga and C. multijuga groups) or phosphate buffered saline solution (control group and Ehrlich group). The four experimental groups consisted in eight mice each and were organized in two sets, one treated for seven days and another treated for 14 days, totalizing 64 mice throughout the experiment. Twenty-four hours after the last oral administration, the mice were euthanized and the spleen tissue was isolated to prepare a non-adherent spleen cell suspension and to evaluate natural killer activity. Data are presented as the cell lysis percentage of Yac.1 target cells by non-adherent spleen cells.RESULTS: Treatment for seven days increased natural killer activity in the Ehrlich/C. multijuga group (21.20±8.89, p0.05).CONCLUSIONS: Treatment for seven days with an ethanolic extract of C. multijuga bark enhanced the natural killer activity of non-adherent spleen cells from Ehrlich tumor-bearing mice.***Atividade natural killer das células esplênicas de camundongos portadores do tumor de Ehrlich tratados com extrato de Copaifera multijuga***OBJETIVOS: O óleo-resina de Copaifera multijuga Hayne é popularmente utilizado na medicina tradicional por suas propriedades anti-inflamatória, antisséptica, antitumoral e antibacteriana. Entretanto, há poucos estudos sobre o efeito dos compostos obtidos da casca da planta. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito imunomodulador do extrato etanólico da casca da C. multijuga na atividade natural killer das células esplênicas não aderentes de animais portadores do tumor de Ehrlich.MÉTODOS: Camundongos Swiss machos foram inoculados subcutaneamente com 1 x 106 células do tumor de Ehrlich (grupo Ehrlich e Ehrlich/C. multijuga) ou com solução salina tamponada (grupo controle e C. multijuga) e tratados diariamente (gavagem) com extrato de C. multijuga (200 mg kg-1, 0,1mL cada um, para os grupos Ehrlich/C. multijuga e C. multijuga) ou com solução salina tamponada (grupo controle e grupo Ehrlich). Os quatro grupos experimentais consistiram de oito animais cada e foram organizados em dois conjuntos, um tratado por sete dias e outro tratado por 14 dias, totalizando 64 animais durante todo o experimento. Após 24 horas do término do tratamento, os animais foram eutanasiados para obtenção da suspensão de células esplênicas não aderentes e avaliação da atividade natural killer. Os resultados são apresentados como porcentagem da lise celular das células alvo Yac.1 pelas células esplênicas não aderentes.RESULTADOS: A análise dos resultados demonstrou que aos sete dias de tratamento a C. multijuga aumentou a atividade natural killer no grupo Ehrlich/C. multijuga (21,20±8,89, p0,05).CONCLUSÕES: Os resultados demonstraram que o tratamento com o extrato etanólico da casca de C. multijuga favoreceu a atividade natural killer das células esplênicas não aderentes dos animais portadores do tumor de Ehrlich apenas aos sete dias de tratamento