Estudio de la regulación transcripcional del promotor de la proteína metalotioneína de tipo 2B mediante el sistema CRISPR/Cas9 en Nicotiana benthamiana

[EN] The discovery of CRISPR/Cas system has meant a revolution in the synthetic biology field. Among all its applications, it could be found the genomic engineering or programmable transcriptional modulation. In this work, we have tried to modulate the expression of the Solanum lycopersicum Metallothionein-like protein type 2B promoter with the CRISPR/Cas9 system in Nicotiana benthamiana. Two different strategies have been developed in order to optimize the transcriptional regulation system in transient expression as much as in stable expression. The first strategy consists in fusing different activation and repression domains to dCas9 in C-terminal. On the other hand, the second one consists in the modification of the structure of RNA guide, which is joined with dCas9, in order to be recognized by MS2 virus coat protein. This protein has been fused to different activation and repression domains, allowing for a combinatorial action between domains fused to dCas9 and the ones linked to the complex through MS2.[ES] El descubrimiento del sistema CRISPR/Cas ha supuesto una revolución para el campo de la biología sintética, ya que entre sus múltiples aplicaciones se encuentran el editado genómico y la regulación transcripcional programable. En el presente trabajo se ha tratado de modular la expresión del promotor de la proteína metalotioneína de tipo 2B (MTB) de Solanum lycopersicum utilizando el sistema CRISPR/dCas9 en Nicotiana benthamiana. Se han desarrollado dos estrategias diferentes con el fin de optimizar el sistema de regulación transcripcional tanto en expresión transitoria como en estable. Por un lado, la fusión de distintos dominios de activación y represión a dCas9 en C-terminal. Por otro lado, se ha modificado la estructura del guía de ARN que se une a dCas9, para que sea reconocido por la proteína de la cápsula del virus MS2. Esta proteína se ha fusionado también a diferentes dominios de activación y represión, permitiendo una acción combinatoria entre los dominios fusionados a dCas9 y los unidos al complejo mediante MS2.Ajenjo Bauzá, M. (2018). Estudio de la regulación transcripcional del promotor de la proteína metalotioneína de tipo 2B mediante el sistema CRISPR/Cas9 en Nicotiana benthamiana. http://hdl.handle.net/10251/107289TFG

Pràctica 3. Relació convergència-acomodació

El document forma part dels materials docents programats mitjançant l'ajut del Servei de Política Lingüística de la Universitat de València.Pràctica 3 de l'assignatura de psicofísica de la visió on l'objectiu és obtenir la gràfica de la relació convergència-acomodació trobant les amplituts relatives de convergència i acomodació per a diferents distàncies d’observació

Pràctica 1. Presbícia. Laboratori d'Òptica Fisiològica

El document forma part dels materials docents programats mitjançant l'ajut del Servei de Política Lingüística de la Universitat de València.Aquest és un guió de la pràctica 1 de l'assignatura d'Òptica Fisiògica, on s'aborda com estudiar i comprovar al laboratori què els passa als pacients prèsbites, i com cal compensar-los òpticament per a que funcionen bé, treballant amb un model d'ull simplificat i un altre de reduït.This is a script for practice 1 of Physiological Optics subject. In it, we addressed how to study and check in the laboratory what happens with presbyopic patients, and how to compensate them optically so that they work well. To do it, we will work with a simplified eye model and with a reduced one

Pràctica 5. Mesura de l'agudetza visual

El document forma part dels materials docents programats mitjançant l'ajut del Servei de Política Lingüística de la Universitat de València.Pràctica 5 de l'assignatura de psicofísica de la visió on l'objectiu és comparar els valors d’agudetza visual mesurats amb tasques de detecció, discriminació i reconeiximient, i introduir una tasca de superagudetz

Pràctica 7. Colorimetria triestímul I. L'espai CIEXYZ1931

El document forma part dels materials docents programats mitjançant l'ajut del Servei de Política Lingüística de la Universitat de València.Pràctica 7 de l'assignatura de psicofísica de la visió on l'objectiu és aprendre a caracteritzar i operar amb colors, emprant la descripció en valors triestímul i en coordenades cromàtique

Pràctica 4. Agudetza visual estereoscòpica

El document forma part dels materials docents programats mitjançant l'ajut del Servei de Política Lingüística de la Universitat de València.Pràctica 4 de l'assignatura de psicofísica de la visió on l'objectiu és trobar l’agudetza visual estereoscòpica emprant el mètode d’estímuls constant

Pràctica 2. L`horòpter longitudinal

El document forma part dels materials docents programats mitjançant l'ajut del Servei de Política Lingüística de la Universitat de València.Pràctica 2 de l'assignatura de psicofísica de la visió on l'objectiu és trobar l’horòpter longitudinal utilitzant el criteri del plà front-paral·lel aparen

Pràctica 8. Colorimetria triestímul II. Tests de visió de color

El document forma part dels materials docents programats mitjançant l'ajut del Servei de Política Lingüística de la Universitat de València.Pràctica 8 de l'assignatura de psicofísica de la visió on l'objectiu és realitzar tests de làmines pseudoisocromàtiques, per a detectar i gradar defectes congènits de la visió del color, treballant a l’espai CIEXYZ193

Pràctica 6. Mesura de la funció de sensibilitat al contrast acromàtica

El document forma part dels materials docents programats mitjançant l'ajut del Servei de Política Lingüística de la Universitat de València.Pràctica 6 de l'assignatura de psicofísica de la visió on l'objectiu és mesurar les funcions de sensibilitat al contrast acromàtic amb diferents desenfocament

Pràctica 1. Mètodes psicofísics de mesura

El document forma part dels materials docents programats mitjançant l'ajut del Servei de Política Lingüística de la Universitat de València.Pràctica 1 de l'assignatura de psicofísica de la visió on l'objectiu és aprendre a emprar alguns dels mètodes que s’usen més habitualment als experiments de psicofísica: el mètode d’ajust, el mètode dels límits clàssic, un mètode adaptatiu per cerca binària i el mètode dels estímuls constant